❶ 肝损伤小鼠肝脏HE染色能看出纤维化吗
看了楼上的回复,楼上的masson染色质量是可以的。masson染色是经典的肝纤维化特染方法,但是操作步骤繁琐,10几个步骤,染色时间也要求掌握的比较准确,对技术要求高一些,而且时间长了似乎要褪色。我看过一些masson染色的中文文章,就贴的照片而言,是不能准确评分的。天狼猩红特染是傻瓜型染色,3步解决,没什么特别的要求,而且可以对胶原进行分型,颜色鲜艳,长期不褪色。现在在《hepatology》杂志中已经见不到masson染色了,全部是天狼猩红特染,有的再加亮绿复染颜色更鲜明。
❷ 胶原纤维的功能特点
胶原纤维功能:减缓衰老速度,特点:高强度、高耐磨性,耐刺穿性、抗压性强。胶原纤维是主要含有胶原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。
胶原纤维是真皮中的主要成分,占真皮全部纤维质量的95%到98%。新鲜的胶原纤维呈白色,故又称白纤维。在HE染色标本中,胶原纤维被染成粉红色,较粗大,直径0.5到20um,成束分布,排列紧密,并交织成网。
胶原是唯一含羟脯氨酸较多的蛋白质,因此,测定羟脯氨酸的量能确定组织中胶原的含量。胶原蛋白占全身蛋白质的30%。聚合成胶原的微原纤维的蛋白质分子称为原胶原分子。
❸ 试述胶原纤维的结构和特性
试述胶原纤维的结构和特性。
LM:纤维粗细不等,形成波浪形走行的纤维束,相互交织成网,HE染色片上呈粉红色。 EM:由胶原原纤维组成,胶原原纤维上可见明暗相间的周期性横纹。 特性:韧性大、抗拉力强。
❹ he染色的概念,原理,结果,异染性
he染色的概念:
苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
he染色结果:
苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。
he染色的原理:
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。
组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。
❺ 弹性纤维和胶原纤维是神马(什么)东西
弹性纤维是一种纤维,又名黄纤维,含量较胶原纤维少,但分布广。新鲜状态下呈黄色,在HE染色切片中,着色淡红,不易与胶原纤维区分,用醛复红能将弹性纤维染成紫色,弹性纤维在疏松结缔组织中略呈黄色,折光性强,富于弹性。
胶原纤维是主要含有胶原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内,在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
(5)he染色胶原纤维紧密怎么看扩展阅读:
弹性纤维:
一般较胶原纤维细,纤维有分支,排列散乱。其化学成分主要是弹性蛋白,对牵拉作用有更大的耐受力。皮肤和腱的弹性纤维由成纤维细胞产生,在大血管则由平滑肌细胞产生。弹性纤维描述:染成蓝紫色,单条分布,有分支,并交织成网。
胶原纤维:
胶原纤维是真皮中的主要成分,占真皮全部纤维质量的95%-98%.新鲜的胶原纤维呈白色,故又称白纤维。在HE染色标本中,胶原纤维被染成粉红色,较粗大,直径0.5-20um,成束分布,排列紧密,并交织成网。
胶原是唯一含羟脯氨酸较多的蛋白质,因此,测定羟脯氨酸的量能确定组织中胶原的含量。胶原蛋白占全身蛋白质的30%。聚合成胶原的微原纤维的蛋白质分子称为原胶原分子 。
❻ wright染色与HE染色各有什么特点
瑞特(Wright)染色:瑞特染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。PH对细胞染色有影响。
HE染色
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
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H-E染色评定标准:切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。
细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏酸性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色 偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片必须清洁,无酸碱污染。
