胶原为什么在低温下溶解

A. 胶原蛋白对水温有要求吗

溶解口服胶原蛋白的合适温度!!!2009-08-15
15:12
常常碰到不少的客户询问溶解口服胶原蛋白的水温是多少,这是好的了,竟有的客户服用了一个星期后,来问怎么没效果,细问一下,原来她是使用开水来溶解胶原蛋白,这让我们苦笑不得!
为此再次敬告大家!
再次敬告大家,请一定使用温水(<37摄氏度),不要使用热水,否则就白白喝了
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B. 胶原蛋白的理化性质

一般是白色、透明的粉状物，分子呈细长的棒状，相对分子质量从约2kD至300kD不等。胶原蛋白具有很强的延伸力，不溶于冷水、稀酸、稀碱溶液，具有良好的保水性和乳化性。胶原蛋白不易被一般的蛋白酶水解，但能被动物胶原酶断裂，断裂的碎片自动变性，可被普通蛋白酶水解。当环境pH低于中性时，胶原的变性温度为40~41℃，当环境pH为酸性时，胶原的变性温度为38~39℃。
胶原蛋白红外光谱图册参考资料。
胶原蛋白是一种两性电解质，这取决于两个因素，其一，胶原每个肽链具有许多酸性或碱性的侧基；其二，每个肽链的两端有α-羧基和α-氨基，都具有接受或给予质子的能力，它们可在特定的pH值范围内，解离产生正电荷或负电荷，换句话说，随着介质的pH值，不同胶原即成为带有许多正电荷或负电荷的离子。胶原肽链侧基的pKa值与其组成氨基酸侧基的pKa值略有不同，这是由于在蛋白质分子中受到邻近电荷的影响所造成的。等电点是7.5~7.8，呈现出偏碱性，因为胶原的肽链中碱性氨基酸比酸性氨基酸多一点。由于是高分子，在水溶液中具有胶体性质和一定粘度，粘度在等电点时最低，而且温度越低，粘度越大。
不同分子量分布胶原蛋白溶液的黏度与溶质浓度、溶剂、pH、温度和外加电解质有关。在等电点时胶原蛋白溶液的黏度最低，pH值低于或高于等电点时，胶原蛋白及多肽均将带一定电荷，溶液的黏度相应增大，离等电点越远，溶液的黏度越大；不同分子量分布胶原蛋白及多肽溶液的黏度均随温度升高而下降。胶原蛋白分子量越大，浓度越大，溶液的黏度越高，高分子量胶原蛋白溶液的黏度随浓度增加呈指数上升，而低分子量胶原蛋白溶液的黏度则随浓度增加近似直线上升；在胶原蛋白及多肽溶液中加入电解质会导致其黏度明显上升。
胶原蛋白的水解产物含有多种氨基酸，其中以甘氨酸最为丰富。其次为丙氨酸、谷氨酸和精氨酸，半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及蛋氨酸等必需氨基酸含量低，因此，胶原蛋白属不完全蛋白质。水解猪皮胶原所得的肽类产物中含有19种氨基酸，其中包括7种成人必需氨基酸和2种幼儿必需的半必需氨基酸；而且氨基酸总量高达90%以上。在八种人体必需氨基酸中含有六种：异亮氨酸（Ile）为1.21%，亮氨酸（Leu）和苯丙氨酸（Phe）为4.89%，缬氨酸（Val）2.95%，苏氨酸（Thr）为1.95%，赖氨酸（Lys）为1.94%。
胶原的相对分子质量大，电泳图有3条泳带，在100kD附近出现的2条泳带分别是胶原分子的α1链和α2链，在200 kD附近出现的1条泳带是胶原分子的β链。即胶原的每条多肽链相对分子质量可达100kD，1个胶原分子相对分子质量为300kD。多肽分子量的测定方法常用SDS-PAGE，凝胶色谱法以及质谱法。有人采用凝胶过滤色谱法测定脱铬革屑中胶原水解产物分子量分布在16.1KD左右。飞行时间质谱法测定比目鱼皮胶原寡肽分子量的分布主要集中在0.6～1.8kD。动物蛋白酶水解后的胶原多肽的分子量在2～7kD，比植物蛋白酶水解的胶原多肽分子量范围更广。
胶原的热稳定性是指测定其在水系中纤维的热收缩温度（Ts），或溶液中分子的热变性温度（Td）。Ts和Td之差一般在20～25℃，而 Ts值较Td值容易测定。Td还可以表示胶原螺旋被破坏的温度，另外还与其亚氨基酸（脯氨酸和羟脯氨酸）的含量有关，尤其是羟脯氨酸含量，它们之间存在正相关，冷水性鱼类的羟脯氨酸含量最低，所以冷水性鱼类胶原蛋白Td值明显低于暖水性鱼类，而又都低于陆生动物。但鱼皮胶原蛋白与鱼肉胶原蛋白相比，其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右，这与肌肉胶原中脯氨酸的羟基化率较真皮胶原高有关。有人测定了多种鱼皮可溶性胶原蛋白的氨基酸组成，并与牛皮的氨基酸组成进行了比较，发现鱼皮胶原蛋白的羟脯氨酸和脯氨酸等亚氨酸含量比牛皮的低。此外，鱼皮明胶与牛皮明胶相比，其固有的粘度、热变性温度均比较低。
胶原蛋白的热变性温度可以通过测定胶原蛋白溶液增比黏度的变化来确定。其方法是将胶原蛋白样品溶于一定量的缓冲溶液中，并配制成一定浓度的溶液，然后用乌式黏度计测量溶液在一定温度区间内保持一定时间后的增比黏度，以增比黏度对温度作图，当增比黏度变化50%时所对应的温度即为热变性温度。热变性温度还可通过拉曼光谱和差示扫描量热法等进行测定。有人测得鲈鱼、鲫鱼和鳙鱼鱼皮胶原蛋白的热变性温度分别为 25、27和30℃，它们的栖息水温分别为 26～27、29 和32℃，亚氨基酸含量分别为17.2%、18.1%和 18.6%，与 3 种鱼皮胶原的热变性温度相吻合Ⅱ型胶原和Ⅺ型胶原Ⅱ型胶原由三条α1肽链组成，即[α1(Ⅱ) ]3，富含羟赖氨酸，并且糖化率高，含糖量可达 4%，是软骨中的主要胶原。另外，即使同一生物，皮和骨胶原蛋白的热变形温度也可能不一，像来自日本海鲈、鲐鱼、大头鲨和眼斑鲀的皮胶原蛋白的变性温度为25.0~26.5℃，而骨胶原蛋白的变性温度则为29.5~30.0℃。附带结论是骨胶原蛋白的变性温度范围整体上比皮胶原蛋白的变性温度范围要高。而且骨胶原蛋白和皮胶原蛋白在不同pH时的溶解度不同。这表明皮和骨胶原蛋白的分子特性和构型存在差异。
