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膠原蛋白怎麼使用鹽析

發布時間:2023-04-25 08:01:43

膠原蛋白的使用方法

泡水喝:用「樂扣」一類帶密封蓋的水杯,倒入少許水(兩三口能喝完的量即可),加入一袋育美膠原蛋白,蓋上蓋子上下方向振動搖勻(搖3-5下即可),待泡沫自動消失後即可飲用
塗在肌膚上:放在水或溫水中溶化後,塗在面部。5~10分鍾後清洗、或是次日清晨清洗面部。
也可配合您正在使用的化妝水使用。〔1~3%的濃度適合〕
放適量膠原蛋白在浴缸讓全身肌膚得到充分營養。
還有攪拌在自己平時喜歡飲用的飲料中也可以!

Ⅱ 膠原蛋白粉如何使用

1、首先取一個干凈的杯子,最好杯子壁上沒有水漬,以防影響膠原蛋白溶解,然後把膠原蛋白粉倒入杯子中。
2、向杯子里加入適量的溫水,會看到膠原蛋白粉在慢慢的溶解,將其攪拌均勻就可以服用了,如果不喜歡膠原蛋白的味道,可以把膠原蛋白粉加入到果汁或者牛奶里一起服用。


膠原蛋白含親水性的天然保濕因子,可以讓皮膚時刻保持濕潤、水嫩的狀態,而且活性膠原蛋白對皮膚的滲透性很強,可透過角質層與皮膚上皮細胞結合,參與和改善皮膚細胞的代謝,使皮膚中的膠原蛋白活性加強。它能保持角質層水分及纖維結構的完整性,改善皮膚細胞生存環境和促進皮膚組織的新陳代謝,增強血液循環,達到滋潤皮膚的目的。平時也可以食用豬皮、豬蹄、雞爪、魚皮、海參等食物補充膠原蛋白。

Ⅲ 膠原蛋白怎樣使用

一、如何使用膠原蛋白效果最佳?
1、內服:每天晚上睡覺前服用0.5g~2.6g(平平1湯勺約0.5g),晚上睡覺前(約10點左右)皮膚是新陳代謝最旺盛的時候,這個時間段服用可以很好的修復肌膚,如果你有果汁、牛奶或VC片,同時口服一片有加強吸收和美白保濕的效果!要想修復效果快,最好每天服用2g~3g,年齡偏大者每天5-10g。請注意:服用時間與吃飯時間至少隔開2至4小時。
2、外用:外用的話可以用於面膜或眼膜中,按1g:100g的比例加上SUM膠原蛋白精華粉(隨做隨用,取出一片面膜或眼膜,用SUM膠原蛋白精華粉打上一層輕薄的底後,敷在面部或眼部,這時就同時具有了活性膠原蛋白精華面膜的效果哦!)
3、DIY:可以自己DIY製作活性膠原蛋白護膚品:添加該產品後,對化妝品的保質期沒有影響;膠原蛋白作為一種蛋白質,本身具有營養作用,在配方調整時予以注意;因為膠原本身的保濕性和潤滑性較好,添加後可適量減少油脂的添加量,減少化妝品的油膩感。專家建議:膠原蛋白的保養時機,最好是在肌膚去角質後,皮膚處於最薄的階段所做的理療性保養。

二、使用膠原蛋白應注意的事項:
1、忌高溫,40度左右可入口為宜;
2、最好不要與碳酸飲料沖飲;
3、配合服用 Vc 片能更好吸收;
4、晚上睡覺前9-10點鍾使用最佳;
5、DIY膠原護膚品時,注意不要與含酒精成分的護膚品一起使用,因為酒精會破壞膠原蛋白的活性;
6、保持良好的飲食與作休習慣;

專家提醒:口服膠原蛋白至少要堅持一個月的周期,因為長時間流失所形成的皮膚空洞,如果沒有一定時間是難以補回來的。專家指出,由於人體自身合成的膠原蛋白僅為流失的1/4,所以通過口服膠原蛋白保養皮膚必須像補鈣那樣持之以恆。

