濃縮膠原理是什麼

❶ 濃縮膠和分離膠的作用分別是什麼

1.濃縮凝膠的作用:
具有堆積作用，凝膠濃度小，孔徑大。當在濃縮凝膠中加入較稀的樣品時，通過大孔凝膠的遷移濃縮到一個狹窄的區域，電泳時可以看到樣品被壓成一條線。
2.分離凝膠的作用:
具有分離分子的作用，是電荷效用和分子篩效用。當樣品從濃縮凝膠進入分離凝膠時，蛋白質在分離凝膠中的泳動速度因其分子量不同而不同，從而使目標蛋白質得以分離。蛋白質越大，相應的分離凝膠的濃度應該越小。比如90k以上的蛋白質，一般用6%的分離膠分離。
延伸信息:
不同濃度的分離膠圓肢好和濃縮膠導致孔徑大小不同，蛋白質的游動速度也不同。
濃縮膠的濃度通常是3.9%，濃度比較小；濃膠飢枝中的孔隙較大，起到了使蛋白混合物在進入分離膠前達到同一起跑線的作用，以便在分離膠中更好的分離，所以需要在濃膠充分運行後調整電壓。
分離凝膠的濃度從6%到15%不等。當樣品從濃縮凝膠進入分離凝膠時，由於蛋白質分子量不同，小分子物質容易通過，阻力橘鉛小，遷移速度快；大分子被更大的阻力所延緩。因此，可以分離目標蛋白質。

❷ 在PAGE電泳過程中濃縮膠和積層膠的作用分別是什麼

應該是蛋白吧。由洞備源於電泳緩沖液和凝膠中的離子不同，濃縮膠可使所要電泳的蛋白分子濃縮集滾穗中於一條窄納態帶上。進入分離膠，不同分子質量的蛋白分子按分子量大小分離開來。較深入的原理請查閱文獻。

❸ 濃縮膠(積沉膠)和分離膠有什麼區別各自在電泳中的作用是什麼

我的一點感受，濃縮膠和分離膠的PH值不同，前者主要表現為濃縮效用，後者表現為電荷效用和分子篩效用。
濃縮效應主要在濃縮膠中完成，濃縮膠的pH6.8，在這個pH條件下，緩沖液中的HCl的Cl離子幾乎全部解離，Gly的等電點為6.0，僅少數解離為負離子，在電場中移動速度很仔緩慢。酸性蛋白質在此pH下解離為負離子，三類離子的遷移速率橡戚清為Cl>一般蛋白質>Gly，電泳開始後，Cl離子泳動快，在其後留下一個低離子濃度區。Gly在電場中移動很慢，造成移動離子的缺乏，於是快慢離子間就形成了一個缺少離子的高壓區，在高壓區內所有的負離子都會加速移動，當移到Cl離子區域時，高電壓消失，蛋白質的移動速度慢下來，當以上穩定狀態建立後，蛋白質樣品在快慢離子間被濃縮形成一個狹小的之間層，並按蛋白質所帶負電荷量的多少依次排列成帶，濃縮樣品，從濃縮膠進入分離膠後，膠的pH升高，Gly的離解度增大，泳動率上升，又因為它分子小，故超過所有的蛋白質分子，緊跟在Cl離子後，Cl離子遷移後，低離子濃度不再存在，形成了恆定的電場強梁前度，因此，蛋白質樣品在分離膠中的分離主要取決於它的電荷性質，分子大小和形狀，分離膠的孔徑有一定大小，對不同相對質量的蛋白質來說，通過時收到的滯阻作用不同，即使靜電荷相等的顆粒，也會由於這種分子篩的效應，把不同大小的蛋白質相互分開。

❹ 濃縮膠和分離膠的作用分別是什麼

濃縮膠的作用：濃縮膠有堆積作用。帶電荷的蛋白質或核酸離子在大孔徑膠中移動時阻力小，移動速度快，當接近小孔徑的分離膠時，遇到的阻力大，移動速度減慢而使樣品濃縮，形成一條狹窄區帶，以減少電泳過程中的譜帶擴散。分離膠的作用：蛋白質或核酸在電泳過程中由濃縮膠進入分離膠，由於分子篩作用，小分子的物質容易通過，阻力小，遷亮旁移速度快；大分子的則受到較大的阻力而被滯後。

1、濃縮膠的作用：濃縮膠有堆積作用。帶電荷的蛋白質或山鍵備核酸離子在大孔徑膠中移動時阻力小，移動速度快，當接近小孔徑的分離膠時，遇到的阻力大，移動速度減慢而使樣品濃縮，形成一條狹窄區帶，以減少電泳過程中的譜帶擴散。

