❶ 试述胶原纤维的结构和特性
试述胶原纤维的结构和特性。
LM:纤维粗细不等,形成波浪形走行的纤维束,相互交织成网,HE染色片上呈粉红色。 EM:由胶原原纤维组成,胶原原纤维上可见明暗相间的周期性横纹。 特性:韧性大、抗拉力强。
❷ 怎样区别胶原纤维的韧性和弹性纤维的弹性
胶原纤维(collagenous fiber):是疏松结缔组织中的主要纤维成分,新鲜时呈白色,故又称白纤维.纤维常集合成粗细不等的束,直径约为1~20μm,HE染色标本上呈粉红色,波
浪状走行,常有分支.胶原纤维是由更细的胶原原纤维(collagenous fibril)集合而成.电镜下,胶原原纤维的直径为10~200nm,每根原纤维上具有64nm明暗相间的周期性横纹.它的化学成分是Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白(collagen).胶原纤维具有很强的韧性和抗拉力,而弹性较差.
弹性纤维(elastic fiber):数量比胶原纤维少,新鲜时呈黄色,又称黄纤维.纤维较细,直径约0.1.0μm,直行、有分支并互相交织成网.HE染色标本上不易着色,折光性强,常呈较亮的淡粉色.可用特殊的弹性染色法显示(如被醛复红染成蓝紫色或被地伊红染成棕褐色).电镜下,弹性纤维是由微原纤维(microfibril)
和均质的弹性蛋白(elastin)构成.弹性蛋白构成纤维的核心区,电子密度低,核心外是由微原纤维形成管状的鞘包绕着.弹性纤维富于弹性而韧性差,与胶原纤维交织在一起,使疏松结缔组织既有韧性又有弹性,以保持其连接的组织和器官的形态、位置相对恒定并有一定的可变性.随着年龄的增长,弹性可逐渐减弱乃至消失.
❸ 胶原纤维的胶原蛋白的染色
胶原纤维在HE染色法被染成粉红色,除此之外,它还可以用一些阴离子的染料来进行染色,如用淡绿可把它们染为绿色,用甲苯胺蓝可将其染为蓝色,在网状纤维染色中,如不加以处理,它又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫细胞化学染色中,胶原纤维由于含的负电荷过多,常导致某些非特异性的染色,应特别注意。
(一).Van Gieson(V.G)染色法
I. 试剂的配制:
weigert氏苏木素
A液: 苏木素 1g (haematoxylin)
无水酒精 100ml
B液: 30%三氯化铁 4ml (ferric chloride)
蒸馏水 95ml
盐酸 1ml
II.Van Gieson氏液
A液: 酸性品红 1g(acid fuchsin)
蒸馏水 100ml
B液: 苦味酸饱和水溶液,(1.22%)(picric acid)
注意事项:
1、Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合,几个小时内用完,最长不得超过一天。
2、苏木素配后经二十多天才能成熟,必须提前配制。
3、该液能抵抗弱酸性染液,对已着染的细胞核在酸性染液的作用,不易被脱去颜色,如果不特别深染,则无须分化。
4、Van Gieson氏液取B液9ml,加入A液1ml,即可使用。
操作方法:(后面的各种方法,如没特别说明,都在室温下进行)
1、切片脱蜡至水,
2、用Weigert氏苏木素染20min,
3、水洗,必要时可分化,
4、流水冲洗10min,
5、染Van Gieson氏液1min,
6、用95%酒精快速分化,
7、无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
结果:
胶原纤维:鲜红色,肌纤维: 黄色,红细胞: 黄色,细胞核: 蓝黑或灰色。
注意事项:
1、该法染完的切片,较易褪色如需照相,应尽早完成。
2、苏木素染液如为棕色或沉淀,应将其抛弃。
3、分化用的酒精,应使用95%以上的酒精,低浓度的酒精褪色能力强,容易将着染的红色脱去。
4、切片也可以用天青兰苏木素替代Weigert氏苏木素,染核效果基本一样。
(二).Masson氏三色染色法:天青石蓝液的配制:天青石蓝(Celestin blue B) 1.25g硫酸铁铵(ferric ammonium sulfate)1.25g
蒸馏水 200ml
甘油(glycerin) 30ml
将前两者溶于蒸馏水中,然后煮沸,冷却后过滤,再加入甘油和麝香草酚。
Mayer氏苏木素的配制苏木素 0.1g蒸馏水 100ml
钾明矾(Potassium alum) 5g
柠檬酸(Citric acid) 0.1g
水合氯醛(Chloral hydrate)20mg
配制法:
将苏木素放入蒸馏水中,用玻棒不停地搅拌直至完全溶解,再依次加入钾明矾,柠檬酸和水合氯醛,再继续搅拌,最后加入碘酸钠,搅拌均匀,即可使用。
丽春红酸性品红液的配制:丽春红(ponceau 2R) 0.7g
酸性品红(acid fuchsin)0.3g
冰醋酸 1ml
蒸馏水 99ml
操作方法:1
、切片脱蜡至水,2、1%高锰酸钾氧化切片5min,
3、水洗,草酸漂白1min,
4、水洗,蒸馏水洗,天青石蓝染5min水洗,
5、摔去余液不用水洗,滴染Mayer氏苏木素3-5min,
6、流水冲洗5-10min,
7、丽春红苦味酸饱和液染5min,
8、1%醋酸水溶液洗,
9、1%磷钼酸分化切片约5min,
10、蒸馏水洗,
11、1%淡绿或者甲苯胺蓝滴染30s,
12、1%醋酸水溶液洗切片,
13、95%酒精分化,无水酒精脱水,
14、二甲苯透明,中性树胶封固。
