4型膠原酶的活性受什麼影響

『壹』 Collagenase D是否就是Collagenase IV

膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構，而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質，因此，這對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。 膠原酶按其存在的方式不同可分為人體內源性膠原酶和葯用膠原酶兩種。人體內源性膠原酶是指人體內部本身所具有的膠原酶，如牙齦、觸膜等上皮組織和關節滑膜、椎間盤內都不同程度的存在著這種膠原酶，它在體內膠原蛋白的分解過程中發揮著不可或缺的作用。葯用膠原酶是指利用生物制葯的高科技手段從溶組織梭狀芽孢桿菌的發酵液中提取、純化並精製而得的白色或類白色無菌凍乾粉針生物制劑。 膠原酶（collagenase）是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬，內含較多結締組織或膠原成分時，用胰蛋白酶解離細胞的效果較差，這時可採用膠原酶解離細胞法。 膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮細胞影響不大。因此適於消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為最終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞專用膠原酶，要根據所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。 1、膠原酶Ⅰ用於上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用於消化組織中連接部分使其成為單個細 胞，用於哺乳動細胞的分離。 2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。 3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它可用於胰腺小島組織的分離，將結締組織分離成單個細胞。 4、膠原酶Ⅱ適用於肝臟，骨，甲狀腺，心臟和唾液腺組織。 膠原酶的配置 膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配製、消毒滅菌和儲藏。 注意： 因為Ⅰ型膠原酶分子顆粒比胰酶大，不容易過濾，因此可以用蔡式濾器過濾除菌。 鈣、鎂離子和血清成分不會影響膠原酶的消化作用，因而可用BSS（如D-hanks或者PBS）或含血清的培養液配製。 膠原酶的使用 1.將漂洗、修剪干凈的組織剪成1~2mm3左右小塊 2.將組織塊放入離心管（三角燒瓶）中加入30~50倍體積的膠原酶溶液，旋緊蓋子（密封燒瓶）。 3.將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內，每隔3min振搖一次，如能放在37℃的恆溫震盪水浴箱中則更好。 消化時間與組織的類別很有關系，對於某些腫瘤組織或其他較緻密結締組織，消化時間4~48h，對於容易消化的組織可以採用37℃震盪消化15~45min，也可以根據具體情況而定。如組織塊已分散而失去塊的形狀，一經搖動即成細胞團或單個細胞，可以認為已消化充分。上皮組織經膠原酶消化後，由於上皮細胞對此酶有耐受性，可能仍有一些細胞團未完全分散，但成團的上皮細胞比分散的單個上皮細胞更易生長，因此，如無特殊需要可以不必再進一步處理。 4.收集消化液（有時含個別組織塊及沒有充分消化的組織碎屑則需用100目不銹鋼網過濾），離心1000r/min，5min，去除上清，用Hanks液或者無血清培養液離心漂洗1~2次，去除上清，加培養液製成細胞懸液，接種培養瓶。

『貳』 與皮膚衰老過程相關的一種叫做MMP的酶應該怎麼翻譯

基質金屬蛋白酶(MMP)

