❶ 試述膠原纖維的結構和特性
試述膠原纖維的結構和特性。
LM:纖維粗細不等,形成波浪形走行的纖維束,相互交織成網,HE染色片上呈粉紅色。 EM:由膠原原纖維組成,膠原原纖維上可見明暗相間的周期性橫紋。 特性:韌性大、抗拉力強。
❷ 怎樣區別膠原纖維的韌性和彈性纖維的彈性
膠原纖維(collagenous fiber):是疏鬆結締組織中的主要纖維成分,新鮮時呈白色,故又稱白纖維.纖維常集合成粗細不等的束,直徑約為1~20μm,HE染色標本上呈粉紅色,波
浪狀走行,常有分支.膠原纖維是由更細的膠原原纖維(collagenous fibril)集合而成.電鏡下,膠原原纖維的直徑為10~200nm,每根原纖維上具有64nm明暗相間的周期性橫紋.它的化學成分是Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白(collagen).膠原纖維具有很強的韌性和抗拉力,而彈性較差.
彈性纖維(elastic fiber):數量比膠原纖維少,新鮮時呈黃色,又稱黃纖維.纖維較細,直徑約0.1.0μm,直行、有分支並互相交織成網.HE染色標本上不易著色,折光性強,常呈較亮的淡粉色.可用特殊的彈性染色法顯示(如被醛復紅染成藍紫色或被地伊紅染成棕褐色).電鏡下,彈性纖維是由微原纖維(microfibril)
和均質的彈性蛋白(elastin)構成.彈性蛋白構成纖維的核心區,電子密度低,核心外是由微原纖維形成管狀的鞘包繞著.彈性纖維富於彈性而韌性差,與膠原纖維交織在一起,使疏鬆結締組織既有韌性又有彈性,以保持其連接的組織和器官的形態、位置相對恆定並有一定的可變性.隨著年齡的增長,彈性可逐漸減弱乃至消失.
❸ 膠原纖維的膠原蛋白的染色
膠原纖維在HE染色法被染成粉紅色,除此之外,它還可以用一些陰離子的染料來進行染色,如用淡綠可把它們染為綠色,用甲苯胺藍可將其染為藍色,在網狀纖維染色中,如不加以處理,它又可被染為棕黃色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫細胞化學染色中,膠原纖維由於含的負電荷過多,常導致某些非特異性的染色,應特別注意。
(一).Van Gieson(V.G)染色法
I. 試劑的配製:
weigert氏蘇木素
A液: 蘇木素 1g (haematoxylin)
無水酒精 100ml
B液: 30%三氯化鐵 4ml (ferric chloride)
蒸餾水 95ml
鹽酸 1ml
II.Van Gieson氏液
A液: 酸性品紅 1g(acid fuchsin)
蒸餾水 100ml
B液: 苦味酸飽和水溶液,(1.22%)(picric acid)
注意事項:
1、Weigert氏蘇木素臨用前取A液和B液等份混合,幾個小時內用完,最長不得超過一天。
2、蘇木素配後經二十多天才能成熟,必須提前配製。
3、該液能抵抗弱酸性染液,對已著染的細胞核在酸性染液的作用,不易被脫去顏色,如果不特別深染,則無須分化。
4、Van Gieson氏液取B液9ml,加入A液1ml,即可使用。
操作方法:(後面的各種方法,如沒特別說明,都在室溫下進行)
1、切片脫蠟至水,
2、用Weigert氏蘇木素染20min,
3、水洗,必要時可分化,
4、流水沖洗10min,
5、染Van Gieson氏液1min,
6、用95%酒精快速分化,
7、無水酒精脫水,二甲苯透明,封固。
結果:
膠原纖維:鮮紅色,肌纖維: 黃色,紅細胞: 黃色,細胞核: 藍黑或灰色。
注意事項:
1、該法染完的切片,較易褪色如需照相,應盡早完成。
2、蘇木素染液如為棕色或沉澱,應將其拋棄。
3、分化用的酒精,應使用95%以上的酒精,低濃度的酒精褪色能力強,容易將著染的紅色脫去。
4、切片也可以用天青蘭蘇木素替代Weigert氏蘇木素,染核效果基本一樣。