作为生物高分子，胶原的强度不大，有研究表明胶原蛋白的凝胶强度与其浓度的平方几乎成正比关系，强度测定可用凝胶强度计。
特别提示：明胶、胶原蛋白和水解胶原蛋白并不相同。明胶是胶原在高温作用下的变性产物，其组成复杂，相对分子质量分布宽，由于高温造成胶原蛋白变性，胶原分子的3股螺旋结构被破坏，但可能有部分α链的螺旋链还存在，因此一定浓度的明胶溶液能成凝胶状。在食品工业、摄影和制药业中被广泛应用。据报道，全世界每年生产的明胶产品中，有65%用于食品工业，20%用于照相工业，10%用于制药工业。水解胶原蛋白是在较高温度下用蛋白酶水解胶原或明胶得到的，受温度和酶的双重作用，使水解胶原蛋白的相对分子质量比明胶更小，由于在较高温度条件下，蛋白酶对胶原肽键的水解是随机的，使水解得到的蛋白液组成也很复杂，是相对分子质量从几千到几万的蛋白多肽的混合物。由于分子量小，水解胶原蛋白容易降解，所以在营养保健品和日用化学品开发方面拥有一定的市场。水解胶原蛋白可用于生物发酵培养基，也可以作为一种高蛋白饲料营养添加剂替代进口鱼粉用于混、配合饲料生产。胶原、明胶和水解胶原蛋白这3种物质虽具有同源性，但在结构和性能上却有很大的区别。胶原保留特有的天然螺旋结构，在某些方面表现出明显优于明胶和水解胶原蛋白的性能，如胶原止血海绵止血性能优于明胶海绵，作为澄清剂用的鱼胶原如果变性则沉降能力明显降低。然而，人们对这3种物质的认识常常产生混淆，认为它们具有相同性质，甚至认为它们是同一种物质。
水解胶原蛋白和胶原多肽也并不相同，可以近似认为是宏观和微观的关系。胶原蛋白分子经水解后主要形成相对分子量较小的胶原多肽，由于胶原蛋白独特的三股超螺旋结构，性质十分稳定，一般的加工温度及短时间加热都不能使其分解，从而造成其消化吸收较困难，不易被人体充分利用。水解后其吸收利用率可以提高很多，且可以促进食品中的其它蛋白质的吸收。胶原多肽除了肽链的两端含有未缩合的末端羧基和氨基外，在侧链上还含有Lys的ε-NH2以及Asp和Glu的-COOH。胶原多肽可完全溶解于水（冷水亦可溶解），水溶液低粘度，在60%的高浓度下也有流动性，耐酸碱性能好，在酸、碱存在的情况下均无沉淀；耐高温性能好，200℃加热亦无沉淀，同时它还具有良好的吸油性、起泡性和吸水性等。 一级结构是蛋白质分子中氨基酸以肽键连接的顺序，每一种蛋白质分子，都有其特定的氨基酸组成和排列方式，由此就决定了不同的空间结构和功能。蛋白质分子中一级结构关键部位氨基酸的改变，会直接影响其功能，这个关键部位就是蛋白质分子的活性中心。已发现并确认了不下30种类型的胶原蛋白。
一般的蛋白质是双螺旋结构，而作为细胞外基质（ECM）的一种结构蛋白，胶原蛋白由三条多肽链构成三股螺旋结构，或称胶原域，即3条多肽链的每条都左旋形成左手螺旋结构，再以氢键相互咬合形成牢固的右手超螺旋结构。胶原特有的左旋a链相互缠绕构成胶原的右手复合螺旋结构，这一区段称为螺旋区段，螺旋区段最大特征是氨基酸呈现（Gly-X-Y）n 周期性排列，其中 x、Y 位置为脯氨酸（PrO）和羟脯氨酸（Hyp），是胶原蛋白的特有氨基酸，约占25%，是各种蛋白质中含量最高的；胶原蛋白中存在的羟基赖氨酸（Hyl）在其它蛋白质中不存在，它不是以现成的形式参与胶原的生物合成，而是从已经合成的胶原的肽链中的脯氨酸（Pro）经羟化酶作用转化来的。而一般陆生哺乳动物蛋白质中羟脯氨酸和焦谷氨酸的含量极微少。与陆生动物相比，水生动物中的胶原蛋白，其脯氨酸和羟脯氨酸的总量少，而含硫元素的蛋氨酸（Met）含量要远大于陆生动物中的胶原蛋白。
一级结构是组成胶原蛋白多肽链的氨基酸序列；胶原蛋白分子是由3条左手螺旋（二级结构）的多肽链组成，它们相互缠绕形成一个在中心分子轴周围的右手螺旋（三级结构）；完整的胶原蛋白分子的长度约280 nm，直径约1.5 nm；在Ⅰ型胶原原纤维的二维结构（小角X线衍射图谱和透射电子显微照片）中，胶原分子通过一个或多个4 D距离与另一个胶原分子交错，D表示在小角X线衍射图谱中所见的基本重复距离，或电子显微照片中所见的重复距离。因为胶原分子的长度约是4.4 D，胶原分子的交错引起约有0.4 D的折叠区和约0.6 D的缺损区。
胶原蛋白中甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、脯氨酸（Pro）和谷氨酸（Glu）含量较高，特别是甘氨酸，约占总氨基酸的27%，也有报道说占1/3，即每隔两个其它氨基酸残基（X，Y）即有一个甘氨酸，故其肽链可用（Gly-X-Y）n 来表示。每个原胶原分子由三条α-肽链组成，α-肽链自身为α螺旋结构，肽链中每三个氨基酸残基中就有一个要经过此三股螺旋中央区，而此处空间十分狭窄，只有甘氨酸适合于此位置，由此可解释其氨基酸组成中每隔两个氨基酸残基出现一个甘氨酸的特点。特别注意，X、Y均表示任意的氨基酸，只不过X通常是脯氨酸，Y通常指羟脯氨酸。同时还含有少量3-羟脯氨酸（3-hydroxyproline）和5-羟赖氨酸（5-hydroxylysine，Hyl）。羟脯氨酸残基可通过形成分子内氢键稳定胶原蛋白分子。三条α-肽链借范德化力、氢键及共价交联则以平行、右手螺旋形式缠绕成“草绳状”三股螺旋结构，使胶原具有很高的拉伸强度。

