⑴ 養小白鼠一個人最多能提取多少血清
0.3-0.6毫升左右禪粗。
血清攜吵為身體提供營養物質、保護細胞以及促進細胞代謝，血辯襲侍清可為身體提供氨基酸、維生素以及脂類物質等細胞生長所必須的物質，血清還能保護細胞，使細胞貼壁避免受到機械損傷，血清中還存在抗蛋白酶成分，可與蛋白酶發生中和，小白鼠用途廣范，市場需求高，小白鼠養殖成長快，易繁殖，所以最適合用於提取血清。
⑵ 如何高效補充膠原蛋白肽
一個成年人的身體內約有3公斤膠原蛋白，主要存在於人體皮膚、骨骼、眼睛、牙齒、肌腱、內臟（包括心、胃、腸、血管）等部位，其功能是維持皮膚和組織器官的形態和結構，也是修復各損傷組織的重要原料物質。
皮膚中的膠原蛋白佔了身體總量的40%。真皮中含有大量膠原蛋白纖維，膠原蛋白的外號就是青春蛋白。
人體很神奇，為我們裝進了那麼多好東西，但歲月不饒人，很多東西歲月想帶走都不跟你打聲招呼。比如：膠原蛋白。
隨著年齡增長和外源性因素傷害，膠原蛋白會被降解，皺紋就會逐步形成。
20歲膠原蛋白開始老化流失；
25歲膠原蛋白流失到了高峰期；
35歲開始了斷崖式的流失；
45歲以後，身體里的膠原蛋白基本少得可憐了……
每一個數字都很扎心，特別是對於很注重面子的美女們，當我們了解了它流失的節點，重要的就是要提前做好准備，所以，你知道什麼時候開始要抗衰了么？
當然，膠原蛋白的流失除了年齡，還有很多因素：比如身體的氧化、透支、環境傷害，以及生寶寶等等，可以說是雪上加霜啊，膠原蛋白就是這樣悄悄地離開我們，直到有一天我們發現自己有了皺紋、有了法令紋、眼角也開始下垂，才意識到這是個大問題。
所以要改善衰老皮膚，必不可少的就是促進膠原蛋白合成，以及減少自由基的破壞。
常見的補充膠原蛋白4種方式：
1、食補：如豬蹄、蹄筋、雞腳、雞翅、魚皮等含膠原蛋白，每天用10隻豬蹄可補充皮膚所需膠原蛋白，但脂肪和熱量又嚴重超標了；
2、護膚品：不同產品效果不一，部分高檔護膚品含少量膠原蛋白，對皮膚有一定作用，但不能轉換為自身的膠原蛋白；
3、注射：效果立竿見影，但價格昂貴，效果維持半年到兩年，而且有一定風險；
4、專業營養品（膠原蛋白肽）：分子小，吸收效果好且持久，服用方法簡單有效，是目前亞洲女性最喜愛的美容方法。
如果有下面圖片所顯示的這些狀況，那說明：
補充膠原蛋白究竟是不是智商稅？
來自不同國家地區、跨越了十多年的大量人體試驗表明，口服膠原蛋白能夠改善皮膚！能夠促進真皮膠原蛋白合成，提升透明質酸（玻尿酸）含量，減少膠原蛋白分解……總之就是能改善皺紋和光老化、提升皮膚彈性和增加皮膚水分。
實驗表明，食物中的膠原蛋白或膠原蛋白水解後的肽吸收進入血液，就會沉積在皮膚、跟腱等膠原蛋白含量豐富的部位。（這個研究是通過同位素示蹤完成——就是在肽進入人體前是給它標記一個物質，這樣肽進入體內吸收後，跑到哪裡都能被檢測到）
吃進去的膠原蛋白肽，可以促進成纖維細胞合成膠原蛋白和透明質酸，有利於改善真皮狀況，能啟動相關的基因，並且能抗氧化和啟動細胞信號。
非常多的試驗證據，例如其中一個是給小鼠照射紫外線，造成光損傷，再餵食膠原蛋白肽，小鼠的皮膚能明顯好轉、皺紋減輕。
20歲後，你流失的是膠原蛋白，要補的是膠原蛋白肽！
膠原蛋白肽是膠原蛋白的水解產物，是膠原蛋白的最小單元，無需分解即可被人體吸收和利用，低於5000Da（單位：道爾頓）均屬於膠原蛋白肽。分子量以1000-3000道爾頓為宜（分子過低，膠原蛋白的合成率低；分子過高，吸收率低，味道也較腥）
目前一窩蜂出現的膠原蛋白食品、飲料及保養品，大多標榜膠原蛋白的總量多少克，這是一種誤導，再大量的膠原蛋白，如果不能有效吸收也是沒用的，所以低溫萃取、被 蛋白酶 利用，成為被人體吸收的膠原蛋白肽產品，才是真正能給你帶來肌膚改變的產品。當你選擇口服膠原產品時，一定要記住這個衡量標准。每天的補充量在2.5-10克之間。搭配富含維C的植物提取物或維C，效果更好。