Ⅳ 膠原蛋白精華液怎麼使用

膠原蛋白精華液怎麼使用

膠原蛋白精華液怎麼使用,想要變白還是得注意防曬,這是老生常談的話題了,愛美是女人的天性,大部分女性都是非常關注臉部的保養的,這樣我們才能擁有一張美麗的臉蛋。下面看看膠原蛋白精華液怎麼使用。

膠原蛋白精華液怎麼使用1

使用膠原蛋白原液方式,潔面後,取2-3滴,由面部中央向兩側輕輕按摩至吸收由面部中央向兩側輕輕按摩至吸收塗於原液,感覺非常舒服,保濕補水而且不油膩、原液使用順序是:潔面—爽膚水—原液塗抹全臉—眼霜—面霜或者乳液—白天需要配合防曬霜使用。

塗精華液的好處和壞處

首先需要告訴大家的精華液實在是沒有每天都使用的必要,有時候次數用多了反而起到反作用,正常情況下女性每周使用2-3次的精華液就可以了,也就是說隔一天塗抹一次,這樣能夠確保達到最佳的護膚效果。此外針對階段性療程的精華液產品需要按照流程或者說明書進行使用就可以了。

我們曉得精華液裡面含有的營養成分主要是維生素和蛋白質,如果大家每天都塗抹精華液的話就給細菌滋生提供了一個溫床,這樣就容易給肌膚造成過重的負擔,並且營養也無法被肌膚吸收,這樣大家的錢就會白花了,還會產生痤瘡、粉刺等一系列的問題,護膚的效果也就適得其反了。

每天使用精華液,人體皮膚會發生營養過剩的問題。影響正常的新陳代謝,皮膚呼吸受到阻礙,經常出現痘痘或者脂肪粒。人體的皮膚角質層也會逐漸變薄,發生紅血絲現象,嚴重的會有可能適得其反,皮膚會越來越乾燥,缺乏水分。

每天使用精華濕敷,皮膚會變得更加敏感,角質層變薄,不利於皮膚充分吸收養分。對皮膚造成傷害,精華液的水分子比較小時,會引起皮膚乾燥,不能起到及時補水的作用。所以每天濕敷精華液不僅不會有太大功效,還會適得其反。

了解每天使用精華液的危害後,我們需要改變使用方法。每周使用2-3次精華液濕敷即可,美白精華液可以在晚上使用,效果最佳。精華液也不可以每天濕敷,會刺激皮膚,影響皮膚健康。

精華液早上使用步驟:

女性如果是在早上使用精華液的話首先需要在面部塗抹爽膚水,然後對自己眼部周圍的皮膚進行護理,再來使用精華液,最後再塗抹面霜、防曬霜之類的護膚產品,一定要按照順序來進行使用。

精華液晚上使用步驟:

如果是在晚上使用精華液的話首先需要把面部的妝容卸掉,然後使用爽膚水對皮膚補水,或者家裡有面膜的敷一下,再進行眼部護理,最後使用精華液,之後就是塗抹晚霜保濕鎖住水分。

精華液可以天天使用嗎?從上面文章的介紹我們曉得了精華液是沒有必要每天使用的,建議女性朋友可以每隔一天使用一次精華液,這樣最終可以達到十分不錯的護膚效果,女性擁有白皙粉嫩的肌膚後整個人看起來也會年輕很多。

膠原蛋白精華液怎麼使用2

精華液可以天天使用嗎:Yes or No?

首先要澄清的一點是,精華液是可以天天使用的。許多小仙女覺得精華液濃度高、效力強,天天使用會對皮膚造成負擔,其實這種擔心是多餘的。如果說天天使用精華液有什麼壞處的話,那應該就是燒錢太快了吧!如果荷包允許的話,每天堅持使用精華液不僅可以改善膚質,還可以解決一些頑固的`皮膚問題,何樂而不為呢?