C. 胶原面膜遇水即化是什么原理

原理：胶原蛋白面膜与肌肤密闭接触，单向渗透，营养成份吸收率高达98%以上；它能完全无间地与皮肤表面结合，使皮肤与空气彻底隔绝，达到面膜本质效果；凝结在胶原蛋白水晶面膜上的多种有效成份在体温作用下逐渐溶解，通过扩张的毛孔信道快速直达皮肤各层，给肌肤补充胶原蛋白、保湿因子等固有成分，真正达到调节微循环，疗肤美肤的目的。
使用方法：

1、卸妆清洁面部；
2、将面膜贴于面部，排除气泡；
3、贴20分钟揭下，用手轻轻按摩面部，面部精华也会被肌肤自然吸收，无需再次清洗；
4、第一周连续使用6片，以后每周使用2-3片；
胶原蛋白对皮肤的渗透性强，可透过角质层与皮肤上皮细胞结合，参与和改善皮肤细胞的代谢，使皮肤中的胶原蛋白活性加强。它能保持角质层水分及纤维结构的完整性，改善皮肤细胞生存环境和促进皮肤组织的新陈代谢，增强血液循环，达到滋润皮肤的目的。

D. 胶原蛋白液 结冰了之后还能喝吗

胶原蛋白液结冰了之后是能喝的，不必担心

但是您需要确认是不是包装完好，在有效果，如果这些都没有问题，就可以放心用了。

胶原蛋白液 结冰了之后还能喝吗？吃胶原蛋白的人很多，但见效的人真的的很少，有明显效果的更少，所以胶原蛋白还是有很多学问，不是所有产品都具有同样的功效。

影响胶原蛋白效果的因素太多、分子大、不是深海的、不纯…不过有一点是肯定的，便宜！

你用胶原蛋白前要了解，胶原也有给动物饲料添加的也有小作坊磨的也有骨皮熬的也有鱼鳞提出的，最好的是深海鳕鱼的，三两句说不完，你还是有空一定要查查修复型胶原蛋白，看看学习一下，东西好适量就有效，不然，当饭吃也没用是吧。