2、分離膠的作用：蛋白質或核酸在電泳過程中由濃縮膠逗毀進入分離膠，由於分子篩作用，小分子的物質容易通過，阻力小，遷移速度快；大分子的則受到較大的阻力而被滯後。

❺ 濃縮膠導致蛋白質樣本濃縮聚集的原理

濃縮膠導致蛋白質樣本濃縮聚集的原理：濃縮膠的作用是有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個狹窄的區帶。

當樣品液和濃縮膠選pH6.8的TRIS/HCL緩沖液，電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開始後，HCL解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨棚橡酸根離子。蛋白質帶負電荷，因此一起向正極移動，其中氯離子最快，甘氨酸根離子最慢，蛋白居中。

配製方法

一般同工酶可選擇7?5%～10%的吵搏膠(過氧化物酶和酯酶7?5%較合適，超氧化物歧化酶用10%，可溶性蛋白可根據需要配製)。將配製好的凝升和祥膠液置真空乾燥器中，抽氣10Min，再加入TEMED15μl；混勻後用一細玻棒引流，沿無凹槽的玻板緩緩注入膠室中，注膠過程要防止氣泡產生。

❻ 濃縮膠和分離膠分別發揮的作用。

1、濃縮膠的作用：

有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個狹窄的區帶，在電泳的時候可以看到樣品被壓成一條線。

2、分離膠的作用：

有分離分子的作用，為電荷效用和分子篩效用。當樣品從濃縮膠進入分離膠時，由於蛋白的分子量不一樣，其碧螞在分離膠中的泳動速度不一樣，這樣就能夠分離目的蛋白，蛋白越大，所對應的分離膠濃度應該越小，比如90k以上的蛋白一般用6%的分離膠來分離。

(6)濃縮膠原理是什麼擴展閱讀：

分離膠和濃縮膠因為濃度不一樣導致孔徑不一樣，蛋白在其中的泳動速度不一樣。

濃縮膠的濃度通常為3.9%，濃度比較小；濃縮膠中的孔隙較大，起到的作用是為了讓蛋白質混合物在進入分離膠之前都到達同一起跑線，以便在敬慧中分離膠中更好的分開，因此一定要充分跑完濃縮膠之後再調電壓。亮山

分離膠的濃度從6%-15%不等，當樣品從濃縮膠進入分離膠時，由於蛋白的分子量不一樣，小分子的物質容易通過， 阻力小，遷移速度快；大分子的則受到較大 的阻力而被滯後。這樣就能夠分離目的蛋白。

❼ 分離膠和濃縮膠的區別是什麼

一、性質不同

1、濃縮膠：在不連續聚丙烯 醯胺亮漏凝膠電泳中，同一介質的凝膠濃度分為 兩種，負極的加樣側一般濃度為2%〜5%。

2、分離膠：不連續緩沖體系聚丙烯醯胺凝膠電泳中的一部分，其組成、緩沖液pH和凝膠孔徑與濃縮凝膠不同。它具有分子篩效應的小孔徑凝膠。

二、過程不同

1、濃縮膠過程：由於濃縮膠濃度低、孔徑大，分離膠濃度高，孔徑小。帶電蛋白質或核酸離子在大孔徑凝膠中運動時，阻力小，運動速度快。當接近小孔徑凝膠時，阻力較大，移動渣鍵輪速度減慢，使樣品濃縮，形成窄帶，減少電泳過程中的帶擴散。

2、分離膠過程：蛋如信白質或核酸在電泳過程中由濃縮膠進入分離膠，由於分子篩的作用，小分子物質容易通過，阻力小，遷移速度快。大分子由於較大的電阻而滯後。因此，即使具有類似凈電荷和相等的游泳率的物質，也會根據分子量的不同而通過分子篩效應從凝膠中分離出來。

(7)濃縮膠原理是什麼擴展閱讀：

濃縮膠的作用有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑大。將較細的樣品加入到濃縮膠中，通過大孔凝膠的遷移濃縮到窄的區域。當樣品液和濃縮膠選pH6.8的TRIS/HCL緩沖液，電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開始後，HCL解離成氯離子，甘氨酸解離少量甘氨酸自由基離子。

蛋白質帶負電，所以它們一起移動到正極。氯離子是最快的，甘氨酸是最慢的，蛋白質在中間。電泳開始時，氯離子游動速率最高，超過蛋白質，在電泳的背面形成一個低電導區，電場強度與低電導區成反比，從而產生較高的電場強度。

