细胞中的胶原纤维切片是什么样子

❶ 如何在组织切片上区分心肌细胞 成纤维细胞

成纤维细胞，也称为纤维母细胞，是疏松结缔组织的主要细胞成分，属于终末分化细胞，这种细胞会制造胶原蛋白等蛋白质。成纤维细胞数目最多，胞体大，为多突的纺锤形或星形的扁平细胞，细胞核呈规则的卵圆形，细胞轮廓不清，具有突起。其形态尚可依细胞的功能变化及其附着处的物理性状不同而发生改变。成纤维细胞胞体较大，胞质弱嗜碱性，胞核较大呈椭圆形，染色质疏松着色浅，核仁明显。电镜下，其胞质可见丰富的粗面内质网、游离核糖体和发达的高尔基复合体，表明它具有合成和分泌蛋白质的功能。成纤维细胞尚可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质。它合成的前胶原蛋白分子经内切酶作用，聚合和重排，可形成与成骨细胞合成分泌的胶原原纤维一样具有64nm周期横纹的胶原原纤维，胶原原纤维经互相粘合形成胶原纤维。经检测，这两种细胞合成分泌的胶原纤维均是Ⅰ型胶原纤维，在形态和生化结构上完全相同。处于成熟期或称静止状态的纤维细胞，胞体变小，呈长梭形，粗面内质网和高尔基复合体均不发达，被称为纤维细胞。在外伤等因素刺激下，部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞，其功能活动也得以恢复，参与组织损伤后的修复。另外，在结缔组织中，仍保留着少量具有分化潜能的间充质细胞，它们在创伤修复等情况下可增殖分化为成纤维细胞。当成纤维细胞癌变时形态会从扁平梭形变成球形。

❷ 纤维细胞的形态

成纤维细胞形态多样，常见的有梭形、大多角形和扁平星形等，其形态尚可依细胞的功能变化及其附着处的物理性状不同而发生改变。成纤维细胞胞体较大，胞质弱嗜碱性，胞核较大呈椭圆形，染色质疏松着色浅，核仁明显。电镜下，其胞质可见丰富的粗面内质网、游离核糖体和发达的高尔基复合体，表明它具有合成和分泌蛋白质的功能。成纤维细胞尚可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质。它合成的前胶原蛋白分子经内切酶作用，聚合和重排，可形成与成骨细胞合成分泌的胶原原纤维一样具有64nm(640?)周期横纹的胶原原纤维，胶原原纤维经互相粘合形成胶原纤维。经检测，这两种细胞合成分泌的胶原纤维均是Ⅰ型胶原纤维，在形态和生化结构上完全相同。 处于成熟期或称静止状态的成纤维细胞，胞体变小，呈长梭形，粗面内质网和高尔基复合体均不发达，被称为纤维细胞。在外伤等因素刺激下，部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞，其功能活动也得以恢复，参与组织损伤后的修复。另外，在结缔组织中，仍保留着少量具有分化潜能的间充质细胞，它们在创伤修复等情况下可增殖分化为成纤维细胞。

❸ 弹性纤维和胶原纤维是神马（什么）东西

弹性纤维是一种纤维，又名黄纤维，含量较胶原纤维少，但分布广。新鲜状态下呈黄色，在HE染色切片中，着色淡红，不易与胶原纤维区分，用醛复红能将弹性纤维染成紫色，弹性纤维在疏松结缔组织中略呈黄色，折光性强，富于弹性。

胶原纤维是主要含有胶原蛋白，氨基酸有甘氨酸、脯氨和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内，在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。

(3)细胞中的胶原纤维切片是什么样子扩展阅读：

弹性纤维：

一般较胶原纤维细，纤维有分支，排列散乱。其化学成分主要是弹性蛋白，对牵拉作用有更大的耐受力。皮肤和腱的弹性纤维由成纤维细胞产生，在大血管则由平滑肌细胞产生。弹性纤维描述：染成蓝紫色，单条分布，有分支，并交织成网。

胶原纤维：

胶原纤维是真皮中的主要成分，占真皮全部纤维质量的95%-98%.新鲜的胶原纤维呈白色，故又称白纤维。在HE染色标本中，胶原纤维被染成粉红色，较粗大，直径0.5-20um,成束分布，排列紧密，并交织成网。