三大特點區別於同類產品：
1）1+5最優配方：膠原蛋白肽+5大植物抗氧化軍團
1：每袋足足含有3克高濃度的全球精選的進口深海魚皮膠原蛋白肽，來自具有26年研發生產經驗的專業機構，擁有全球11大認證。
5：由5大植物精華組成的抗氧化軍團：蔓越莓、接骨木莓、針葉櫻桃、枸杞、綠茶。效果加成。
2） 臨床認證 ：擁有臨床試驗和數據，最佳分子大小2000道爾頓，便於細胞識別，精準到達人體目標部位進行補充和積累，並形成長效和針對性的刺激作用，讓我們自身膠原蛋白被大量生成。經人體腸胃、血管、皮膚直接吸收，吸收效果高達大分子量的600倍。
3） 方便 ：不用沖泡，隨時隨地，開袋即飲
無憂 ：無防腐劑和脂肪，低糖低鈉
除了足量的進口膠原蛋白肽，還有五大植物抗氧化軍團（聯合抗衰抗氧化，阻止膠原蛋白流失， 不抗氧化補充膠原蛋白，很可能只是表面功夫 ）：
蔓越莓 ：來自北美，富含維生素C、花青素與生物類黃酮等，可以養顏美容，保護女性泌尿系統健康，幫助修復消化道粘膜組織，減緩心腦血管老化，幫助體內環保，酸酸甜甜的口感，適合長期食用。
接骨木莓 ：來自歐洲，富含多種生物活性物質，抵禦肌膚衰老痕跡，促進皮膚健康。
針葉櫻桃 ：來自巴西，富含維生素C，幫助凈白肌膚，促進膠原蛋白合成。
枸杞 ：漢方傳統植物成分，幫助肌膚抗氧化，維持良好的肌膚狀態。
綠茶 ：富含綠茶多酚活性物質，抵抗氧化。
來看看兩大臨床試驗：
一、這是8周後對皺紋的改善，皺紋明顯減少32%，原膠原濃度明顯增加65%，這種充盈和飽滿就像很多彈力網把我們的皮膚重新撐開，這是來自於膠原蛋白進入體內以後努力的生長，所以在外在我們看到了明顯的改變。
二、關於指甲，這也是我們在表面能看到的，食用6個月後，受試者明顯感覺改善了指甲開裂、邊緣不規則和粗糙的狀態。75%的受試女性感覺到指甲變長，71%感覺指甲長的比原來快，而且能長更長。
外表看到的只是冰山一角，請相信身體里的更多改變。
所以，再次證明，優質的膠原蛋白肽產品，是可以讓我們得到理想的變化，這就是為什麼很多人那麼多年一直孜孜不倦地尋找好的膠原蛋白產品。
這樣喝，事半功倍！
早晨8：00：空腹一袋，補充一天所需
睡前22：00：美美來一袋，夜間修復
用量：每天1-2袋，視個人經濟能力及對美和健康的投資意願。
膠原蛋白的常見問題：
1、選擇膠原蛋白的5個標准：
原料：深海魚膠原提取最佳
含量：膠原蛋白肽2.5克以上
分子量：1000-3000道爾頓最佳（不是越小越好，得綜合衡量）
配方：復方的植物提取精華，或維C
是否有權威第三方認證
2、氨基酸、肽與蛋白質的關系
答：2個以上氨基酸組成寡肽（低聚肽），10個以上氨基酸組成多肽，蛋白質通常由50個以上氨基酸組成。就好比單個珍珠、兩個以上的珍珠和珍珠項鏈的關系。
由小到大的排列：氨基酸➡膠原蛋白肽➡膠原蛋白➡蛋白質
一定分子大小的膠原蛋白肽（1000-3000道爾頓），最容易被人體吸收合成膠原蛋白。膠原蛋白分子太大，直接補充，吸收率低。
3、膠原蛋白僅存在於動物中！
銀耳、桃膠等植物不能補充膠原蛋白。
4、目前發現，以深海魚皮為原料製成的膠原蛋白肽最好。
5、蛋白粉與維C能幫助身體合成膠原蛋白，屬於間接補充； 膠原蛋白肽是直接補充，更高效。
兩者對皮膚都好，對全身的骨骼、血管、結締組織和跟腱組織都有保護和修復的作用。
6、膠原蛋白是安全的，屬於食品原料，不存在激素問題。
7、不建議少年兒童補充膠原蛋白，不是不能，而是少年兒童正是膠原蛋白滿滿的時候，沒有必要浪費。
8、膠原蛋白肽不僅僅是女士的專利，男士同樣也有年輕凍齡和健康的需求。
⑶ 一隻小鼠多少胰島細胞