當然,能夠天天使用的精華液一定不能刺激性太強,在品牌上也要經得起考驗,如果是Marti derm,就是天天使用都不會有負擔的。

精華液可以天天使用嗎:精華液的正確使用順序

解決了精華液可以天天使用嗎的問題,我們再以前面所提的精華為例來看看精華液的正確使用順序。有些小仙女喜歡把精華液放在護膚的最後一步,在所有護膚品都塗完之後才用精華液。

其實這樣是無法讓精華液的作用得到最大發揮的。正確的精華液使用順序應該是在潔面後,其他護膚品前。還可以搭配其他安瓶精華一起使用,不僅可以修復肌膚,還可以促進接下來其他護膚品的吸收,起到1+1>2的效果。

精華液可以天天使用嗎:注意事項

精華液可以天天使用嗎?相信你已經有了肯定的答案。最後再補充一點精華液使用上的注意事項吧!

1、不同精華液的功效有所區別,有抗衰老、美白、祛痘等等,選擇最適合自己肌膚的才是最好的。

2、精華液是高濃度的營養物質,敏感肌的寶寶還需先在手腕或耳後進行測試,確定沒有過敏反應後再上臉。

3、出門前精華配合防曬使用可有效抗光老化,夏天就要到了,各位寶寶的防曬工作可要做好哦!

4、護膚是一場攻堅戰,精華液還需要天天使用,堅持護膚才能看到成效

以上是精華液可以天天用嗎這一問題的解答,希望可以給大家一些幫助。

膠原蛋白精華液怎麼使用3

精華液對皮膚好嗎

精華液對肌膚可以起到美白、保濕、去皺、抗衰老、修護等作用。精華液是功效型的護膚品,配方師在設計精華液配方時會添加許多功效型的原料且含量還不低,因此精華液的價格也比較昂貴。精華液是化妝品並非是葯品,不能達到像葯品那樣見效快,想要肌膚變好,除了要天天使用精華液還要做好基礎的補水保濕工作,還要注意作息、飲食等多方面。

精華液對皮膚能夠起到美白補水的效果,並且還有抗氧化的作用,同時還有修復抗衰老的`功效。

精華液中含有豐富的膠原蛋白和微量元素等多種營養成分,而且精華液中的小分子特別容易吸收,能夠補充面部所需的水分。

如果患者出現皮膚粗糙的情況下,適當的使用精華液,能夠起到改善皮膚的作用,而且長期使用會使皮膚更加滋潤有彈性。

精華液的作用和功效

1、保濕

精華液作為濃縮型的護膚品,有著更優越的保濕效果,同時精華液里提取了大量的植物和果酸等營養元素,加上它的分子比普通護膚品更小,更容易被皮膚所吸收。

2、維穩

膚色暗黃和痘痘、黑頭已經成為很多女孩子的苦惱,而護膚品則可以對外部皮膚起到很好的恢復作用,其中精華液對維穩肌膚就有著比較卓越的功效。一款質感上成的精華液,不僅可以為皮膚提供充足的水分,還能抑制痘痘和黑頭的生長速度,長期堅持使用皮膚會更加穩定。

3、抗皺抗老

實際上精華液不僅比普通水乳的保濕效果更加卓越,它還有軟化角質層、維穩肌膚以及抗老、抗皺的作用。而且一般精華液的質地都是偏黏稠的,塗在臉上卻很好吸收,延展性也很好,只需要一點就可以塗滿全臉。最重要的是,選擇一款質量有保障的精華可以加快細胞的再生能力,起到一定延緩肌膚衰老的作用。

Ⅳ 2010年膠原蛋白水粉分離有哪些

鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法。其中鹽析法、離心法和電泳法最為常用。由於單一方法難以完遲汪全分離純化膠原蛋白,實際操作都是通過復合法來達到分碼扮仔離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般採用高濃度NaCl;離心法常選用制備型低溫超速離心機;電泳法多採用十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),該法既可用於膠原蛋白的分離純化,還可用來測定膠原蛋白分子的缺枝相對分子質量。