胶原是唯一含羟脯氨酸较多的蛋白质，因此，测定羟脯氨酸的量能确定组织中胶原的含量。胶原蛋白占全身蛋白质的30%。聚合成胶原的微原纤维的蛋白质分子称为原胶原分子 。

❹ 胶原纤维的胶原蛋白的染色

胶原纤维在HE染色法被染成粉红色，除此之外，它还可以用一些阴离子的染料来进行染色，如用淡绿可把它们染为绿色，用甲苯胺蓝可将其染为蓝色，在网状纤维染色中，如不加以处理，它又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫细胞化学染色中，胶原纤维由于含的负电荷过多，常导致某些非特异性的染色，应特别注意。
（一）.Van Gieson（V.G）染色法
I. 试剂的配制：
weigert氏苏木素
A液： 苏木素 1g （haematoxylin）
无水酒精 100ml
B液： 30%三氯化铁 4ml （ferric chloride）
蒸馏水 95ml
盐酸 1ml
II．Van Gieson氏液
A液： 酸性品红 1g（acid fuchsin）
蒸馏水 100ml
B液： 苦味酸饱和水溶液，（1.22%）（picric acid）
注意事项：
1、Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合，几个小时内用完，最长不得超过一天。
2、苏木素配后经二十多天才能成熟，必须提前配制。
3、该液能抵抗弱酸性染液，对已着染的细胞核在酸性染液的作用，不易被脱去颜色，如果不特别深染，则无须分化。
4、Van Gieson氏液取B液9ml，加入A液1ml，即可使用。
操作方法：（后面的各种方法，如没特别说明，都在室温下进行）
1、切片脱蜡至水，
2、用Weigert氏苏木素染20min，
3、水洗，必要时可分化，
4、流水冲洗10min，
5、染Van Gieson氏液1min，
6、用95%酒精快速分化，
7、无水酒精脱水，二甲苯透明，封固。
结果：
胶原纤维：鲜红色，肌纤维： 黄色，红细胞： 黄色，细胞核： 蓝黑或灰色。
注意事项：
1、该法染完的切片，较易褪色如需照相，应尽早完成。
2、苏木素染液如为棕色或沉淀，应将其抛弃。
3、分化用的酒精，应使用95%以上的酒精，低浓度的酒精褪色能力强，容易将着染的红色脱去。
4、切片也可以用天青兰苏木素替代Weigert氏苏木素，染核效果基本一样。
（二）.Masson氏三色染色法：天青石蓝液的配制：天青石蓝（Celestin blue B） 1.25g硫酸铁铵（ferric ammonium sulfate）1.25g
蒸馏水 200ml
甘油（glycerin） 30ml
将前两者溶于蒸馏水中，然后煮沸，冷却后过滤，再加入甘油和麝香草酚。
Mayer氏苏木素的配制苏木素 0.1g蒸馏水 100ml
钾明矾（Potassium alum） 5g
柠檬酸（Citric acid） 0.1g
水合氯醛（Chloral hydrate）20mg
配制法：
将苏木素放入蒸馏水中，用玻棒不停地搅拌直至完全溶解，再依次加入钾明矾，柠檬酸和水合氯醛，再继续搅拌，最后加入碘酸钠，搅拌均匀，即可使用。
丽春红酸性品红液的配制：丽春红（ponceau 2R） 0.7g
酸性品红（acid fuchsin）0.3g
冰醋酸 1ml
蒸馏水 99ml
操作方法：1
、切片脱蜡至水，2、1%高锰酸钾氧化切片5min，
3、水洗，草酸漂白1min，
4、水洗，蒸馏水洗，天青石蓝染5min水洗，
5、摔去余液不用水洗，滴染Mayer氏苏木素3-5min，
6、流水冲洗5-10min，
7、丽春红苦味酸饱和液染5min，
8、1%醋酸水溶液洗，
9、1%磷钼酸分化切片约5min，
10、蒸馏水洗，
11、1%淡绿或者甲苯胺蓝滴染30s，
12、1%醋酸水溶液洗切片，
13、95%酒精分化，无水酒精脱水，
14、二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：胶原纤维呈现绿色或蓝色，细胞核呈现灰黑或灰蓝色，肌肉和胞质红细胞呈现红色。
注意事项：①Masson氏染液配完后保存时间不宜过长，如有可能，每次染色以染配为佳，如何可使着色颜色的鲜艳性。②切片在各级酒精中脱水，时间不宜过长，否则会将着染的颜色脱去。③切片保存所着染的颜色显长为1—2年以后会随着时间的延长而逐渐褪去，应予注意。④磷钼酸和磷钨酸在染色法中的作用各有不同，磷钼酸作用于胶原纤维，磷钨酸作用于纤维胶]质，肌胶质，神经胶质和上皮纤维等。上述两种试剂的使用，可以促进组织有选择的染色，它们可以减少背景和核的染色，使背景清晰。⑤如有可能，在组织固定时，用Zenker氏固定液固定，如此对染色效果将更好。
临床应用：1
、与淀粉样物的区别： 胶原纤维发生病变如坏死或透明变性时，它与淀粉样物在HE染色时被染为粉红色，不好区别。应用V.G染色法，能将胶原纤维染为粉红色，而淀粉样物将被染为黄色。2、应用与间胚叶来源肿瘤的区别：
如纤维瘤（肉瘤），平滑肌、横纹肌瘤（肉瘤），神经纤维瘤（肉瘤）、恶性纤维组织细胞瘤等，由于都含有大量的纤维，HE染色均为红色。应用Masson氏染色法，可将胶原纤维染色蓝色或绿色，肌源性组织被染为红色。
3、应用与其他慢性炎症的区别。
如慢性阑尾炎，疤痕愈合时，纤维愈复病灶可被染为鲜红色或蓝绿色，SARS病患者愈合后有的肺部可出现疤痕，粘连，此时可显示蓝色或绿色。
可用于鉴定肝硬化及创伤组织的修复程度。肝硬化时的肝组织有许多不同大小的假小叶，用上述方法显示时，可显示出不同的组织结构。V.G法可将包绕假小叶的胶原纤维染成红色，胆汗呈绿色。
小结
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色，如V.G着染红色，Masson氏着染蓝色或绿色。这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应，而染料分子量的大小是关键，分子量小的分子移动迅速，行动快，对组织的渗透性较强，能穿透较为致密的组织。分子量大的染料分子移动较迟缓，渗透力较弱，可作用于组织强求构较疏松的组织，染色时间可适当延长。
在相关的染料中，分子量从小到大依次排列是：苦味酸（黄色）：229.11；桔黄G（黄色）：452；丽春红（红色）：480.42；酸性品红（红色）：585.53；苯胺蓝（蓝色）：737.72；亮绿（绿色）：792.72；甲基蓝（蓝色）>99。
染色是一个较为复杂的化学反应和物理作用的双重过程，在应用这些方法时，根据不同情况，选择不同的方法，认真地操作，方能获得最佳的效果。