小鼠胰島細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、澱粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂耐激肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血睜帆糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌生長抑素，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。
胰島細胞作為糖尿病新葯的細胞篩選模型需保持其結構完整、生理功能穩定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質量的1%-2%，每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規治療產生的嚴重低血糖症狀，具有創傷小及並發症少等優點，是最有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結果鑒定等步驟，分離純化效果取決於原料及操作方法的選擇。
本公司生產的小鼠胰島細胞採用膠原酶灌注消化法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經昌早襪DTZ染色鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
⑷ 【楓楓老師專欄】口服膠原蛋白對皮膚的作用綜述——請認真閱
口服膠原蛋白或膠原蛋白水解產物是否有助於提升皮膚中膠原蛋白的含量、進而改善皮膚的水分、彈性等一直頗受爭議。本文綜述了近年來國內外關於膠原蛋白（尤其是口服膠原蛋白）對皮膚的效果研究，結果表明口服膠原蛋白及其水解產物，可以部分為肽的方式被快速吸收，靶向性被皮膚利用，顯著提升皮膚中膠原蛋白的含量、抑制皮膚膠原蛋白降解、減少皮膚損傷，並改善皮膚的含水量等指標，是一種有效的皮膚改善營養品。
正文：
膠原蛋白廣泛分布於人體骨骼、皮膚、血管、韌帶、軟骨等組織器官中，是結締組織主要的結構蛋白，占動物總蛋白的25%~30%。迄今為止，共發現了20餘種膠原蛋白，其中Ⅰ型膠原蛋白含量最高，約為90%。在皮膚中膠原蛋白分布於真皮層，含量約為70%，主要為I( 85% )、III和Ⅴ型[1]。
膠原蛋白被普遍認為真皮的支撐結構組成，其網狀架構為皮膚提供了保護和彈性，在纖維之間則分布著大量的水分、細胞外基質和功能性細胞，是皮膚重要的生化反應場所，為表皮層提供水分和營養[2]。
真皮層膠原蛋白可被多種因素破壞：基質金屬蛋白酶(MMP)可使其降解，自由基可使之變性，日光中的紫外線能夠讓膠原蛋白變性[3]，美拉德反應則可以讓糖類和膠原蛋白反應形成糖基化產物[4]，發黃，並且失去彈性。在衰老皮膚中的膠原蛋白纖維明顯比年輕的皮膚中纖維，而且紋路紊亂（降解後失去正常紋理）。真皮中膠原蛋白的含量隨著年齡下降，在40歲以上和更年期婦女腹部皮膚中顯著下降[5]。
真皮的膠原蛋白合成不足，或者被破壞過多，將會使皮膚彈性減弱，引發皺紋、缺水、光澤黯淡等多種衰老症狀，因此保護和補充真皮中的膠原蛋白對於美容護膚有重要意義。補充維生素C等抗氧化劑、減少糖類食品的攝入、抑制MMP活性、避免紫外線，都有助於保護皮膚中的膠原蛋白免受損失，或者促進膠原蛋白的合成。