基質金屬蛋白酶 (matrix metalloproteinases,MMPs)
基質金屬蛋白酶是一個大家族，因其需要Ca++、Zn++等金屬離子作為輔助因子而得名，其家族成員具有相似的結構，一般由5個功能不同的結構域組成 :（1）疏水信號肽序列;（2）前肽區，主要作用是保持酶原的穩定。當該區域被外源性酶切斷後，MMPs酶原被激活;（3）催化活性區，有鋅離子結合位點，對酶催化作用的發揮至關重要;（4）富含脯氨酸的鉸鏈區;（5）羧基末端區，與酶的底物特異性有關。其中酶催化活性區和前肽區具有高度保守性。MMPs成員上述結構的基礎上各有特點。各種MMP間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。同一種MMP可降解多種細胞外基質成份，而某一種細胞外基質成分又可被多種MMP降解，但不同酶的降解效率可不同。
MMPs幾乎能降解ECM中的各種蛋白成分,破壞腫瘤細胞侵襲的組織學屏障，在腫瘤侵襲轉移中起關鍵性作用，從而在腫瘤浸潤轉移中的作用日益受到重視，被認為是該過程中主要的蛋白水解酶。目前MMPs家族已分離鑒別出26個成員，編號分別為MMP1～26。根據作用底物以及片斷同源性，將MMPs分為4類。
Ⅳ型膠原酶為其中重要的一類，它主要有兩種形式，一種被糖化，分子量為92kD，命名為MMP-9;另一種非糖化，分子量為72kD，被稱為MMP-2。當前對MMP-2，MMP-9的研究較深入。
MMP-2基因位於人類染色體16q21，由13個外顯子和12個內含子所組成，結構基因總長度為27kb，與其他金屬蛋白酶不同，MMP-2基因5』旁側序列促進子區域含有2個GC盒而不是TATA盒。活化的MMP-2定位於細胞穿透基質的突出部位，估計其在酶解細胞間基質成分及基底膜的主要成分Ⅳ型膠原中有「鑽頭」的作用。
此外，已證實MMP-3 和MMP-10能作用於PG、LN、FN、Ⅲ型和Ⅳ型膠原及明膠。MMP-7能作用於明膠和FN。MMP-1的產生范圍較廣，可由基質纖維母細胞、巨噬細胞、內皮細胞、上皮細胞產生。正常情況下MMP-1陽性率很低，但在各種刺激下可高表達。有研究顯示惡性腫瘤中MMP-1高表達與預後相關。
MMPs的活性受到三個水平的調節，即基因轉錄水平，無活性酶前體經蛋白水解作用而激活以及特異性抑制因子（TIMP）的作用。

『叄』 膠原性疾病的膠原合成酶活性的缺陷

羥賴氨酸有2個重要功能
在Lysyl羥化酶反應中形成的羥賴氨酸有2個重要功能：⑴它是碳水化合物的附著點；⑵保持膠原分子的穩定性。因此，Lysyl羥化酶活性缺陷將導致結締組織疾病。Ⅶ型EDS是由於前膠原N端前多肽裂解異常，其中A、B2型是由於COL1A2的突變，從而妨礙了前多肽裂解。EDSⅦC型則未發現有I型膠原的異常，裂解是由於I型前膠原N蛋白酶活性的缺陷。 Ⅸ型EDS和Menkes綜合征
Ⅸ型EDS和Menkes綜合征是X連鎖隱性遺傳性疾病。主要特徵是Lysyl羥化酶活性缺陷所導致的銅代謝異常。其臨床表現是膀胱憩室、腹股溝疝、皮膚鬆弛和皮膚伸展過度以及伴有枕骨角外生骨疣的骨骼異常。人們目前在30多種膠原基因中僅鑒定出上述6種突變的膠原基因，這說明有關膠原基因變異的研究還是剛剛開始，還會有更多的膠原基因變異性疾病需要人們去探索、去認識。