Ⅵ 請選擇適宜的原材料,針對膠原蛋白設計一套完整的提取純化工藝

膠原蛋白的提取方法;膠原蛋白的提取與純化的目標是盡量使膠原提取的產率、純度更高,並且使所提取的膠原能滿足不同領域的要求。
迄今為止,膠原的提取方法主要有以下4種:酸法、鹼法、鹽法、酶法。
在實際提取過程中,不同提取方法之間往往相互結合,以取得較好的提取效果。
1.酸法提取 酸法提取主要採用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫鹼,而引起纖維膨脹、溶解。
作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,
用酸法提取的膠原最大程度地保持了其三股螺旋結構。
此法處理快速,所得產品的分子量是連續的,適用於醫用生物材料。
2.鹼法提取; 鹼法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。
如Holzer等採用1%~1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。
由於它容易造成肽鍵水解,因此得到的水解產物分子量比較低。所以,若想保留膠原的三股螺旋結構,此法不可取。
3.鹽法提取; 鹽法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下,當鹽的濃度達到一定量時,膠原溶解。
並且可採用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理,可以沉澱出不同類型的膠原蛋白。

Ⅶ 誰知道膠原蛋白怎麼使用啊,怎麼使用最佳

東櫻美紀膠原蛋白肽 前期(大概2兩個月吧)早晚各一杯,之後晚上喝一杯就可以,而且還能做成糊狀當面膜 效果也很好!