❺ 胶原纤维的简介

胶原纤维（collagenous fiber） 在三种纤维中数量最多，新鲜时呈白色，有光泽，故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性，粗细不等，直径0.5~10um，呈波浪形，有分支并交织呈网，胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。胶原蛋白（collagen）由成纤维细胞分泌，于细胞外聚合成胶原原纤维，在再经少量黏合成胶原纤维。电镜下，胶原原纤维直径20~100nm，呈明暗交替的周期性横纹，横纹周期约64nm,胶原纤维的韧性大，抗拉力强。
胶原纤维：染成粉红色，束状，其中的原纤维大多看不清；
儿童时期，骨骼的胶元纤维占的比重较大，成骨细胞制造骨质十分活跃。因此，儿童的骨骼弹性大，不易折断。

❻ HE染色的实验原理方法及注意事项

HE染色全名为苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法，是最基本的也是最重要的病理学染色技术。

HE染色是目前国内外病理诊断上广泛采用的 常规染色方法。一张好的HE切片是保证正确病理诊断的关键。切片质量的好坏，可直接影响疾病诊断的及时与准确性。作为一个合格的实验技术员，能制作出一张高质量的HE染色切片，是必须掌握的一门重要功课。
HE染色的实验原理及注意事项
一、细胞核染色原理：
苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
二、细胞浆染色原理：

