❶ 胶原酶和胰酶在细胞原代培养中的区别
胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用,作用对象是胶原组织,因此不容易对细胞产生损伤。消化原代培养的上皮类细胞用此酶效果更好。
胰蛋白酶(简称胰酶)是广泛应用的消化剂.胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质水介而使细胞分散开,在常用的蛋白酶中由于产品的活力和纯度不同,对细胞的消化能力也不同,胰蛋白酶对细胞的作用,取决于细胞类型、酶的活力、配制的浓度、消化的温度、无机盐离子、pH以及消化时间的长短等.
胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用.适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用,对细胞本身影响不大,可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害.该酶分离效果好,即使有钙、镁离子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培养液配制,即操作简便又可提高细胞成活率,最终浓度200u/mL或0.0.3mg/mL.此酶消化作用缓和,无需机械振荡,但胶原酶价格较高,大量使用将增加实验成本.
❷ Collagenase D是否就是Collagenase IV
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。 胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶,如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶,它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发酵液中提取、纯化并精制而得的白色或类白色无菌冻干粉针生物制剂。 胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。 胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为最终浓度200U/ml(约为1mg/mL)或0.03%~0.3%。胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。 1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞,用于哺乳动细胞的分离。 2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。 3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,将结缔组织分离成单个细胞。 4、胶原酶Ⅱ适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织。 胶原酶的配置 胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制、消毒灭菌和储藏。 注意: 因为Ⅰ型胶原酶分子颗粒比胰酶大,不容易过滤,因此可以用蔡式滤器过滤除菌。 钙、镁离子和血清成分不会影响胶原酶的消化作用,因而可用BSS(如D-hanks或者PBS)或含血清的培养液配制。 胶原酶的使用 1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块 2.将组织块放入离心管(三角烧瓶)中加入30~50倍体积的胶原酶溶液,旋紧盖子(密封烧瓶)。 3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内,每隔3min振摇一次,如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。 消化时间与组织的类别很有关系,对于某些肿瘤组织或其他较致密结缔组织,消化时间4~48h,对于容易消化的组织可以采用37℃震荡消化15~45min,也可以根据具体情况而定。如组织块已分散而失去块的形状,一经摇动即成细胞团或单个细胞,可以认为已消化充分。上皮组织经胶原酶消化后,由于上皮细胞对此酶有耐受性,可能仍有一些细胞团未完全分散,但成团的上皮细胞比分散的单个上皮细胞更易生长,因此,如无特殊需要可以不必再进一步处理。 4.收集消化液(有时含个别组织块及没有充分消化的组织碎屑则需用100目不锈钢网过滤),离心1000r/min,5min,去除上清,用Hanks液或者无血清培养液离心漂洗1~2次,去除上清,加培养液制成细胞悬液,接种培养瓶。
❸ 我想查一下胶原酶的作用
胶原酶是人体内源性胶原酶是指人体内部本身所,具有的胶原酶如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。要补充胶原酶只要一点点辅助作用对腰间盘明显根本没有什么效果的
❹ 胶原酶是什么有什么作用
胶原酶的化学名为胶原胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种
❺ 什么是胶原酶
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。东莞盛方实业投资有限公司最新研究成果投资创业胶原酶项目,低成本,高创收,轻松月赚万元!
❻ 胶原蛋白酶的官方定义是什么
英文名称:
Collagenase(Biozyme,Santyl)
主要是二肽、三肽等低肽,比氨基酸消化吸收快,吸收率高,并具有抵抗原 性、低渗透压,不会引起过敏、腹泻等不良反应,适用于胃功能低下、消化道疾病患者术后 恢复、耐久力运动员、婴幼儿及老人的滋补食品。 抗菌肽:又称抗微生物肽,广泛分布于自然界,在原核生物和真核生物都存在。如植物、微 生物、昆虫和脊椎动物在微生物感染时迅速合成而得,也可以用基因克隆技术生产。如乳球 菌肽(Nisin)即具有很强杀菌作用。抗菌肽主要用于食品防腐保鲜。 http://blog.sina.com.cn/u/2428140601给你更多详尽的解释 。
❼ Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别
胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞,用于哺乳动细胞的分离。
胶原酶Ⅱ适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织。
❽ 肝细胞培养
❾ 何为基质金属蛋白酶请说明其主要分类和作用
基质金属蛋白酶(mmps),基质金属蛋白酶是一个大家族,因其需要ca2+、zn2+等金属离子作为辅助因子而得名。将mmps分为6类,为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的mmp和其他分泌型mmp。
ⅳ型胶原酶为其中重要的一类,它主要有两种形式,一种被糖化,分子量为92kd,命名为mmp-9;另一种非糖化,分子量为72kd,被称为mmp-2。当前对mmp-2,mmp-9的研究较深入。
mmp-2基因位于人类染色体16q21,由13个外显子和12个内含子所组成,结构基因总长度为27kb,与其他金属蛋白酶不同,mmp-2基因5’旁侧序列促进子区域含有2个gc盒而不是tata盒。活化的mmp-2定位于细胞穿透基质的突出部位,估计其在酶解细胞间基质成分及基底膜的主要成分ⅳ型胶原中有“钻头”的作用。
此外,已证实mmp-3
和mmp-10能作用于pg、ln、fn、ⅲ型和ⅳ型胶原及明胶。且mmp-3能够激活mmp-1和其他家族成员。mmp-7能作用于明胶和fn。mmp-1的产生范围较广,可由基质纤维母细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞产生。正常情况下mmp-1阳性率很低,但在各种刺激下可高表达。有研究显示恶性肿瘤中mmp-1高表达与预后相关。
mmps的活性受到三个水平的调节,即基因转录水平,无活性酶前体经蛋白水解作用而激活以及特异性抑制因子(timp)的作用。
❿ 胶原蛋白酶是什么……急急急
胶原蛋白酶是具有催化功能的蛋白质。由上-海-雅-曦-(国际)-斯-诺-美-授-权-生-物-医-学-技-术-服-务-中-心
营-销-O-部-提-供
像其它蛋白质一样,酶分子由氨基酸组成。其中一部分链成螺旋状,一部分成折叠的薄片结构,而这两部分由不折叠的氨基酸链连接起来,而使整个酶分子成为特定的三维结构,具有特殊的催化功能,酶的催化效率是一般催化剂的30~90倍。