Ⅷ 請教:蛋白質酶解後為什麼要鹽析

酶分為內切酶和外切酶,內切酶作用於專門的氨基握搜酸位點基辯,鹽析的目的是將沒有酶解的蛋白質或者較大的肽搏皮缺鏈沉澱去除。

Ⅸ 膠原蛋白的提取分離

由於膠原是細胞外間質成分,在體內以不溶性大分子結構存在,並與蛋白多糖、糖蛋白等結合在一起,因此膠原的制備包括材料的選擇、預處理、酸鹼酶鹽水法提取、不同類型膠原的分離和純化。 除膠原蛋白外,動物骨中還含有油脂、多種礦物質和其他雜質,因此在被用於提取膠原蛋白之前必須進行預處理。先剔除動物骨上殘留的肉質和肌腱等雜物,粉碎後用正丁醇或正己烷萃取出骨油。最後除去骨中無機物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質量的1.0moL/LHCL脫鈣處理2d,用正乙烷脫脂後再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值1.7,37℃條件下處理120min,然後在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達18%;還有人用EDTA溶液(pH7.4)浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。
膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預處理結合低溫或熱水抽提的化學方法,根據溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、鹼法、鹽法;三是用酶的生物化學法。一般來說,高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對膠原的提取,但其基本原理都是根據膠原蛋白的特性改變蛋白質所在的外界環境,把膠原蛋白從其他蛋白質中分離出來。
在實際提取過程中,不同提取方法之間往往相互結合,可以得到較好的提取效果。採用超高壓處理系統對原料給予高壓處理一段時間,使其組織結構和膠原蛋白的三股螺旋結構發生鬆弛、變性,便於分離提取。 酸法提取是利用一定濃度的酸溶液在一定的條件下提取膠原蛋白,主要採用低離子濃度酸性條件破壞分子間鹽鍵和希夫鹼,而引起纖維膨脹、溶解,採用酸法提取的膠原蛋白通常成為酸溶性膠原蛋白。酸溶解法可將沒有交聯的膠原分子溶解出來,也可溶解含有醛胺類交聯鍵的膠原纖維,然後釋放到溶劑中。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用低溫酸法提取的膠原最大程度的保持了其三螺旋結構,適用於醫用生物材料及原料的制備。通常的做法是將適當濃度的酸液按一定料液比加入到經過預處理的骨粉中,於0~25℃攪拌提取一定時間。在採用酸法進行膠原蛋白的提取時,注意提取溫度不宜過高,以免膠原蛋白的生物活性發生破壞。取樣經前處理後,勻漿在低溫下用酸浸提,離心即可得酸溶性膠原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、蘋果酸、檸檬酸等,但大多數研究集中於乙酸抽提,像Maria Sadowska等用0.5mol/L檸檬酸在室溫下提取骨膠原蛋白,其提取率略低於乙酸提取。檸檬酸因不產生顏色和異味得以廣泛使用於食品工業的膠原蛋白的提取。
酸法處理時,反應強烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時,根據酸濃度、水解溫度、水解時間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞,且設備腐蝕嚴重。因此,酸法溶出生物醫用膠原要准確控制酸度、溫度、時間等影響因素。由於各種不足,酸法很少單獨使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸(pH8.6)和胃蛋白酶協同下提取膠原蛋白。在處理後的豬皮中加0.05moL/L含有胃蛋白酶的檸檬酸溶液(pH2.5-3)處理一段時間,然後再用NaCL鹽析,最後提取率為12.35%,提取物保持了完整三股螺旋結構的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在0.5moL/L醋酸條件下經胃蛋白酶多次消化,在4℃,20000r條件下離心20min,最後應用DEAE-Sephadex A-50進行離子交換層析,之後透析,再用NaCL鹽析,最後得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。 鹼法提取即利用一定濃度的鹼在一定的外界條件下提取膠原蛋白,鹼處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等,用氫氧化鈉浸提時效果較好。一般的是把樣品勻漿後,用鹼溶液多次溶脹後,再離心提取。但由於易引起蛋白質變性,如膠原肽鍵水解,含羥基、疏基的氨基酸全部被破壞;所得產物等電點pH值較低,天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉變為天冬氨酸和谷氨酸,得到的水解產物分子量較在酸性溶液中比低等問題,若比較嚴重的話,還會產生 D、L-型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高過L 型氨基酸,則會抑制L-型氨基酸的吸收,有些D型氨基酸有毒,甚至有致癌、致畸和致突變的作用。而且鹼法提取的含量較低,用氫氧化鈉從魷魚皮中提取鹼溶性膠原蛋白,其得率只有3%(以濕基計)。所以,若想提取結構完整、使用安全的膠原蛋白,很少採用此方法。有關單獨採用鹼法提取膠原蛋白的報道不多,一般是鹼法提取和酸法提法結合使用。比如在4℃條件下,魚骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d,最後得到無色無味的膠原蛋白,提取率為11.87%。