结果:胶原纤维呈现绿色或蓝色,细胞核呈现灰黑或灰蓝色,肌肉和胞质红细胞呈现红色。
注意事项:①Masson氏染液配完后保存时间不宜过长,如有可能,每次染色以染配为佳,如何可使着色颜色的鲜艳性。②切片在各级酒精中脱水,时间不宜过长,否则会将着染的颜色脱去。③切片保存所着染的颜色显长为1—2年以后会随着时间的延长而逐渐褪去,应予注意。④磷钼酸和磷钨酸在染色法中的作用各有不同,磷钼酸作用于胶原纤维,磷钨酸作用于纤维胶]质,肌胶质,神经胶质和上皮纤维等。上述两种试剂的使用,可以促进组织有选择的染色,它们可以减少背景和核的染色,使背景清晰。⑤如有可能,在组织固定时,用Zenker氏固定液固定,如此对染色效果将更好。
临床应用:1
、与淀粉样物的区别: 胶原纤维发生病变如坏死或透明变性时,它与淀粉样物在HE染色时被染为粉红色,不好区别。应用V.G染色法,能将胶原纤维染为粉红色,而淀粉样物将被染为黄色。2、应用与间胚叶来源肿瘤的区别:
如纤维瘤(肉瘤),平滑肌、横纹肌瘤(肉瘤),神经纤维瘤(肉瘤)、恶性纤维组织细胞瘤等,由于都含有大量的纤维,HE染色均为红色。应用Masson氏染色法,可将胶原纤维染色蓝色或绿色,肌源性组织被染为红色。
3、应用与其他慢性炎症的区别。
如慢性阑尾炎,疤痕愈合时,纤维愈复病灶可被染为鲜红色或蓝绿色,SARS病患者愈合后有的肺部可出现疤痕,粘连,此时可显示蓝色或绿色。
可用于鉴定肝硬化及创伤组织的修复程度。肝硬化时的肝组织有许多不同大小的假小叶,用上述方法显示时,可显示出不同的组织结构。V.G法可将包绕假小叶的胶原纤维染成红色,胆汗呈绿色。
小结
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。分子量大的染料分子移动较迟缓,渗透力较弱,可作用于组织强求构较疏松的组织,染色时间可适当延长。
在相关的染料中,分子量从小到大依次排列是:苦味酸(黄色):229.11;桔黄G(黄色):452;丽春红(红色):480.42;酸性品红(红色):585.53;苯胺蓝(蓝色):737.72;亮绿(绿色):792.72;甲基蓝(蓝色)>99。
染色是一个较为复杂的化学反应和物理作用的双重过程,在应用这些方法时,根据不同情况,选择不同的方法,认真地操作,方能获得最佳的效果。
❹ 胶原纤维的功能特点
胶原纤维功能包括:减缓人的组织衰老速度,特点包括:提高强度、提高耐磨性,具有耐刺穿性。
胶原纤维作为一种营养品,越来越受到营养专家的推崇,可是有很多消费者,并不了解胶原纤维的功能和特点,那么胶原纤维的功能特点都有哪些呢?下面让我们一起去了解吧。
胶原纤维是主要含有胶原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。
胶原纤维是真皮中的主要成分,占真皮全部纤维质量的95%到98%。新鲜的胶原纤维呈白色,故又称白纤维。在HE染色标本中,胶原纤维被染成粉红色,较粗大,直径0.5到20um,成束分布,排列紧密,并交织成网。
胶原是唯一含羟脯氨酸较多的蛋白质,因此,测定羟脯氨酸的量能确定组织中胶原的含量。胶原蛋白占全身蛋白质的30%。聚合成胶原的微原纤维的蛋白质分子称为原胶原分子 。
胶原纤维是主要含有胶原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内,在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
胶原纤维是真皮中的主要成分,占真皮全部纤维质量的95%-98%.新鲜的胶原纤维呈白色,故又称白纤维。在HE染色标本中,胶原纤维被染成粉红色,较粗大,直径0.5-20um,成束分布,排列紧密,交织成网。
❺ HE染色时细胞器分别是什么颜色
采用苏木精-伊红染色法也就是HE染色法的话,不能准确说出细胞器的颜色,实验记录或考试时只能说染色效果为 :细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。或者详细说明如下:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
❻ wright染色与HE染色各有什么特点
瑞特(Wright)染色:瑞特染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。PH对细胞染色有影响。
HE染色
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
(6)胶原纤维he染色是什么形状扩展阅读
H-E染色评定标准:切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。
细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏酸性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色 偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片必须清洁,无酸碱污染。
配制顼特液必须用优质甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。
新鲜配制的染料偏碱,须在室温或37℃下贮存一定时间,待染料成熟,美蓝逐渐转变为天青B后才能使用,贮存时愈久,染色效果愈好。