在中國傳統上有食用驢皮（阿膠）、豬蹄、雞爪美容抗皺的說法，這些食物的主要成分是膠原蛋白。同時市場上近年來流行服用膠原蛋白水解產物（CH）為主要功效成分製成的美容口服液或膠原蛋白粉。銷售者相信其有提升皮膚膠原蛋白含量，並提升皮膚彈性、使皮膚變得更年輕、緊致的功效。但這一說法受到一些營養學家的駁斥，認為雖然膠原蛋白對皮膚有非常重要的意義，但這種傳統上「吃什麼補什麼」的說法屬於無稽之談，沒有可靠的研究證據證明口服膠原蛋白及其水解產物具有改善皮膚的功效，即使服用者認為有效，也多半是心理作用而已。反對的主要原因主要有：
口服的膠原蛋白並不一定能被人體吸收；
即使被消化，膠原蛋白也是被先分解成游離氨基酸再吸收，這與攝取其它食物中的氨基酸並無區別，並不能說明膠原蛋白比起其它蛋白質來源有什麼優點；
即使膠原蛋白被消化後再吸收，也不能保證能夠到達皮膚；
即使到達皮膚，也不能保證一定參與皮膚中膠原蛋白的合成。
本文綜述了國內外近年來關於膠原蛋白的研究成果，就上述核心問題進行討論。
1. 膠原蛋白的消化、吸收（吃了能被吸收嗎？）
膠原蛋白是一種易於吸收的膠原蛋白，而且相當一部分是以多肽形式直接吸收入血的。冷向軍等(2005）,Steffen Oesser(1999)等研究表明膠原蛋白吸收率超過95%，甚至可達100%，其中相當一部分蛋白質大分子可被腸直接吸收[6-8]，Mari Watanabe-Kamiyama, Muneshige Shimizu, Shin Kamiyama等(2010)通過14C標記，證明Winstar小鼠在攝入CH後3小時內，血漿中的膠原蛋白水解產物濃度就達到峰值[11]，這些都表明膠原蛋白水解產物可以被良好地消化和吸收。
Koji Iwai, TakanoriHasegaw(2005)等研究了來自豬皮、雞爪和軟骨的膠原蛋白多肽在人體的吸收。口服後1-2小時，就能夠大量被吸收入血，而且證實其中有相當一部分（1/3或更多）是直接以肽的形式吸收的，而不是單純的游離氨基酸（FAA）[9]。Hiroki Ohara, HitoshiMatsumoto（2007）用魚鱗、魚皮、豬皮膠原蛋白進行了吸收研究，證實了前面的成果，並發現進入血液中最多的肽是Pro-Hyp結構，Mari Watanabe-Kamiyama等(2010)也發現小鼠攝取CH之後，其血漿中顯著出現了膠原蛋白特徵性的Gly-Pro-Hyp三肽序列[11]。
基於前人的研究與自己的試驗，Steffen Oesser(1999)認為：蛋白質分子必須先水解成游離氨基酸才能吸收入血（Boullin et al. 1973, Mathews andLaster 1965)的說法可能需要修正，其後有許多實驗已經證實蛋白質大分子可以被腸直接吸收，甚至保持其原有功能[8]。
2. 膠原蛋白吸收後的分布（能否到達皮膚？）
試驗證實：膠原蛋白及其水解產物被吸收後，可以到達皮膚並被皮肝利用。
Mari Watanabe-Kamiyama等利用放射性同位素14C示蹤研究了來自雞爪的I型膠原蛋白CH吸收後在小鼠身體的分布情況。口服後2~6小時，被標記的Gly-Pro-Hyp三肽分布至全身各主要器官。14天後，僅在皮膚中還保持著70%的放射水平。將小鼠皮膚進行水解並分析，證實其皮膚中的Gly-Pro-Hyp三肽就是來自雞爪的三肽[11]。
Oesser等人報道的大分子的膠原蛋白可以被直接吸收並且富集在腎、軟骨[8]，Mari Watanabe-Kamiyama等還發現，Gly-Pro-Hyp則特異性地沉澱在皮膚中。
上述試驗表明I型膠原蛋白水解產物在被吸收後雖然初開始分布於全身，但可以靶向性地分布於富含膠原蛋白的組織中（包括皮膚）並且被特異性地利用34.討論和展望. 口服膠原蛋白及CH對皮膚的作用
4.1 口服膠原蛋白及CH能夠特異性使皮膚中膠原蛋白含量提升的機理