配制顼特液必须用优质甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。
新鲜配制的染料偏碱,须在室温或37℃下贮存一定时间,待染料成熟,美蓝逐渐转变为天青B后才能使用,贮存时愈久,染色效果愈好。
❼ 怎样区别胶原纤维的韧性和弹性纤维的弹性
胶原纤维(collagenous fiber):是疏松结缔组织中的主要纤维成分,新鲜时呈白色,故又称白纤维。纤维常集合成粗细不等的束,直径约为1~20μm,HE染色标本上呈粉红色,波
浪状走行,常有分支。胶原纤维是由更细的胶原原纤维(collagenous fibril)集合而成。电镜下,胶原原纤维的直径为10~200nm,每根原纤维上具有64nm明暗相间的周期性横纹。它的化学成分是Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白(collagen)。胶原纤维具有很强的韧性和抗拉力,而弹性较差。
弹性纤维(elastic fiber):数量比胶原纤维少,新鲜时呈黄色,又称黄纤维。纤维较细,直径约0.2~1.0μm,直行、有分支并互相交织成网。HE染色标本上不易着色,折光性强,常呈较亮的淡粉色。可用特殊的弹性染色法显示(如被醛复红染成蓝紫色或被地伊红染成棕褐色)。电镜下,弹性纤维是由微原纤维(microfibril)
和均质的弹性蛋白(elastin)构成。弹性蛋白构成纤维的核心区,电子密度低,核心外是由微原纤维形成管状的鞘包绕着。弹性纤维富于弹性而韧性差,与胶原纤维交织在一起,使疏松结缔组织既有韧性又有弹性,以保持其连接的组织和器官的形态、位置相对恒定并有一定的可变性。随着年龄的增长,弹性可逐渐减弱乃至消失。
不知对你有没有帮助。
❽ HE染色结果怎么分析
HE染色结果需根据正常组的染色结果进行对比分析,可参照病理图谱书或文献描述进行结果分析。
HE又叫苏木素-伊红染色,染色后细胞核蓝色即苏木素的颜色,细胞质红色-伊红颜色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整,组织有无损伤;然后看切片有无刀痕;最后细胞核是否清晰可见,胞核与包浆要对比鲜明。
HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
相关信息
构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
❾ 胶原纤维的胶原蛋白的染色
胶原纤维在HE染色法被染成粉红色,除此之外,它还可以用一些阴离子的染料来进行染色,如用淡绿可把它们染为绿色,用甲苯胺蓝可将其染为蓝色,在网状纤维染色中,如不加以处理,它又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫细胞化学染色中,胶原纤维由于含的负电荷过多,常导致某些非特异性的染色,应特别注意。
(一).Van Gieson(V.G)染色法
I. 试剂的配制:
weigert氏苏木素
A液: 苏木素 1g (haematoxylin)
无水酒精 100ml
B液: 30%三氯化铁 4ml (ferric chloride)
蒸馏水 95ml
盐酸 1ml
II.Van Gieson氏液
A液: 酸性品红 1g(acid fuchsin)
蒸馏水 100ml
B液: 苦味酸饱和水溶液,(1.22%)(picric acid)
注意事项:
1、Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合,几个小时内用完,最长不得超过一天。
2、苏木素配后经二十多天才能成熟,必须提前配制。
3、该液能抵抗弱酸性染液,对已着染的细胞核在酸性染液的作用,不易被脱去颜色,如果不特别深染,则无须分化。
4、Van Gieson氏液取B液9ml,加入A液1ml,即可使用。
操作方法:(后面的各种方法,如没特别说明,都在室温下进行)
1、切片脱蜡至水,
2、用Weigert氏苏木素染20min,
3、水洗,必要时可分化,
4、流水冲洗10min,
5、染Van Gieson氏液1min,
6、用95%酒精快速分化,
7、无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
结果:
胶原纤维:鲜红色,肌纤维: 黄色,红细胞: 黄色,细胞核: 蓝黑或灰色。
注意事项:
