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胶原纤维为什么被染成粉红色

发布时间:2023-07-14 09:09:38

⑴ 胶原纤维的胶原蛋白的染色

胶原纤维在HE染色法被染成粉红色,除此之外,它还可以用一些阴离子的染料来进行染色,如用淡绿可把它们染为绿色,用甲苯胺蓝可将其染为蓝色,在网状纤维染色中,如不加以处理,它又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫细胞化学染色中,胶原纤维由于含的负电荷过多,常导致某些非特异性的染色,应特别注意。
(一).Van Gieson(V.G)染色法
I. 试剂的配制:
weigert氏苏木素
A液: 苏木素 1g (haematoxylin)
无水酒精 100ml
B液: 30%三氯化铁 4ml (ferric chloride)
蒸馏水 95ml
盐酸 1ml
II.Van Gieson氏液
A液: 酸性品红 1g(acid fuchsin)
蒸馏水 100ml
B液: 苦味酸饱和水溶液,(1.22%)(picric acid)
注意事项:
1、Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合,几个小时内用完,最长不得超过一天。
2、苏木素配后经二十多天才能成熟,必须提前配制。
3、该液能抵抗弱酸性染液,对已着染的细胞核在酸性染液的作用,不易被脱去颜色,如果不特别深染,则无须分化。
4、Van Gieson氏液取B液9ml,加入A液1ml,即可使用。
操作方法:(后面的各种方法,如没特别说明,都在室温下进行)
1、切片脱蜡至水,
2、用Weigert氏苏木素染20min,
3、水洗,必要时可分化,
4、流水冲洗10min,
5、染Van Gieson氏液1min,
6、用95%酒精快速分化,
7、无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
结果:
胶原纤维:鲜红色,肌纤维: 黄色,红细胞: 黄色,细胞核: 蓝黑或灰色。
注意事项:
1、该法染完的切片,较易褪色如需照相,应尽早完成。
2、苏木素染液如为棕色或沉淀,应将其抛弃。
3、分化用的酒精,应使用95%以上的酒精,低浓度的酒精褪色能力强,容易将着染的红色脱去。
4、切片也可以用天青兰苏木素替代Weigert氏苏木素,染核效果基本一样。
(二).Masson氏三色染色法:天青石蓝液的配制:天青石蓝(Celestin blue B) 1.25g硫酸铁铵(ferric ammonium sulfate)1.25g
蒸馏水 200ml
甘油(glycerin) 30ml
将前两者溶于蒸馏水中,然后煮沸,冷却后过滤,再加入甘油和麝香草酚。
Mayer氏苏木素的配制苏木素 0.1g蒸馏水 100ml
钾明矾(Potassium alum) 5g
柠檬酸(Citric acid) 0.1g
水合氯醛(Chloral hydrate)20mg
配制法:
将苏木素放入蒸馏水中,用玻棒不停地搅拌直至完全溶解,再依次加入钾明矾,柠檬酸和水合氯醛,再继续搅拌,最后加入碘酸钠,搅拌均匀,即可使用。
丽春红酸性品红液的配制:丽春红(ponceau 2R) 0.7g
酸性品红(acid fuchsin)0.3g
冰醋酸 1ml
蒸馏水 99ml
操作方法:1
、切片脱蜡至水,2、1%高锰酸钾氧化切片5min,
3、水洗,草酸漂白1min,
4、水洗,蒸馏水洗,天青石蓝染5min水洗,
5、摔去余液不用水洗,滴染Mayer氏苏木素3-5min,
6、流水冲洗5-10min,
7、丽春红苦味酸饱和液染5min,
8、1%醋酸水溶液洗,
9、1%磷钼酸分化切片约5min,
10、蒸馏水洗,