『肆』 中葯-金蕎麥根

沒有金薺麥根的

金蕎麥[Fagopyrum cymosum (Trey. ) Meisn ] ,
亦稱野蕎麥,天蕎麥,紅三七,系要科(Poygonum)蕎
麥屬中的一個種,大多野生在海拔500 - 3000m的
林緣,灌木叢,田邊,道旁,以及陰濕痔薄的山地.它
是中國蕎麥屬野生種類中分布最廣的一種,在我國,
從大巴山以南到中國南部均有分布,泰國,印度,尼
泊爾也普遍存在.
金蕎麥是我國民間傳統的一種中草葯,塊根人
葯,性平,微涼,味苦,酸澀,具有清熱解毒,潤肺補
腎,健脾止瀉,祛風濕之功效.民間多用於治療肺膿
瘍,自汗盜汗,久痢不止,關節酸痛,多發性膿腫,跌
打損傷等.近年來,研究證明它還具有其它更重要
的功能.如具有抗癌,抑制腫瘤細胞肺侵襲和轉移,
祛痰抗炎和抑制血小板聚集,降低還原反應和增強
巨噬細胞的吞噬作用.此外,金蕎麥籽粒還具有很
高的營養價值,其蛋白質含量豐富,同時還含有具保
健療效功能的多種礦質元素和維生素,具有軟化血
管,降低人體血脂和膽固醇,防老抗衰的作用.金蕎
麥目前仍大多處於自生自滅的狀態,資源未得到充
分的保護和利用.本文對其作較為詳細的綜述,旨
在為進一步開展其潛在價值提供參考.
1植物學特徵
金蕎麥,多年生草本,高50一150cm,地下有塊
根,莖直立,有淺溝,中空,質軟,有分枝.葉互生,卵
狀三角形或扁寬三角形,徑3--8cm,頂端常突尖,基
部心狀戟形,托葉鞘近筒狀斜形,膜質易裂,長5一
8cm,葉柄細長.花序腋生或頂生,為疏散的圓錐花
序;花兩性,有花梗,花單被,花被5深裂,白色裂片
狹長圓形,長約2mm,宿存;雄蕊8,2輪;雌蕊1,花
柱3.瘦果卵形,具2棱,瘦長;種子1,花期7一8
月,果期10月.
2金蕎麥的葯用成分及功效
金蕎麥的塊根中主要含有一類原花色素昔的縮
合性單寧混合物,包括:表兒茶素,表二茶素-3一沒
食子酸脂,原矢車菊素B一2的3.3'一二沒子酸脂.
而這類混合物具有抗癌作用.另外,它還含有芸香
昔,類黃酮等葯用成分.這使其具有極為重要的葯
理作用.
2.1杭癌作用
孟凡虹等在金蕎麥素體外抗癌作用的研究中發
現,濃度為125ug/ml的金蕎麥根素對人肺癌,宮頸
鱗癌,鼻咽鱗癌細胞的生長抑制率分別為84.5%,
78.9%,100%.它可使癌細胞的膜RNA, DNA代
謝核分裂受損傷.據研究,金蕎麥對腫瘤細胞的作
用可能是通過直接或間接作用於DNA代謝的某一
環節來實現的.
2.2抑制種瘤細胞肺侵襲和轉移
癌的侵襲及轉移是一個復雜的過程,防止腫瘤
的轉移對腫瘤患者的治療有重要的意義.腫瘤細胞
在轉移過程中,分泌IV型膠原酶(MMPS),它可降
解基底膜主要構成成分IV型膠原,從而有利於腫
瘤轉移,而金蕎麥素能抑制HT一1080人纖維肉瘤
細胞IV型原的產生,但對酶活性無明顯影響.
2.3對血小板功能的影響
研究證明:血小板的聚集可促進腫瘤轉移.而
有活血化瘓功能的金蕎麥可改善腫瘤病人血液高粘
態,影響腫瘤細胞的血行擴散和轉移.靜脈注射
50mg/kg金蕎麥,對於ADP和膠原誘導的大鼠血小
板聚集作用有明顯抑製作用.
2.4降脂降糖作用
萬方數據
中國野生植物資源第20卷第2期
由於自由基可造成胰島素R細胞的損傷,導致
胰島功能下降,使血糖升高,而金蕎麥富含氨基酸,
植酸和多種維生素,這些物質可對抗自由基對機體
的損傷.這正是它能降脂降糖的機理所在.
2.5鎮咳和祛疾作用
金蕎麥能促進排痰,有益於引流,可用於治療肺
膿腫.臨床證明金蕎麥及其制劑對急性及亞急性肺
膿腫有較突出的療效,總有效率為82.5%0
2.6抗菌作用
金蕎麥提取物沒有明顯的體外抗菌活性,但體
內研究發現,它有預防感染的作用.在感染前24-
72小時注射小鼠,對感染有較好的保護作用,感染
後及感染同時注射,則無此作用.此外,其提取物對
雞白痢沙門氏菌,金黃色葡萄球菌,肺炎雙球菌,多
殺性巴氏桿菌,豬丹毒桿菌有較好的抑菌活性.
2.7對巨噬細胞吞噬功能的影響
實驗證明,金蕎麥能加強機體的自我防疫能力.
給小鼠腹腔注射83mg/kg, 48小時後處死,其吞噬
指數較對照提高.
2.8其他作用
臨床上,用金蕎麥治療原發性痛經,小兒腹瀉,
細菌性痢疾,麻疹等都取得了很好的療效.
3金蕎麥的營養價值
近年來,栽培蕎麥的營養,保健作用受到國內外
的普遍關注,作為其近緣野生種的金蕎麥的營養價
值尚未得到充分認識.張政等在對其籽粒成分分析
表明:
金蕎麥籽粒蛋白質含量高達12.6%,達到優質
禾穀類糧食的蛋白質含量水平;組成上以球蛋白含
量最高,占總蛋白總量的56.3%,以後依次為清蛋
白,醇溶蛋白及谷蛋白.此外,其必須氨基酸含量較
高,尤其是phe, lyr, cys, met及trp的含量顯著高於
禾穀類糧食中的氨基酸水平,其必需和半必需氨基
酸佔全部氨基酸總量的43.1%,其構成成分接近於
FAO/WHO的氨基酸含量建議模式.
金蕎麥籽粒中Cu含量高於小麥粉和稻米的平
均水平,Zn含量與小麥粉和稻米相接近,Se含量明
顯高於小麥粉,稻米及蕎麥等糧食類.
金蕎麥籽粒中生物類黃酮含量在1.6%以上,
與苦蕎(1.70%)相當;VE的含量為1. 66mg/100g
以上,高於甜蕎(1. 42mg/1008)和苦蕎(0. 99mg/
100g);煙酸含量3. 85mg/100g,高於甜蕎(3. llmg/
100g)和苦蕎(3. 42mg/100g ),也顯著高於小麥粉
(2.Omg/l00g).
4開發及利用前景
綜上所述,金蕎麥無疑是一種經濟附加值很高
的資源植物,而且,對土壤要求不嚴格,田間管理可
較粗放,繁殖易,多採用種子和分株繁殖,繁殖系數
高.這樣,不但成本低,而且還能充分利用土地資
源,為農民脫貧致富提供途徑.此外,至今對金蕎麥
的研究多限於根莖,其他方面的開發還不夠深人,所
以,我們不僅要保護金蕎麥的野生資源,而且還要發
展工人栽培,把它作為天然產物中開發的重點進行
深開發,發揮其潛在的價值,造福於人類.