E. 胶原蛋白的提取分离

由于胶原是细胞外间质成分，在体内以不溶性大分子结构存在，并与蛋白多糖、糖蛋白等结合在一起，因此胶原的制备包括材料的选择、预处理、酸碱酶盐水法提取、不同类型胶原的分离和纯化。 除胶原蛋白外，动物骨中还含有油脂、多种矿物质和其他杂质，因此在被用于提取胶原蛋白之前必须进行预处理。先剔除动物骨上残留的肉质和肌腱等杂物，粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油。最后除去骨中无机物以提高胶原蛋白的得率。除去骨中的矿物质可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍质量的1.0moL/LHCL脱钙处理2d，用正乙烷脱脂后再用胃蛋白酶酶解，在加酶量150U/g，pH值1.7，37℃条件下处理120min，然后在固液比1∶6的情况下抽提5h，在此条件下，提取率可达18%；还有人用EDTA溶液（pH7.4）浸泡骨料5d，可有效脱去骨料中的羟基磷灰石。
胶原蛋白的提取一般有三种方法：一是高压辅助的物理方法；二是用溶剂预处理结合低温或热水抽提的化学方法，根据溶剂的不同，可分为热水浸提法、酸法、碱法、盐法；三是用酶的生物化学法。一般来说，高压辅助和热水抽提针对明胶的提取，而低温抽提和酶法针对胶原的提取，但其基本原理都是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的外界环境，把胶原蛋白从其他蛋白质中分离出来。
在实际提取过程中，不同提取方法之间往往相互结合，可以得到较好的提取效果。采用超高压处理系统对原料给予高压处理一段时间，使其组织结构和胶原蛋白的三股螺旋结构发生松弛、变性，便于分离提取。 酸法提取是利用一定浓度的酸溶液在一定的条件下提取胶原蛋白，主要采用低离子浓度酸性条件破坏分子间盐键和希夫碱，而引起纤维膨胀、溶解，采用酸法提取的胶原蛋白通常成为酸溶性胶原蛋白。酸溶解法可将没有交联的胶原分子溶解出来，也可溶解含有醛胺类交联键的胶原纤维，然后释放到溶剂中。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法，用低温酸法提取的胶原最大程度的保持了其三螺旋结构，适用于医用生物材料及原料的制备。通常的做法是将适当浓度的酸液按一定料液比加入到经过预处理的骨粉中，于0～25℃搅拌提取一定时间。在采用酸法进行胶原蛋白的提取时，注意提取温度不宜过高，以免胶原蛋白的生物活性发生破坏。取样经前处理后，匀浆在低温下用酸浸提，离心即可得酸溶性胶原蛋白（acid-soluble collagen，ASC）。作为溶剂使用的酸，主要有盐酸、磷酸、甲酸、乙酸、苹果酸、柠檬酸等，但大多数研究集中于乙酸抽提，像Maria Sadowska等用0.5mol/L柠檬酸在室温下提取骨胶原蛋白，其提取率略低于乙酸提取。柠檬酸因不产生颜色和异味得以广泛使用于食品工业的胶原蛋白的提取。
酸法处理时，反应强烈，水解彻底，多生成氨基酸混合物，而且使用酸提取时，根据酸浓度、水解温度、水解时间等条件的不同，可以得到分子量不均的胶原水解物。但是在即使中等浓度酸彻底水解过程中色氨酸也会全部被破坏，丝氨酸和酪氨酸也会部分被破坏，且设备腐蚀严重。因此，酸法溶出生物医用胶原要准确控制酸度、温度、时间等影响因素。由于各种不足，酸法很少单独使用，一般和酶法配合。比如以猪皮为原料，在柠檬酸(pH8.6)和胃蛋白酶协同下提取胶原蛋白。在处理后的猪皮中加0.05moL/L含有胃蛋白酶的柠檬酸溶液（pH2.5-3）处理一段时间，然后再用NaCL盐析，最后提取率为12.35%，提取物保持了完整三股螺旋结构的I型胶原蛋白。还有人以雏鸡胸软骨为原材料，在0.5moL/L醋酸条件下经胃蛋白酶多次消化，在4℃，20000r条件下离心20min，最后应用DEAE-Sephadex A-50进行离子交换层析，之后透析，再用NaCL盐析，最后得到纯化的胶原蛋白Ⅱ型。 碱法提取即利用一定浓度的碱在一定的外界条件下提取胶原蛋白，碱处理法中常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等，用氢氧化钠浸提时效果较好。一般的是把样品匀浆后，用碱溶液多次溶胀后，再离心提取。但由于易引起蛋白质变性，如胶原肽键水解，含羟基、疏基的氨基酸全部被破坏；所得产物等电点pH值较低，天冬酞胺和谷氨酞胺分别转变为天冬氨酸和谷氨酸，得到的水解产物分子量较在酸性溶液中比低等问题，若比较严重的话，还会产生 D、L-型氨基酸消旋混合物，若D型氨基酸含量高过L 型氨基酸，则会抑制L-型氨基酸的吸收，有些D型氨基酸有毒，甚至有致癌、致畸和致突变的作用。而且碱法提取的含量较低，用氢氧化钠从鱿鱼皮中提取碱溶性胶原蛋白，其得率只有3%（以湿基计）。所以，若想提取结构完整、使用安全的胶原蛋白，很少采用此方法。有关单独采用碱法提取胶原蛋白的报道不多，一般是碱法提取和酸法提法结合使用。比如在4℃条件下，鱼骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h，再用2.5%NaCl浸泡6h去除杂蛋白，用10%的异丙醇溶液去除脂肪，0.1moL/L的柠檬酸浸泡3d，最后得到无色无味的胶原蛋白，提取率为11.87%。
注意，无论酸法或碱法，均可有效地提取胶原蛋白，有人分别采用醋酸- 盐酸的混合酸液（pH3.0）和NaOH溶液（pH12.0）提取骨胶原蛋白，提取率基本相当。但是，这两种方法提取胶原蛋白不仅容易影响胶原蛋白的生物活性，而且提取后产生的酸性或碱性废液必须进行适当处理，以避免对环境造成污染。 酶法提取是指可溶性胶原和酸溶性胶原被提取后，需用一些蛋白酶，如胶原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解，得到不同的酶促溶性胶原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3种：动物蛋白酶（如胰蛋白酶，胃蛋白酶），植物蛋白酶（如木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶），微生物蛋白酶（如碱性蛋白酶，中性蛋白酶）。在对酶法水解胶原蛋白的研究中，以碱性蛋白酶应用最多。
将胶原进行限制性降解，即将末端肽切割下来，由于胶原肽链间的共价键都是通过分子末端肽里的赖氨酸或羟赖氨酸的相互作用形成的，末端肽被切下后，含三螺旋结构的主体部分可溶于稀有机酸而被提取出来。用酶处理，可以水解掉胶原纤维蛋白的末端肽，提高胶原蛋白的产率；而且还不会破坏胶原蛋白的三股螺旋结构，保持其特性。影响酶提取的因素有很多，如酶浓度、酶与底物的比例、酶解时间、酶解温度、pH值以及料液比等。在实际操作中，大多数采用酶复合法提取胶原蛋白，较多的是使用胃蛋白酶提取，有机酸多为乙酸。
酶解胶原蛋白的工艺主要分为单酶水解法和多酶水解法。多酶水解法又分为混合酶水解法（比如牛胰蛋白酶，链霉菌蛋白酶，芽孢杆菌蛋白酶混合）和分步酶水解法，酶法提取皮胶原具体实验工艺及条件的选取通常应考虑要开发的产品对分子量的要求，要得到分子量较小的胶原多肽一般采用多酶水解法。影响酶解效果的因素主要有：酶的种类、加酶量、酶解温度、酶解时间、pH值及料水比。采用酶法提取骨料中的胶原蛋白，既能有效缩短提取时间，又能获得具有良好生物活性的胶原蛋白，而且对环境的污染也较小。胶原蛋白不易被普通蛋白酶水解，但能被动物胶原酶断裂，断裂的碎片自动变性后可被普通蛋白酶水解。胃蛋白酶水解胶原蛋白的适宜条件为pH 1.65～1.70、温度37℃。