(二).Masson氏三色染色法:天青石藍液的配製:天青石藍(Celestin blue B) 1.25g硫酸鐵銨(ferric ammonium sulfate)1.25g
蒸餾水 200ml
甘油(glycerin) 30ml
將前兩者溶於蒸餾水中,然後煮沸,冷卻後過濾,再加入甘油和麝香草酚。
Mayer氏蘇木素的配製蘇木素 0.1g蒸餾水 100ml
鉀明礬(Potassium alum) 5g
檸檬酸(Citric acid) 0.1g
水合氯醛(Chloral hydrate)20mg
配製法:
將蘇木素放入蒸餾水中,用玻棒不停地攪拌直至完全溶解,再依次加入鉀明礬,檸檬酸和水合氯醛,再繼續攪拌,最後加入碘酸鈉,攪拌均勻,即可使用。
麗春紅酸性品紅液的配製:麗春紅(ponceau 2R) 0.7g
酸性品紅(acid fuchsin)0.3g
冰醋酸 1ml
蒸餾水 99ml
操作方法:1
、切片脫蠟至水,2、1%高錳酸鉀氧化切片5min,
3、水洗,草酸漂白1min,
4、水洗,蒸餾水洗,天青石藍染5min水洗,
5、摔去余液不用水洗,滴染Mayer氏蘇木素3-5min,
6、流水沖洗5-10min,
7、麗春紅苦味酸飽和液染5min,
8、1%醋酸水溶液洗,
9、1%磷鉬酸分化切片約5min,
10、蒸餾水洗,
11、1%淡綠或者甲苯胺藍滴染30s,
12、1%醋酸水溶液洗切片,
13、95%酒精分化,無水酒精脫水,
14、二甲苯透明,中性樹膠封固。
結果:膠原纖維呈現綠色或藍色,細胞核呈現灰黑或灰藍色,肌肉和胞質紅細胞呈現紅色。
注意事項:①Masson氏染液配完後保存時間不宜過長,如有可能,每次染色以染配為佳,如何可使著色顏色的鮮艷性。②切片在各級酒精中脫水,時間不宜過長,否則會將著染的顏色脫去。③切片保存所著染的顏色顯長為1—2年以後會隨著時間的延長而逐漸褪去,應予注意。④磷鉬酸和磷鎢酸在染色法中的作用各有不同,磷鉬酸作用於膠原纖維,磷鎢酸作用於纖維膠]質,肌膠質,神經膠質和上皮纖維等。上述兩種試劑的使用,可以促進組織有選擇的染色,它們可以減少背景和核的染色,使背景清晰。⑤如有可能,在組織固定時,用Zenker氏固定液固定,如此對染色效果將更好。
臨床應用:1
、與澱粉樣物的區別: 膠原纖維發生病變如壞死或透明變性時,它與澱粉樣物在HE染色時被染為粉紅色,不好區別。應用V.G染色法,能將膠原纖維染為粉紅色,而澱粉樣物將被染為黃色。2、應用與間胚葉來源腫瘤的區別:
如纖維瘤(肉瘤),平滑肌、橫紋肌瘤(肉瘤),神經纖維瘤(肉瘤)、惡性纖維組織細胞瘤等,由於都含有大量的纖維,HE染色均為紅色。應用Masson氏染色法,可將膠原纖維染色藍色或綠色,肌源性組織被染為紅色。
3、應用與其他慢性炎症的區別。
如慢性闌尾炎,疤痕癒合時,纖維愈復病灶可被染為鮮紅色或藍綠色,SARS病患者癒合後有的肺部可出現疤痕,粘連,此時可顯示藍色或綠色。
可用於鑒定肝硬化及創傷組織的修復程度。肝硬化時的肝組織有許多不同大小的假小葉,用上述方法顯示時,可顯示出不同的組織結構。V.G法可將包繞假小葉的膠原纖維染成紅色,膽汗呈綠色。
小結
膠原纖維在上述的兩種方法中著染不同的顏色,如V.G著染紅色,Masson氏著染藍色或綠色。這主要取決於染料對組織的滲透、吸附、沉澱和反應,而染料分子量的大小是關鍵,分子量小的分子移動迅速,行動快,對組織的滲透性較強,能穿透較為緻密的組織。分子量大的染料分子移動較遲緩,滲透力較弱,可作用於組織強求構較疏鬆的組織,染色時間可適當延長。
在相關的染料中,分子量從小到大依次排列是:苦味酸(黃色):229.11;桔黃G(黃色):452;麗春紅(紅色):480.42;酸性品紅(紅色):585.53;苯胺藍(藍色):737.72;亮綠(綠色):792.72;甲基藍(藍色)>99。
染色是一個較為復雜的化學反應和物理作用的雙重過程,在應用這些方法時,根據不同情況,選擇不同的方法,認真地操作,方能獲得最佳的效果。