注意,無論酸法或鹼法,均可有效地提取膠原蛋白,有人分別採用醋酸- 鹽酸的混合酸液(pH3.0)和NaOH溶液(pH12.0)提取骨膠原蛋白,提取率基本相當。但是,這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性,而且提取後產生的酸性或鹼性廢液必須進行適當處理,以避免對環境造成污染。 酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取後,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如鹼性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,以鹼性蛋白酶應用最多。
將膠原進行限制性降解,即將末端肽切割下來,由於膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下後,含三螺旋結構的主體部分可溶於稀有機酸而被提取出來。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結構,保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中,大多數採用酶復合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機酸多為乙酸。
酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法。多酶水解法又分為混合酶水解法(比如牛胰蛋白酶,鏈黴菌蛋白酶,芽孢桿菌蛋白酶混合)和分步酶水解法,酶法提取皮膠原具體實驗工藝及條件的選取通常應考慮要開發的產品對分子量的要求,要得到分子量較小的膠原多肽一般採用多酶水解法。影響酶解效果的因素主要有:酶的種類、加酶量、酶解溫度、酶解時間、pH值及料水比。採用酶法提取骨料中的膠原蛋白,既能有效縮短提取時間,又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白,而且對環境的污染也較小。膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解,但能被動物膠原酶斷裂,斷裂的碎片自動變性後可被普通蛋白酶水解。胃蛋白酶水解膠原蛋白的適宜條件為pH 1.65~1.70、溫度37℃。
有人以豬骨為原料,用蛋白酶的酶解反應代替傳統制膠工藝,對骨膠原的酶解反應與酶法制膠工藝進行了試驗研究。結果表明:以胃蛋白酶對骨膠原的提取率最高(46.14%),其次是胰蛋白酶(43.42%),接下來是中性蛋白酶(30.14%),最後是鹼性蛋白酶(21.15%)。並且通過單因素和正交試驗對胃蛋白酶酶解反應中各主要影響因素進行了優化。試驗結果表明,胃蛋白酶提取的最優條件是,胃蛋白酶的濃度是1%,在pH2.0的條件下酶解48h,然後在濃度為10%(w/v)的NaCL溶液中鹽析24h,最後骨膠原的回收率為64.77%,骨膠原的提取率為49.75%。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,分別在水解0、2、6、10、14、18、22、26h時對四種不同胃蛋白酶用量(分別為1%、2%、2.5%、3%)的試樣取樣檢測,採用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程,最後得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時間提取率最大。還有人用以新鮮豬皮為原料,在50-52℃的條件下用胰酶進行水解,在酶用量為 5000:1~10000:1,pH值為9,反應2-3h,原料:水為1:2的條件下酶解。結果表明:總蛋白質的提取率≥80%。
採用酶法提取膠原蛋白時,必須嚴格控制提取條件。首先,酶作用時間必須適當。如果時間過短,膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中,影響提取率;如果酶作用時間過長,膠原蛋白會水解過度,產生過多的苦味小分子低聚肽,不僅會增加分離純化的難度,也會影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。其次,酶解溫度要適宜。溫度過低,酶的作用效果不明顯;溫度過高會引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據報道,當介質pH略低於中性時,膠原蛋白的變性溫度為40~41℃,當介質pH為酸性時,膠原蛋白的變性溫度為38~39℃,而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7~12℃。所以,如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性,在提取過程中應使提取溫度低於變性溫度。