使蛋白質和甘氨酸離子快速運動，形成穩定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成一中間層。大大提高了電泳的靈敏度。

❽ 濃縮膠的作用原理

濃縮膠是在不連滾困續聚丙烯 醯胺凝膠電泳中，同一介質的凝膠濃度分為 兩種，負極的加樣側一般濃度為2%〜5%， 稱為濃縮膠，其餘部分濃度為6%〜8%， 稱為分離膠。由於濃縮膠濃度低、孔徑大， 而分離膠濃度高、孔徑小。帶電荷的蛋白質 或核酸離子在大孔徑膠中移動時阻力小，移動速度快，當接近小孔徑的分離膠時，遇到的巧備尺阻力大，移動速度減慢而使樣品濃縮，形 成一條狹窄區帶，以減少電泳過程中的譜 帶擴散。濃縮膠與分離膠的pH值不同也呵 以強化樣品的濃縮作用。濃縮膠的作用是有堆積作用，凝膠濃度較小，孔孝高徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個狹窄的區帶。當樣品液和濃縮膠選pH6.8的TRIS/HCL緩沖液，電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開始後，HCL解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質帶負電荷，因此一起向正極移動，其中氯離子最快，甘氨酸根離子最慢，蛋白居中。電泳開始時氯離子泳動率最大，超過蛋白，因此在後面形成低電導區，而電場強度與低電導區成反比，因而產生較高的電場強度，使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動，形成以穩定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成一中間層。大大提高了電泳的靈敏度。

❾ 【原創】聚丙烯凝膠電泳的濃縮膠為什麼能把樣壓成一條線

各位高手：我或頃是一個新手，請教一下為什麼聚丙烯凝膠電泳中的濃縮膠可以把樣壓成一條線呢？為什麼濃縮膠和分離膠的電壓不一樣，濃度也不一樣？原理是什麼？多謝低濃度的凝膠具有較大的孔徑祥歷，如3％的聚丙烯醯胺凝膠對蛋白質沒有明顯的阻礙作用，可用於平板等電聚焦或SDS－聚丙烯醯胺凝膠電泳的濃縮膠，也可以用於分離DNA；高濃度凝膠具有較小的孔徑，對蛋白質有分子篩的作用，可以用於根據蛋白質的分子量進行分離的電泳中. 樣品在電泳過程中首先通過濃縮膠，在進入分離膠前由於等速電泳現象而被濃縮。這是由於在電泳緩沖液中主要存在三種陰離子，Cl－、甘氨酸陰離子以及蛋白質－SDS復合物，在濃縮膠的pH值下，甘氨酸只有少量的電離，所以其電泳遷移率最小，而Cl－的電泳遷移率最大。在電場的作用下，Cl－最初的遷移速度最快，這樣在Cl－後面形成低離子濃度區域，即低電導區，而低電導區會產生較高的電場強度，因此Cl－後面的離子在較高的電場強度作用下會加速移動。達到穩定狀態後，Cl－和甘氨酸之間形成穩定移動的界面。而蛋白質－SDS復合物由於相對量較少，聚集在甘氨酸和Cl－的界面附近而被濃縮成很窄的區帶（可以被濃縮三百倍），所以在濃縮膠中Cl－是快離子（前導離子），甘氨酸是慢離子（尾隨離子）。 當甘氨酸到達分離膠後，由於分離膠的pH值（通常pH = 8.8）較大，甘氨酸離解度加大，電泳遷移速度變大超過蛋白質－SDS復合物，甘氨酸和Cl－的界面很快超過蛋白質－SDS復合物。這時蛋白質－SDS復合物在分離膠中以本身的電泳遷移速度進行電泳，向正極移動。由於蛋白質－SDS復合物在單位長度上帶有相等的電荷，所以它們以相等的遷移速度從濃縮膠進入分離膠，進入分離膠後，由於聚丙烯醯胺的分子篩作用，小分子的蛋白質可以容易的通過凝膠孔徑，阻力小，遷移速度快；大分子蛋白質則受到較大的阻力而被滯後，這樣蛋謹團搜白質在電泳過程中就會根據其各自分子量的大小而被分離。溴酚藍指示劑是一個較小的分子，可以自由通過凝膠孔徑，所以它顯示著電泳的前沿位置sykes分析的很詳細阿，偶真是受益匪淺阿！以往只知道跑膠，對原理知之甚少，今天真是打開眼見阿。以前也看過有關SDS-PAGE的資料，但是沒有講的詳細的。請問這位大蝦是從哪裡弄來的啊？多謝您了 受益匪淺好東西！