『伍』 明膠酶有什麼活性

明膠酶（gelatinase）或稱Ⅳ型膠原酶（typeⅣcollagenase）屬於金屬蛋白酶家族成員，是能夠降解Ⅳ型膠原的特異的一種基質水解酶，其活性與腫瘤細胞侵襲和轉移密切相關，衡量葯物對腫瘤細胞金屬蛋白酶活性的影響是評價該葯物抗侵襲作用的一個重要方面。人纖維肉瘤細胞HT1080能大量分泌分子量為72KD和92KD的兩種明膠酶。將葯液與腫瘤細胞金屬蛋白酶提取液共浴，用SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法可將這兩種明膠酶按分子量大小分開，顯示兩條負染帶，根據帶的亮度和寬度可判斷葯物對金屬蛋白酶活性的影響，用於抗侵襲和轉移葯物的作用及機理研究。
明膠酶-作用
本金屬蛋白酶提取液主要含72KD和92KD兩種明膠酶，將金屬蛋白酶提取液電泳後，在反應緩沖液中加入葯物與膠條反應，經過足夠長時間的溫育後，加葯者負染帶不出現或減弱，則表明葯物對明膠酶活性有抑製作用。此外還可將膠壓膜處理後用激光光密度計在633nm處對負帶掃描進行定量分析。