1、该法染完的切片,较易褪色如需照相,应尽早完成。
2、苏木素染液如为棕色或沉淀,应将其抛弃。
3、分化用的酒精,应使用95%以上的酒精,低浓度的酒精褪色能力强,容易将着染的红色脱去。
4、切片也可以用天青兰苏木素替代Weigert氏苏木素,染核效果基本一样。
(二).Masson氏三色染色法:天青石蓝液的配制:天青石蓝(Celestin blue B) 1.25g硫酸铁铵(ferric ammonium sulfate)1.25g
蒸馏水 200ml
甘油(glycerin) 30ml
将前两者溶于蒸馏水中,然后煮沸,冷却后过滤,再加入甘油和麝香草酚。
Mayer氏苏木素的配制苏木素 0.1g蒸馏水 100ml
钾明矾(Potassium alum) 5g
柠檬酸(Citric acid) 0.1g
水合氯醛(Chloral hydrate)20mg
配制法:
将苏木素放入蒸馏水中,用玻棒不停地搅拌直至完全溶解,再依次加入钾明矾,柠檬酸和水合氯醛,再继续搅拌,最后加入碘酸钠,搅拌均匀,即可使用。
丽春红酸性品红液的配制:丽春红(ponceau 2R) 0.7g
酸性品红(acid fuchsin)0.3g
冰醋酸 1ml
蒸馏水 99ml
操作方法:1
、切片脱蜡至水,2、1%高锰酸钾氧化切片5min,
3、水洗,草酸漂白1min,
4、水洗,蒸馏水洗,天青石蓝染5min水洗,
5、摔去余液不用水洗,滴染Mayer氏苏木素3-5min,
6、流水冲洗5-10min,
7、丽春红苦味酸饱和液染5min,
8、1%醋酸水溶液洗,
9、1%磷钼酸分化切片约5min,
10、蒸馏水洗,
11、1%淡绿或者甲苯胺蓝滴染30s,
12、1%醋酸水溶液洗切片,
13、95%酒精分化,无水酒精脱水,
14、二甲苯透明,中性树胶封固。
结果:胶原纤维呈现绿色或蓝色,细胞核呈现灰黑或灰蓝色,肌肉和胞质红细胞呈现红色。
注意事项:①Masson氏染液配完后保存时间不宜过长,如有可能,每次染色以染配为佳,如何可使着色颜色的鲜艳性。②切片在各级酒精中脱水,时间不宜过长,否则会将着染的颜色脱去。③切片保存所着染的颜色显长为1—2年以后会随着时间的延长而逐渐褪去,应予注意。④磷钼酸和磷钨酸在染色法中的作用各有不同,磷钼酸作用于胶原纤维,磷钨酸作用于纤维胶]质,肌胶质,神经胶质和上皮纤维等。上述两种试剂的使用,可以促进组织有选择的染色,它们可以减少背景和核的染色,使背景清晰。⑤如有可能,在组织固定时,用Zenker氏固定液固定,如此对染色效果将更好。
临床应用:1
、与淀粉样物的区别: 胶原纤维发生病变如坏死或透明变性时,它与淀粉样物在HE染色时被染为粉红色,不好区别。应用V.G染色法,能将胶原纤维染为粉红色,而淀粉样物将被染为黄色。2、应用与间胚叶来源肿瘤的区别:
如纤维瘤(肉瘤),平滑肌、横纹肌瘤(肉瘤),神经纤维瘤(肉瘤)、恶性纤维组织细胞瘤等,由于都含有大量的纤维,HE染色均为红色。应用Masson氏染色法,可将胶原纤维染色蓝色或绿色,肌源性组织被染为红色。
3、应用与其他慢性炎症的区别。
如慢性阑尾炎,疤痕愈合时,纤维愈复病灶可被染为鲜红色或蓝绿色,SARS病患者愈合后有的肺部可出现疤痕,粘连,此时可显示蓝色或绿色。
可用于鉴定肝硬化及创伤组织的修复程度。肝硬化时的肝组织有许多不同大小的假小叶,用上述方法显示时,可显示出不同的组织结构。V.G法可将包绕假小叶的胶原纤维染成红色,胆汗呈绿色。
小结
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。分子量大的染料分子移动较迟缓,渗透力较弱,可作用于组织强求构较疏松的组织,染色时间可适当延长。
在相关的染料中,分子量从小到大依次排列是:苦味酸(黄色):229.11;桔黄G(黄色):452;丽春红(红色):480.42;酸性品红(红色):585.53;苯胺蓝(蓝色):737.72;亮绿(绿色):792.72;甲基蓝(蓝色)>99。
染色是一个较为复杂的化学反应和物理作用的双重过程,在应用这些方法时,根据不同情况,选择不同的方法,认真地操作,方能获得最佳的效果。
❿ HE染色时细胞器分别是什么颜色
采用苏木精-伊红染色法也就是HE染色法的话,不能准确说出细胞器的颜色,实验记录或考试时只能说染色效果为 :细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。或者详细说明如下:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。