如前所述，現有試驗證實口服膠原蛋白及CH/CP，有使皮膚中膠原蛋白含量提升，進而改善皮膚含水量、減少皮膚因UVB導致的損傷等多種好處。其機理可能是：為皮膚提供足夠多的合成膠原蛋白所需的氨基酸作為原料，並且有相當一部分是以活性小肽的方式被直接、高效地吸收和利用，同時膠原蛋白肽能夠抗氧化和抑制MMP2活性，從而保護皮膚中的膠原蛋白免於消耗、分解。
4.1.1 口服膠原蛋白及CH能夠高效補充皮膚合成膠原蛋白所需要的氨基酸
膠原蛋白的氨基酸組成比例非常特殊，其中的甘氨酸、脯氨酸-羥脯氨酸含量達50%左右，一般的蛋白質食物中能夠提供的這三種氨基酸數量遠遠不夠。假設成人每天合成10g膠原蛋白，需要脯氨酸/羥脯氨酸約2.5g，假定食物的吸收率為100%，以雞蛋提供的氨基酸為原料，則獲得足夠的脯氨酸/羥脯氨酸（脯氨酸在雞蛋中的含量為3.07%[34]），共需要943g，大約19個雞蛋。但若以膠原蛋白或CH供應這些氨基酸，只需10g就足夠了。這說明口服膠原蛋白是高效的。
的確，甘氨酸、脯氨酸在傳統上並不是人體必需氨基酸，可以通過其它氨基酸合成，但這引出兩個問題：
1）酪氨酸、半胱氨酸、與谷氨醯胺、精氨酸，可有還有甘氨酸、脯氨酸一起被稱為條件必需氨基酸，因為在特定的生理、病理條件下，它們的合成速度不能滿足細胞需要[21]。在人體衰老時，由於自由基、內源性衰老因素、糖基化、光老化、MMP活躍等諸多因素，合成減慢而損失增多，合成膠原蛋白所需要的條件必需氨基酸很可能供應不足，因而需要特別補充。
2）即使必需氨酸攝入充分，可以轉化成這些氨基酸，也必須獲得其它氮源，這是一個耗能過程。試驗證實，僅依靠必需氨基酸或高比例的必需氨基酸並不能使試驗動物生長良好。1965年，FAO和WHO的專家組提出：「膳食中非必需氨基酸的比例，因而還有膳食中全部必需氨基酸與總氮的克數比，對必需氨基酸的需要有明顯影響。」[21]
對機體來說，利用現有能夠直接利用的氨基酸、多肽是耗能最低、速度最快的途徑，這很可能是口服膠原蛋白對皮膚和其它富含膠原蛋白的結締組織有高效作用的重要機制之一。
4.1.2 口服膠原蛋白及CH有高效的吸收途徑與方式——多肽直接吸收
通常認為，蛋白質必須在小腸中被水解為游離氨基酸（FAA）才能夠被吸收並被機體利用。這是有人認為口服攝入膠原蛋白與其它種類的蛋白質沒有什麼區別的根本原因。
然而事實並非如此。前述文獻已經提到，來自於口服膠原蛋白和CH的肽結構在口服攝入2小時之後即在血漿中出現峰值，運輸到達皮膚時仍然保持著原有的序列結構。
張偉、廖益平指出：因囿於Dogman的蛋白質必須被消化成FAA才能被吸收的觀點，肽的研究一直處於停滯狀態。Bachwell(1995)發現在腸刷狀緣上有甘氨醯脯氨酸的寡肽轉運系統。Grimble等(1986)研究表明，人體水解肽的能力很大，大量的小肽可穿過腸屏障，以小肽形式進入血液循環，對動物的研究得出，小肽被完整吸收後可以二肽、三肽的形式進入血液循環。肽的吸收不僅比游離FAA迅速，而且還有吸收率高的優勢。In-fante(1992)和Boza(1995)證實，以寡肽形式為氮源時，整體蛋白質沉積高於相應AA日糧或完整蛋白質日糧。肽不僅是蛋白質代謝的底物，而且也是重要的生理活性調節物，它可以直接作為神經遞質、間接刺激腸道受體激素或酶的分泌而發揮生理作用[22]。
在畜禽氨基酸需要量的研究工作中也發現，基礎日糧選用的飼料來源不同，得到的氨基酸需要量結果有很大差異，原因是不同飼料中氨基酸利用率之間有差異(計成等，1984)。至於不同來源飼料的氨基酸利用率為什麼存在差異，研究人員一直把它作為一個黑箱理論進行迴避[23]。
研究已經證實，肽可以被直接吸收，有獨立的轉運機制，比FAA的吸收效率更高，應該能夠解釋這個黑箱理論，在口服膠原蛋白吸收上也是如此。
4.2.3 膠原蛋白肽可以被皮膚組織更高效地利用