有人以猪骨为原料，用蛋白酶的酶解反应代替传统制胶工艺，对骨胶原的酶解反应与酶法制胶工艺进行了试验研究。结果表明：以胃蛋白酶对骨胶原的提取率最高（46.14%），其次是胰蛋白酶（43.42%），接下来是中性蛋白酶（30.14%），最后是碱性蛋白酶（21.15%）。并且通过单因素和正交试验对胃蛋白酶酶解反应中各主要影响因素进行了优化。试验结果表明，胃蛋白酶提取的最优条件是，胃蛋白酶的浓度是1%，在pH2.0的条件下酶解48h，然后在浓度为10%（w/v）的NaCL溶液中盐析24h，最后骨胶原的回收率为64.77%，骨胶原的提取率为49.75%。还有人用胃蛋白酶提取猪皮胶原蛋白，分别在水解0、2、6、10、14、18、22、26h时对四种不同胃蛋白酶用量（分别为1%、2%、2.5%、3%）的试样取样检测，采用一阶HILL方程模拟胃蛋白酶提取猪皮胶原蛋白的进程以及胃蛋白酶水解速率的衰减过程，最后得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解时间提取率最大。还有人用以新鲜猪皮为原料，在50-52℃的条件下用胰酶进行水解，在酶用量为 5000：1～10000：1，pH值为9，反应2－3h，原料：水为1：2的条件下酶解。结果表明：总蛋白质的提取率≥80%。
采用酶法提取胶原蛋白时，必须严格控制提取条件。首先，酶作用时间必须适当。如果时间过短，胶原蛋白就不能充分释放到提取液中，影响提取率；如果酶作用时间过长，胶原蛋白会水解过度，产生过多的苦味小分子低聚肽，不仅会增加分离纯化的难度，也会影响胶原蛋白的功能特性和生物活性。其次，酶解温度要适宜。温度过低，酶的作用效果不明显；温度过高会引起酶的失活和胶原蛋白的变性。据报道，当介质pH略低于中性时，胶原蛋白的变性温度为40～41℃，当介质pH为酸性时，胶原蛋白的变性温度为38～39℃，而且鱼皮胶原蛋白的变性温度要比猪皮胶原蛋白的变性温度低7～12℃。所以，如果要使提取的胶原蛋白具有良好的生物活性，在提取过程中应使提取温度低于变性温度。第三，需选用适当的酶。一般从陆生哺乳动物组织中提取胶原蛋白时，采用胃蛋白酶在其最适作用温度下进行提取是合理的，但对于鱼类等水生动物，由于其胶原蛋白的变性温度比陆生哺乳动物低，因此许多蛋白酶便不适用，如果在这些酶的最适作用温度下提取可能会破坏胶原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取胶原蛋白及其多肽的研究主要是从动物皮及其加工副产物中，应用酶法从动物骨中提取胶原蛋白及其多肽报道较少。 指使胶原分子内部和分子间通过共价健结合提高胶原纤维的张力和稳定性的方法。该法又分为物理方法、化学方法和低温等离子体法，生物学方法；其中物理方法、化学方法是最常用的交联改性方法，生物学方法改性胶原蛋白主要在研究有关动物老化的生命现象中涉及，在研制胶原基生物医学材料中少见报道。
物理方法
通过物理手段对胶原蛋白改性有紫外线照射、重度脱水、λ射线照射和热交联等方法。胶原溶液如被紫外线等照射，将在分子间产生交联，粘度增加，生成凝胶。常用的紫外线交联胶原膜的方法是将胶原膜放在铝箔上，距离254 nm紫外灯20 cm高度，照射1～5 h。对紫外线照射的胶原膜进行力学性能和胶原酶试验表明：交联胶原膜的萎缩温度Ts和抗胶原酶解的能力均显着高于未交联胶原膜。
重度脱水也是胶原蛋白物理改性中常使用的方法，该法是通过脱水导致胶原分子间交联，从而增加变性温度，改善胶原的性能。改性后胶原膜生物相容性提高，降低了水溶性，影响了膜与成骨细胞的生物相容性。物理方法改性原蛋白的优点是可避免外源性有毒化学物质进入胶原内，缺点是胶原膜交联度低，且难以获得均匀一致的交联。
化学方法
化学方法比物理方法改性交联度高，且能获得均匀一致的交联，对调节、控制胶原的各性质均有效。已广泛应用于各种化学试剂交联胶原，以提高其交联度、力学性能及生物相容性。化学改性法具体又可分为使用化学试剂交联、侧链的修饰、生理活性物的固定化三种方法。
化学试剂交联法中常用的化学交联剂有戊二醛、己异二氰酸酯、碳化二亚胺、叠氮二苯基磷等，其中戊二醛是应用最广泛的试剂，大量实验证明：戊二醛能提供有效交联，但有细胞毒性，且其用量难以控制。另外，随着交联度的增加，吸水能力和膨胀度却会降低。酰基叠氮化物、聚环氧化物或京尼平交联等，不会引入明显的毒性，且可获得理想的交联效果。所见报道中，多使用单一交联剂对胶原蛋白交联改性，但也有使用混合交联剂的，如为了解决人工心脏瓣膜晚期钙化问题，筛选出环氧丙烷化学改性戊二醛处理生物瓣的方法，可明显减低瓣膜组织胶原蛋白末端游离羧基含量。动物实验表明，经改性后的瓣膜组织能保持较好的组织稳定性和机械抗张强度、免疫原性测试为阴性，符合临床应用。
侧链修饰就是对胶原分子侧链的氨基和羧基进行化学修饰，改善电荷分布，使胶原获得新的特性，例如将胶原氨基丁二酰化，可变成负电荷丰富的胶原。与未修饰胶原蛋白相比血小板粘附能，血纤维蛋白形成能都弱，有抗栓性；然而如将胶原羧基甲基化获得的正电荷丰富的胶原，生理条件下血小板粘附能、活化能都高。与交联改性相比，在生物材料领域，利用侧链修饰对胶原改性所做的工作还较少。
化学方法虽然可获得均匀一致的交联，但存在着引入外源有毒试剂，残留试剂难清除等缺点。一些报道表明，低温等离子体技术改性胶原或胶原复合膜可使材料表面引入不同基团，改变材料表面化学组分和结构，从而改变材料的特性，如使之更具有细胞识别位，提高表面能，改善表面极性等。 胶原单独使用，物理机械性能差（这几乎是天然材料共有的弱点），性能单一，且因有亲水性强，在体内易被胶原酶降解等不可避免的弱点限制了它的应用。但如将胶原与其它物理、化学性质不同的合成或天然高分子共混，组成一种多相固体材料，在性能上胶原与其它高分子互相补充，胶原基“复合材料”的概念由此产生。
已见报道的与胶原共混的合成高分子有不可生物降解的聚甲基烯酸酯及丁烯酸酯、聚氨酯、聚酰胺和可生物降解的聚乙烯醇、聚乳酸、聚谷氨酸、聚乙醇酸等，20世纪80～90年代初最有代表性的是聚甲基丙烯酸羟乙酯（PHEMA）和聚乙烯醇与胶原共混，其报道集中于复合方法、复合机理、理化及生物学性能、材料表面和整体结构、表面修饰的方法和机理以及水凝胶的溶胀扩散等，尤其是水凝胶制备、作软组织替代、药物缓释等。后来利用可生物降解的聚乳酸、聚乙醇酸、聚酸酐、聚谷氨酸、聚亚乙基四乙酸等与胶原共混改性制备可吸收外科缝线、组织工程支架材料（如组织引导再生材料）的相关研究相对增多。不过合成高分子与胶原蛋白共混复合一些问题，如尼龙等不降解高分子材料不能进行生理代谢，与胶原蛋白复合后只能用做皮肤的外层敷料不能永久代替皮肤，而聚谷氨酸等可生物降解材料，如果相对分子质量小则强度不够，相对分子质量大难溶于水，溶解时还出现降解，影响材料的机械强度。
天然高分子材料中最具代表性的是天然蛋白质和天然多糖，多糖主要有软骨素、HA（透明质酸）、壳聚糖、肝素等，多糖复合材料比较集中于可吸收性外科缝线、药物释放的载体、皮肤替代物、透析膜、止血剂、医用引导组织再生材料、骨替代材料、组织培养系统的支架。