细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

三、分化作用：
染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木精的醌型结构，使组织与色素分离而褪色。经苏木精染色后，必须用0.5%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去，在进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。因此，在HE染色中分化是极为关键的一步。
四、返蓝作用：
分化之后，苏木精在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色，在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经0.5%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色，故分化之后，立即用水除去组织切片上的酸而终止分化，再用弱碱性水（0.2%氨水）使苏木精染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。
实验材料
固定液：常用95%乙醇和冰丙酮
苏木精染液：称取苏木精粉0.5g，铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中，然后取NaIO 31g，水5ml，再加入甘油30ml和冰醋酸2ml，混合均匀，滤纸过滤，备用。
伊红染液：称取0.5g水溶性伊红染液，溶于100ml蒸馏水中。
稀盐酸乙醇溶液：用75%乙醇配制1%盐酸。
系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。
培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。
实验步骤
样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS 洗涤3次。
样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。
染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。
分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。
染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。
吹干或自然晾干细胞 爬片后，中性树胶封片。
若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可。
实验结果及注意事项

** 实验结果**

细胞核呈蓝色，细胞质，肌纤维，胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色

注意事项：
1. 染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min，这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
2. 切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。
3. 切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。

❼ 光学显微镜如何区分三种软骨

透明软骨、弹性软骨、纤维软骨

• 透明软骨：看不见胶原纤维。因为其中的胶原纤维是II型的，它很细，并且它的折光系数与背景基质一样

• 弹性软骨：可以看到弹性纤维（需选用正确的染色方法如EVG染色）

• 纤维软骨：可以看到很明显的、很粗的I型胶原纤维
  

光学显微镜图片：

纤维软骨 图2

❽ 纤维胶原是什么

【胶原纤维】
胶原纤维（collagenous
fiber）胶原纤维在疏松结缔组织中排列成束，彼此交织吻合，纤维束常有分支。纤维具有韧性，抗牵引力强。电镜观察，胶原纤维由更细的微原纤维（microfibrils）组成。微原纤维有特殊的横带，其周期为64nm。每条微原纤维有一序列的明暗带。暗带中比明带有较多游离的化学根，所以贮留较多的电镜切片染色剂
胶原纤维：染成粉红色，束状，其中的原纤维大多看不清；
胶原纤维主要含有胶原蛋白，氨基酸有甘氨酸、脯氨和羟脯氨酸等。胶原是唯一含羟脯氨酸较多的蛋白质，因此，测定羟脯氨酸的量能确定组织中胶原的含量。胶原蛋白占全身蛋白质的30％。聚合成胶原的微原纤维的蛋白质分子称为原胶原分子
。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内。在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
儿童时期，骨骼的胶元纤维占的比重较大，成骨细胞制造骨质十分活跃。因此，儿童的骨骼弹性大，不易折断。
【弹性纤维】
弹性纤维（elastic
fiber）弹性纤维在疏松结缔组织中略呈黄色，折光性强，富于弹性。一般较胶原纤维细，纤维有分支，排列散乱。其化学成分主要是弹性蛋白（elastin），对牵拉作用有更大的耐受力。皮肤和腱的弹性纤维由成纤维细胞产生，在大血管则由平滑肌细胞产生。
弹性纤维描述：染成蓝紫色，单条分布，有分支，并交织成网。
电镜观察，弹性纤维包含两种组分：微原纤维和均质状物质。微原纤维是由结构糖蛋白排列组成，它围绕在均质状物质即弹性蛋白之周围。

❾ 胶原纤维有没有分支

有分支并交织成网，胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。
胶原纤维（collagenous fiber） 在三种纤维中数量最多，新鲜时呈白色，有光泽，故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性，粗细不等，直径0.5~20um，呈波浪形，有分支并交织成网，胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。胶原蛋白（collagen）由成纤维细胞分泌，于细胞外聚合成胶原原纤维，在再经少量黏合成胶原纤维。电镜下，胶原原纤维直径20~200nm，呈明暗交替的周期性横纹，横纹周期约64nm,胶原纤维的韧性大，抗拉力强。