11、1%淡绿或者甲苯胺蓝滴染30s,
12、1%醋酸水溶液洗切片,
13、95%酒精分化,无水酒精脱水,
14、二甲苯透明,中性树胶封固。
结果:胶原纤维呈现绿色或蓝色,细胞核呈现灰黑或灰蓝色,肌肉和胞质红细胞呈现红色。
注意事项:①Masson氏染液配完后保存时间不宜过长,如有可能,每次染色以染配为佳,如何可使着色颜色的鲜艳性。②切片在各级酒精中脱水,时间不宜过长,否则会将着染的颜色脱去。③切片保存所着染的颜色显长为1—2年以后会随着时间的延长而逐渐褪去,应予注意。④磷钼酸和磷钨酸在染色法中的作用各有不同,磷钼酸作用于胶原纤维,磷钨酸作用于纤维胶]质,肌胶质,神经胶质和上皮纤维等。上述两种试剂的使用,可以促进组织有选择的染色,它们可以减少背景和核的染色,使背景清晰。⑤如有可能,在组织固定时,用Zenker氏固定液固定,如此对染色效果将更好。
临床应用:1
、与淀粉样物的区别: 胶原纤维发生病变如坏死或透明变性时,它与淀粉样物在HE染色时被染为粉红色,不好区别。应用V.G染色法,能将胶原纤维染为粉红色,而淀粉样物将被染为黄色。2、应用与间胚叶来源肿瘤的区别:
如纤维瘤(肉瘤),平滑肌、横纹肌瘤(肉瘤),神经纤维瘤(肉瘤)、恶性纤维组织细胞瘤等,由于都含有大量的纤维,HE染色均为红色。应用Masson氏染色法,可将胶原纤维染色蓝色或绿色,肌源性组织被染为红色。
3、应用与其他慢性炎症的区别。
如慢性阑尾炎,疤痕愈合时,纤维愈复病灶可被染为鲜红色或蓝绿色,SARS病患者愈合后有的肺部可出现疤痕,粘连,此时可显示蓝色或绿色。
可用于鉴定肝硬化及创伤组织的修复程度。肝硬化时的肝组织有许多不同大小的假小叶,用上述方法显示时,可显示出不同的组织结构。V.G法可将包绕假小叶的胶原纤维染成红色,胆汗呈绿色。
小结
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。分子量大的染料分子移动较迟缓,渗透力较弱,可作用于组织强求构较疏松的组织,染色时间可适当延长。
在相关的染料中,分子量从小到大依次排列是:苦味酸(黄色):229.11;桔黄G(黄色):452;丽春红(红色):480.42;酸性品红(红色):585.53;苯胺蓝(蓝色):737.72;亮绿(绿色):792.72;甲基蓝(蓝色)>99。
染色是一个较为复杂的化学反应和物理作用的双重过程,在应用这些方法时,根据不同情况,选择不同的方法,认真地操作,方能获得最佳的效果。

⑵ 胶原纤维的简介

胶原纤维(collagenous fiber) 在三种纤维中数量最多,新鲜时呈白色,有光泽,故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性,粗细不等,直径0.5~10um,呈波浪形,有分支并交织呈网,胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。胶原蛋白(collagen)由成纤维细胞分泌,于细胞外聚合成胶原原纤维,在再经少量黏合成胶原纤维。电镜下,胶原原纤维直径20~100nm,呈明暗交替的周期性横纹,横纹周期约64nm,胶原纤维的韧性大,抗拉力强。
胶原纤维:染成粉红色,束状,其中的原纤维大多看不清;
儿童时期,骨骼的胶元纤维占的比重较大,成骨细胞制造骨质十分活跃。因此,儿童的骨骼弹性大,不易折断。

⑶ 弹性纤维和胶原纤维是什么

纤维()是指由连续或不连续的细丝组成的物质

⑷ 试述胶原纤维的结构和特性

试述胶原纤维的结构和特性。
LM:纤维粗细不等,形成波浪形走行的纤维束,相互交织成网,HE染色片上呈粉红色。 EM:由胶原原纤维组成,胶原原纤维上可见明暗相间的周期性横纹。 特性:韧性大、抗拉力强。

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