F. 胶原蛋白的特点~求解

胶原蛋白是一种由三股螺旋形纤维所构成的透明状物质，具有一些独特的特性1.营养性：可以给予含有胶原蛋白所必需的养分，使皮肤中的胶原蛋白活性加强，保持角质层水分以及纤维结构的完整性，改善皮肤细胞生存环境，促进皮肤组织的新陈代谢，增加微循环，达到滋润皮肤、延缓衰老、美容、消皱、养发的目的。2.修复性：胶原蛋白具有独特的修复功能，胶原蛋白和周围组织的亲和性好，具有修复组织的作用。3.保湿性：由于胶原蛋白分子中含有大量的亲水基，使之具有良好的保湿功能，能够达到保持肌肤润泽度的目的。4.配伍性：胶原蛋白可以调节和稳定PH值，起到稳定泡沫、乳化胶体的作用。同时，作为一种功能性成份在化妆品中，可以减轻各种表面活性剂、酸、碱等刺激性物质对皮肤、毛发的损害。5.亲和性：人体组织对胶原蛋白有很好的吸收作用。
淘宝网格林屋（营养屋短肽胶原蛋白胶囊）含有高效天然玻尿酸、短肽胶原蛋白、全球独家获得三项美国专利。

G. 胶原蛋白打开后放冰箱里面为什么会变稠

胶原蛋白冷藏后变成糊状是正常的物理现象。
胶原蛋白属于蛋白的一种，有蛋白的特性，起溶液在低温下会形成粘稠的半固体。
这种现象不是变质的表现，但如果已开封，在冰箱里冷藏超过8个小时就不建议食用了，冰箱不是无菌环境，温度4摄氏度左右，细菌可以繁殖。

H. 生胶原冻干絮原液（活性胶原蛋白）使用说明

产品成分：纯度98%的活性胶原

产品使用：修护，保湿，去痘印，促进胶原蛋白增长及细胞生长

使用方法：直接涂抹在皮肤上

储存：阴凉干燥处，冷藏最佳

特别提示：

1.       市面上很多产品都说含胶原蛋白，到底什么叫“胶原蛋白“？

答：胶原蛋是人体内含量最多的蛋白质，它主要分布于人体皮肤、骨骼、牙齿、肌腱等部位，主要作用是做结缔组织的粘合物质。在皮肤内，它含量高达75%以上，主要负责皮肤收缩和拉力，为皮肤提供支持。随着年龄的增长，人体胶原含量会逐渐流失（例如：人到25岁以后，胶原在体内含量会以每年1.5%的速度逐渐减少，35岁减少15%，45岁减少30%）支撑体亦会渐渐变薄变硬，失去弹性，当真皮层弹性与保水度降低到一定程度，真皮的纤维就会断裂、出现皱纹等一系列老化现象，显出老态。体外补充胶原能有效刺激人体自身胶原合成和补充体内已经减少的胶原。因此，对于女人来说，补充胶原就是显得尤为重要。

2.        现在市面上有这么多种胶原蛋白产品，生胶原与市售的胶原蛋白有什么不同？

答：活性胶原蛋白，具备完整的螺旋结构，可运用于治疗青春痘、强行挤压青春痘留下的表浅性疤痕、促进痘面修复、美白、保湿、营养皮肤，长期使用有减少皱纹，延缓衰老的作用。而一般市面上鼓吹的胶原蛋白其实是明胶或明胶的水解产物，因萃取技术不足或制造高温破坏，导致胶原蛋白的三螺旋结构被破坏，使得分子呈现不规则键结，所以仅能运用于低价位的食品材料，勉强用于皮肤保养方面，只能起到一定的保湿作用。