『陸』 膠原蛋白酶反復凍存會影響活性嗎

膠原蛋白酶我沒有用過，但是其他酶用過很多，教授給我了一句話————酶可以凍存。但不要反復凍融，那會影響它的活性，所以第一次實驗就叫我分裝，估計每次用量將酶經行分裝，需要多少用多少。就不存在反復凍融的問題了。

『柒』 基質金屬蛋白酶和金屬蛋白酶有什麼關系

基質金屬蛋白酶
(matrix
metalloproteinases,mmps)


基質金屬蛋白酶是一個大家族，因其需要ca++、zn++等金屬離子作為輔助因子而得名，其家族成員具有相似的結構，一般由5個功能不同的結構域組成
:（1）疏水信號肽序列;（2）前肽區，主要作用是保持酶原的穩定。當該區域被外源性酶切斷後，mmps酶原被激活;（3）催化活性區，有鋅離子結合位點，對酶催化作用的發揮至關重要;（4）富含脯氨酸的鉸鏈區;（5）羧基末端區，與酶的底物特異性有關。其中酶催化活性區和前肽區具有高度保守性。mmps成員上述結構的基礎上各有特點。各種mmp間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。同一種mmp可降解多種細胞外基質成份，而某一種細胞外基質成分又可被多種mmp降解，但不同酶的降解效率可不同。


mmps幾乎能降解ecm中的各種蛋白成分,破壞腫瘤細胞侵襲的組織學屏障，在腫瘤侵襲轉移中起關鍵性作用，從而在腫瘤浸潤轉移中的作用日益受到重視，被認為是該過程中主要的蛋白水解酶。目前mmps家族已分離鑒別出26個成員，編號分別為mmp1～26。根據作用底物以及片斷同源性，將mmps分為4類。

ⅳ型膠原酶為其中重要的一類，它主要有兩種形式，一種被糖化，分子量為92kd，命名為mmp-9;另一種非糖化，分子量為72kd，被稱為mmp-2。當前對mmp-2，mmp-9的研究較深入。


mmp-2基因位於人類染色體16q21，由13個外顯子和12個內含子所組成，結構基因總長度為27kb，與其他金屬蛋白酶不同，mmp-2基因5』旁側序列促進子區域含有2個gc盒而不是tata盒。活化的mmp-2定位於細胞穿透基質的突出部位，估計其在酶解細胞間基質成分及基底膜的主要成分ⅳ型膠原中有「鑽頭」的作用。


此外，已證實mmp-3
和mmp-10能作用於pg、ln、fn、ⅲ型和ⅳ型膠原及明膠。mmp-7能作用於明膠和fn。mmp-1的產生范圍較廣，可由基質纖維母細胞、巨噬細胞、內皮細胞、上皮細胞產生。正常情況下mmp-1陽性率很低，但在各種刺激下可高表達。有研究顯示惡性腫瘤中mmp-1高表達與預後相關。

mmps的活性受到三個水平的調節，即基因轉錄水平，無活性酶前體經蛋白水解作用而激活以及特異性抑制因子（timp）的作用。

『捌』 我想查一下膠原酶的作用

膠原酶是人體內源性膠原酶是指人體內部本身所，具有的膠原酶如牙齦、觸膜等上皮組織和關節滑膜、椎間盤內都不同程度的存在著這種膠原酶它在體內膠原蛋白的分解過程中發揮著不可或缺的作用。要補充膠原酶只要一點點輔助作用對腰間盤明顯根本沒有什麼效果的