❹ 膠原纖維的功能特點
膠原纖維功能包括:減緩人的組織衰老速度,特點包括:提高強度、提高耐磨性,具有耐刺穿性。
膠原纖維作為一種營養品,越來越受到營養專家的推崇,可是有很多消費者,並不了解膠原纖維的功能和特點,那麼膠原纖維的功能特點都有哪些呢?下面讓我們一起去了解吧。
膠原纖維是主要含有膠原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨和羥脯氨酸等的纖維組合物。膠原纖維是三種纖維中分布最廣泛,含量最多的一種纖維。
膠原纖維是真皮中的主要成分,占真皮全部纖維質量的95%到98%。新鮮的膠原纖維呈白色,故又稱白纖維。在HE染色標本中,膠原纖維被染成粉紅色,較粗大,直徑0.5到20um,成束分布,排列緊密,並交織成網。
膠原是唯一含羥脯氨酸較多的蛋白質,因此,測定羥脯氨酸的量能確定組織中膠原的含量。膠原蛋白佔全身蛋白質的30%。聚合成膠原的微原纖維的蛋白質分子稱為原膠原分子 。
膠原纖維是主要含有膠原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸等的纖維組合物。膠原纖維是三種纖維中分布最廣泛,含量最多的一種纖維。廣泛分布於各臟器內,在皮膚、鞏膜和肌腱最為豐富。膠原纖維染色主要用於和肌纖維的鑒別。
膠原纖維是真皮中的主要成分,占真皮全部纖維質量的95%-98%.新鮮的膠原纖維呈白色,故又稱白纖維。在HE染色標本中,膠原纖維被染成粉紅色,較粗大,直徑0.5-20um,成束分布,排列緊密,交織成網。
❺ HE染色時細胞器分別是什麼顏色
採用蘇木精-伊紅染色法也就是HE染色法的話,不能准確說出細胞器的顏色,實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。或者詳細說明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。
❻ wright染色與HE染色各有什麼特點
瑞特(Wright)染色:瑞特染料由酸性染料伊紅和鹼性染料亞甲藍組成有復合染料。細胞的染色既有物理的吸附作用,又有化學的親和作用,各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。PH對細胞染色有影響。
HE染色
細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。
著色情況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜鹼,當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變深。
(6)膠原纖維he染色是什麼形狀擴展閱讀
H-E染色評定標准:切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;染色核漿分明,紅藍適度,透明潔凈,封裱美觀。
細胞各種成分均不蛋白質,由於蛋白質系兩性電解質,所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環境中正電荷增多,易與伊紅結合,染色偏紅;在偏酸性環境中負電荷增多,易與美藍或天青結合,染色 偏藍。因此細胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經片必須清潔,無酸鹼污染。
配製頊特液必須用優質甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應近中性,否則可導致各種細胞染色反應異常,以致識別困難,甚至造成錯誤。
新鮮配製的染料偏鹼,須在室溫或37℃下貯存一定時間,待染料成熟,美藍逐漸轉變為天青B後才能使用,貯存時愈久,染色效果愈好。