3.       胶原蛋白和明胶应用于皮肤保养品上，使用效果有什么不同？

答：胶原在皮肤保养品的应用上，主要的作用是修护及保湿功能，它是皮肤细胞新陈代谢再生的良好支架，而“明胶“因结构不完整，无法作为皮肤细胞再生支架，不具备修复功能。在皮肤保湿方面根据测试结果”明胶“的保水能力仅为胶原的30%，保湿效果远远不如胶原。

4.       生胶原具有消皱的功效，这是真的吗？

答：胶原透过表皮层，进入真皮组织，充足的营养能加快人体自身的合成，有效恢复皮肤的拉力和弹性，达到减少皱纹的目的。

5.       生胶原为何具有美容功效？

答：生胶原之所以在生物护肤领域有着无可取代的地位，是因为基本身是一种由三股螺旋形纤所构成的透明状物质，这种结构能够强劲地锁住不分子，另外，胶原中还含有大量的氨基酸，它们都是天然保湿因子成分，基中一种独特的氨基酸——羟脯氨酸，被证明是皮肤新生的关键物质。（摘自《皮肤组织物可以口服补充》，北京协和医院内分泌科。原刊于《中国化工报》。

6.       对于正常皮肤来说，多长时间可能看到效果？

答：胶原是大分子蛋白质，其中的营养成分被肌肤充分吸收利用，达到预期的目的，会是一个缓慢的过程，耐心的等待之后，您会有意外的惊喜（一般要1个月左右，个体不同会有差异）。

7.       生胶原是怎么被皮肤吸收的？

答：生胶原透过皮肤角质层进入体内有以下途径：

（1）       经毛囊孔、皮脂腺孔和汗孔进入（渗透）；

（2）       经角质细胞间隙进入；活性胶原蛋白和皮肤紧密结合后，胶原会通过软化的角质细胞间隙进入真皮层，其他主要通过毛囊、皮脂腺孔和汗孔等空隙较大的地方渗透，随着时间的推移，由于皮肤的表面积远远大于腺体等辅助器官的面积，胶原主要以皮下渗透的方式进入真皮层。

8.       脓包型痤疮刺破后能否直接保用？

答：经过炎症处理（消炎）后方可直接使用。

9.       生胶原是否有依耐性？

答：生胶原主要通过活性胶原自身的结构特性，激活细胞生长，来达到 修复肌肤的目的，所以不会产生依敕性。

10.使用后会不会导致过使用者过敏？

答：任何外用产品都有一定的过敏率，活性胶原蛋白也不例外，虽过敏率很低，但建议有过敏史者慎用。（注：通常情况下，只要患者不对外用异种蛋白过敏，就不会出现过敏状况。）

11.如何判断对异种蛋白过敏？

  答：如果人对牛奶、鸡蛋、鱼肝油、蛇粉、猪肉、牛肉、河蟹、河虾等食物过敏的话，我们就可以确定他对异种蛋白过敏。

12.生胶原能否治愈痤疮？

 答：治疗轻、中度青春痘有神奇效果，对于错误挤压青春痘产生的表浅疤痕和色斑沉着效果更加明显。

13.生胶原刚开始效果还好，后来都没什么感觉了！这是为什么？

 答：因为刚开始使用活性胶原蛋白时，皮肤迅速得到胶原的补充，使处于亚健康状态的皮肤得到营养，恢得处于上升期，所以效果相对明显。而当皮肤充分得到营养补充后，已达到健康平稳状态，所以变化的感觉相对上升期不甚强烈。但坚持长期使用后，你会发现脸部已经恢复红润、光泽，你也应该能感觉到皮肤比最初使用的时候平滑许多，逐渐地你的皮肤将会变得比较紧实。你应该注意到眼睛区域第一次出现的皱纹的地方，长期使用后已经开始减少了。

14.生胶原用于过敏性皮炎的效果如何？

 答：由于过敏性皮炎的产生是由于皮肤的外部环境改变，皮肤表面末稍神经紧张而导致的，生胶原可以补充水分，镇静肌肤，对控制炎症后的过敏皮肤有良好的效果。

15.使用生胶原是否有副作用？

答：生胶原的原料是牛肌腱，在原料提取过程就经过多次严格消毒及灭菌，在完全GMP条件下无菌操作最终得到生胶原。我们的胶原经过酶的处理，将胶原分子的两端去除，只保留完整的三螺旋结构，将胶原的免疫性降至最低。同时，胶原在人体内作为结构蛋白，具有良好的生理惰性，不会发生其它逼作用。

16.为什么要用动物胶原呢，植物的不好吗？

答：事实上，只有动物才含有胶原，并且和人体内的胶原结构最为相似，因此才能达到治疗修复的效果，植物内提取的纤维等则是有利于油脂分泌等，作用机理不同，因此效果也不尽一样。

17.生胶原为什么要低温保存呢？

答：我们使用的胶原，采用国际上先进的低温萃取技术，能最大程度上保持胶原的活性，和市售的胶原蛋白具有本质不同，具有活性的胶原在温度达到38摄氏度的时候就会变性，失去原有的生物功能，因此我们建议低温保存，在4摄氏度的时候使用效果最佳。

18.生胶原为什么具有去疤效果？

答：疤痕的形成是由于机体炎症反应，皮肤受损组织的无序生长所造成的。活性胶原能有效连接因创伤和感染造成的皮肤真皮展示断裂的胶原纤维，提高细胞活性，促进细胞再生功能，能深入受损真皮层，加快能分泌人体自身胶原的成纤维干细胞的生长，软化并缓解疤痕形成，从而修复缺损的真皮层。

19.生胶原适合什么人群使用呢？使用以后为什么有时候会有剌痒的感觉呢？

答：医学研究证明，健康的皮肤上，盖有一层看不见的微酸性保护膜（PROTECTIVE ACID MANTLE），它是由水分和油脂组成的皮肤最外防线，保护皮肤免受外界环境伤害，例如病菌，化学品，汗碱等，此外，它也是保持肌肤柔润细滑的重要元素。保护膜内含维生素、脂肪酸、尿酸、乳酸及氨基酸，医学专业常以酸碱值（PH）来衡量皮肤的健康状态，若处于PH4.5-PH6微酸范围内，视为健康。其中以酸碱值PH5.5最为理想。在日常生活中，保护膜会不知不觉地遭到破坏，例如排汗，接触化学剂、污染物、干燥；使用劣质清洁品，护肤品等，皮肤会因此容易引起敏咸甚至感染。