第三,需選用適當的酶。一般從陸生哺乳動物組織中提取膠原蛋白時,採用胃蛋白酶在其最適作用溫度下進行提取是合理的,但對於魚類等水生動物,由於其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動物低,因此許多蛋白酶便不適用,如果在這些酶的最適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。採用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動物皮及其加工副產物中,應用酶法從動物骨中提取膠原蛋白及其多肽報道較少。 指使膠原分子內部和分子間通過共價健結合提高膠原纖維的張力和穩定性的方法。該法又分為物理方法、化學方法和低溫等離子體法,生物學方法;其中物理方法、化學方法是最常用的交聯改性方法,生物學方法改性膠原蛋白主要在研究有關動物老化的生命現象中涉及,在研製膠原基生物醫學材料中少見報道。
物理方法
通過物理手段對膠原蛋白改性有紫外線照射、重度脫水、λ射線照射和熱交聯等方法。膠原溶液如被紫外線等照射,將在分子間產生交聯,粘度增加,生成凝膠。常用的紫外線交聯膠原膜的方法是將膠原膜放在鋁箔上,距離254 nm紫外燈20 cm高度,照射1~5 h。對紫外線照射的膠原膜進行力學性能和膠原酶試驗表明:交聯膠原膜的萎縮溫度Ts和抗膠原酶解的能力均顯著高於未交聯膠原膜。
重度脫水也是膠原蛋白物理改性中常使用的方法,該法是通過脫水導致膠原分子間交聯,從而增加變性溫度,改善膠原的性能。改性後膠原膜生物相容性提高,降低了水溶性,影響了膜與成骨細胞的生物相容性。物理方法改性原蛋白的優點是可避免外源性有毒化學物質進入膠原內,缺點是膠原膜交聯度低,且難以獲得均勻一致的交聯。
化學方法
化學方法比物理方法改性交聯度高,且能獲得均勻一致的交聯,對調節、控制膠原的各性質均有效。已廣泛應用於各種化學試劑交聯膠原,以提高其交聯度、力學性能及生物相容性。化學改性法具體又可分為使用化學試劑交聯、側鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。
化學試劑交聯法中常用的化學交聯劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等,其中戊二醛是應用最廣泛的試劑,大量實驗證明:戊二醛能提供有效交聯,但有細胞毒性,且其用量難以控制。另外,隨著交聯度的增加,吸水能力和膨脹度卻會降低。醯基疊氮化物、聚環氧化物或京尼平交聯等,不會引入明顯的毒性,且可獲得理想的交聯效果。所見報道中,多使用單一交聯劑對膠原蛋白交聯改性,但也有使用混合交聯劑的,如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題,篩選出環氧丙烷化學改性戊二醛處理生物瓣的方法,可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動物實驗表明,經改性後的瓣膜組織能保持較好的組織穩定性和機械抗張強度、免疫原性測試為陰性,符合臨床應用。
側鏈修飾就是對膠原分子側鏈的氨基和羧基進行化學修飾,改善電荷分布,使膠原獲得新的特性,例如將膠原氨基丁二醯化,可變成負電荷豐富的膠原。與未修飾膠原蛋白相比血小板粘附能,血纖維蛋白形成能都弱,有抗栓性;然而如將膠原羧基甲基化獲得的正電荷豐富的膠原,生理條件下血小板粘附能、活化能都高。與交聯改性相比,在生物材料領域,利用側鏈修飾對膠原改性所做的工作還較少。
化學方法雖然可獲得均勻一致的交聯,但存在著引入外源有毒試劑,殘留試劑難清除等缺點。一些報道表明,低溫等離子體技術改性膠原或膠原復合膜可使材料表面引入不同基團,改變材料表面化學組分和結構,從而改變材料的特性,如使之更具有細胞識別位,提高表面能,改善表面極性等。 膠原單獨使用,物理機械性能差(這幾乎是天然材料共有的弱點),性能單一,且因有親水性強,在體內易被膠原酶降解等不可避免的弱點限制了它的應用。但如將膠原與其它物理、化學性質不同的合成或天然高分子共混,組成一種多相固體材料,在性能上膠原與其它高分子互相補充,膠原基「復合材料」的概念由此產生。
已見報道的與膠原共混的合成高分子有不可生物降解的聚甲基烯酸酯及丁烯酸酯、聚氨酯、聚醯胺和可生物降解的聚乙烯醇、聚乳酸、聚谷氨酸、聚乙醇酸等,20世紀80~90年代初最有代表性的是聚甲基丙烯酸羥乙酯(PHEMA)和聚乙烯醇與膠原共混,其報道集中於復合方法、復合機理、理化及生物學性能、材料表面和整體結構、表面修飾的方法和機理以及水凝膠的溶脹擴散等,尤其是水凝膠制備、作軟組織替代、葯物緩釋等。後來利用可生物降解的聚乳酸、聚乙醇酸、聚酸酐、聚谷氨酸、聚亞乙基四乙酸等與膠原共混改性制備可吸收外科縫線、組織工程支架材料(如組織引導再生材料)的相關研究相對增多。不過合成高分子與膠原蛋白共混復合一些問題,如尼龍等不降解高分子材料不能進行生理代謝,與膠原蛋白復合後只能用做皮膚的外層敷料不能永久代替皮膚,而聚谷氨酸等可生物降解材料,如果相對分子質量小則強度不夠,相對分子質量大難溶於水,溶解時還出現降解,影響材料的機械強度。
天然高分子材料中最具代表性的是天然蛋白質和天然多糖,多糖主要有軟骨素、HA(透明質酸)、殼聚糖、肝素等,多糖復合材料比較集中於可吸收性外科縫線、葯物釋放的載體、皮膚替代物、透析膜、止血劑、醫用引導組織再生材料、骨替代材料、組織培養系統的支架。

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