基于增强皮肤微酸性保护腊的理念，按不同肤质和气候的需要，我们要生胶原采用微酸环境（PH=4.5-5.5）,务求令皮肤经常维持在微酸状态，抵御外界伤害；适合各种肤质使用，油性皮肤和容易致敏皮肤（SENSITIVE SKIN）也适合使用。微酸对皮肤有柔和的刺激作用，使局部毛细血管扩张，改善血液循环，促进皮肤代谢和毛发生长，微酸环境还可以中和洗发液、香皂等碱性日化用品，使皮肤保持弱酸性同，从而抑制面部病原微生物的繁殖，保护皮肤的健康，因此在使用时，出现周围微痒的情况是正常的。

20.青春痘的痘印分类？活性胶原的治痘机理？

答：痘印就是有色拌，分为红斑、黑斑。

红斑：是指在长痘处，细胞发炎引起血管扩张，痘消后血管不是马上缩下去，就形成了一个个暂时性红斑，当皮肤温度上升或运动时更红。

黑斑：痘发炎后的色素沉淀，使痘处的地方留下黑黑的颜色，以上两种都属于暂时性疤痕。使用生胶原后，胶原渗入皮肤表皮层，同时能刺激人体自身胶原的加速合成。胶原吸附上皮细胞在色素沉着处，加快角质层的脱落，淡化色斑，减缓深层黑色素生成。

皮肤中的黑色素细胞中的酪氨酸被酪氨酸酶的催化为多巴醌，形成黑色素，而胶原中含酪氨酸残基，它与酪氨酸竞争酪氨酸酶,由此阻止皮肤中的酪氨酸酶转化为黑色素。

疤痕的形成是由于机体炎症反应，皮肤受损组织的无序生长所造成的，生胶原能有效修复连接因非正常挤压青春痘或痘印造成的皮肤凹陷、突起。提高细胞活性，促进细胞再生功能，能深入受损真皮层，加快能分泌人体自身胶原的成纤维干细胞的生长，软化并缓解疤痕形成。胶原通过受损的肌肤，能深入皮肤表层，促进代谢，淡化疤痕、缓解皮肤各种症状的作用。生胶原不但促进病理产物和炎性渗出物的吸收，并能使病态组织崩溃和溶解，调整免疫机制，促使坚硬的结缔组织平复，使其不再高出正常皮肤。

21.生胶原的抗衰老效果

答：皮肤真皮里75%由胶原级成，纤维状的胶原形成网状结构，一方面提供皮肤的张力和弹性，同时还向表皮和表皮附属器官（毛发）供给营养。

皮肤的衰老过程，实质上就是胶原纤维受到不断破坏和减少的过程。紫外线照射、风沙、寒热剌激、辐射以及不断拉扯皮肤等都会对胶原纤维造成破坏，并且女性的变化显着于男性。虽然自然规律无法改变，但这并不意味我们不能阻止胶原的破坏与减少。从20世纪70年代美国医生K.D.Hamblin运用牛胶原注射祛皱和修复疤痕开始。胶原的抗皱效果开始不断得到证实，并成为目前六要的抗皱手段之一。

胶原也是提高组织细胞贮水功能，促进水分代射的重要营养素，它的由三条肽链组成的独特就会减弱，细胞的可塑性呈瑞衰减状态，皮肤出现干燥、起邹等脱水现象。

另外，因为胶原保水性及紧缩性的双重作用，还可改善干性及油性肌肤分泌状态，调整皮肤表面的油脂平衡，使其逐渐趋于中性肌肤，毛孔紧缩细致。

胶原纤维具有强大的韧性和弹性，倘若把一根长骨比拟成一根水泥柱子，那么胶原纤维就是这根柱子的钢筋框架，而胶原的缺乏，就像建筑物中少用了钢筋，折断的危险就在旦夕。

22.人体有必要补充胶原吗？体内难道不能自身合成吗？

答：胶原蛋减少的原因：

1.       生理因素

相关研究结果显示，人从出生到20岁期单胶原在体内的含量会逐渐增加，20岁之后维持稳定，25岁以后就开始逐渐减少，到了70岁则保持在最小含 量。

2.       紫外线

导致皮肤老化80%的因素来自日光紫外线，紫外线能穿透真皮深层，破坏真皮的弹性纤维和胶原。

3.       环境污染

有害气体，空调环境，电脑辐射，疾病以及心理压力，都会使人体内自由基的含量增多，而自由基对胶原有极大的破坏作用，会使皮肤过早老化。

体内合成胶原的速度远远低于消耗缺失的部分，因此有必要体外补充胶原。

皮肤的光泽是由表皮的含水量决定的。

皮肤的弹性是由真皮的含水量决定的。

I. 澳斯登的胶原蛋白为什么会不好溶解是温度不对吗还是怎样

好的胶原蛋白产品在纯净水常温下迅速溶解，不沉淀，水色清澈透明，正常胶原蛋白产品是在水温50度左右，待1分钟左右溶解为透明液体后饮用，如果您购买的这款产品溶解性差的话只能说明该款产品含有的胶原蛋白并不纯正

J. 热残留胶原蛋白是什么还有总胶原蛋白又是什么胶原蛋白是溶于脂质还是溶于水谢谢

热残留胶原蛋白？你是把胶原蛋白溶于水了，加热了，还是怎样施加了外因？
胶原蛋白不容易脂质。在水中的溶解要看水的pH是不是远离胶原的等电点，还有水中是否有盐，有多少盐？盐含量影响它的溶解和粘度。现在市面有很多自称胶原蛋白的，其实都不是。胶原蛋白是热敏性的，必需低温保存，很容易失活，失活就没用了。