傳統上認為蛋白質的合成是從tRNA轉運FAA至mRNA組裝開始的。在mRNA上，FAA按照遺傳密碼依次排列組裝形成肽鏈，之後再形成高級結構[36]。
Backwell(1994) 用同位素技術證實，組織本身有直接利用肽合成乳蛋白的能力。樂國偉等通過動物試驗也發現，肽可以被組織直接利用，比起FAA，效率更高[22]。
已知在經典蛋白質合成過程中，每組裝一個AA形成肽鍵，共需要消耗4個高能磷酸鍵[36]。但如果能夠直接利用多肽，即是一個節能並且更快速的過程。不同的蛋白質來源可以水解出不同的肽[22]，可以猜測口服膠原蛋白和CH可以提供更適合機體高效、節能地合成自身膠原蛋白的肽，從而比其它蛋白質來源、或FAA更有優勢（即：具有蛋白特異性[12]）。
4.4.4 CP提升皮膚膠原蛋白的其它作用機制（趨化性、信號傳導、抗氧化，以及對MMP的抑制）
研究發現口服膠原蛋白和CH/CP後可特異性作用於膠原蛋白豐富的組織中，而且不同氨基酸序列的肽富集的部位不同：Gly-Pro-Hyp序列主要被皮膚利用[8，11]。這可能與成纖維細胞和膠原蛋白肽之間的趨化性有關。
體外細胞培養試驗發現Pro-Hyp對成纖維細胞、外周血液嗜中性細胞、單核細胞具有趨化性[24,25]。Yasutaka Shigemura(2009)等的研究則重復證實了這一現象：Pro-Hyp可以顯著加速成纖維細胞從皮膚中遷移至培養板，他們認為，Pro-Hyp可能是一個在正常和病理情況下都很重要的生理學角色。它可能在Pro-Hyp信號通路中擔任信號肽角色，甚至被直接轉運入成纖維細胞成為直接信號[15]。
口服膠原蛋白及CH對於皮膚組織中的膠原蛋白正面作用，還可能來自於其抗氧化作用、抑制MMPs的作用，使體內膠原蛋白避免被分解、破壞。
劉高梅（2012）的研究表明小分子膠原多肽具有顯著的抗氧化作用[26]。
王潔昀(2009)發現高劑量骨膠原肽能顯著提高模型小鼠血液及皮膚中總抗氧化能力及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化物酶活力（CAT）活力(P<0.05)，顯著降低體內總自由基（ROS）水平及丙二醛（MDA）含量，效果略優於0.1%硫辛酸（LA）[27]。
MMPs活躍是導致膠原蛋白損失的主要原因之一。Vivian Zague的試驗顯示攝取CH顯著降低了MMP2及其酶原的活性(P<0.05)，該MMP主要負責分解的I正是真皮的主要膠原蛋白——I型膠原蛋白。[18]。
4.2未來展望
口服膠原蛋白和CH有良好的效果和安全性。這是它作為皮膚保養品最重要的基礎之一。
臨床研究顯示CH具有良好的耐受性[28-30]。在小鼠經口服或皮膚急性毒性試驗中未觀察到副作用或毒性反應[12,31]。研究其對不同菌株的沙門氏菌、埃希氏大腸桿菌（E. coli）、骨髓細胞的作用，未顯示出任何突變增加或者致癌性[32]。所有現有數據清晰顯示短期和長期口服CH都是安全的。
作為一種食品，FDA將CH列入GRAS（gernerally recognized as safe，普遍認為安全），屬最高安全級別[33]。德國聯邦葯物和醫學器械研究所、消費者事務部（Ministry for Consumer Affaires）、WHO也確認CH是安全的，大量或者食用一般數量均沒有安全風險。
余宙, 范青生（2010）對口服魚皮膠原蛋白對人體的一般安全性影響進行了觀察，顯示魚膠原蛋白對人體健康無明顯損害，心電圖、腹部B超、胸檢查等結果均在正常范圍內[19]。
膠原蛋白及CH的作用機制還未完全明了，對人的臨床研究還不普遍，在這方面顯然還有大量的工作需要開展。但現有研究已經清晰指明了方向和趨勢。
====2013年11月148日補充（以後會不定時根據最新研究進展補充證據，我不介意在有空時多販點文獻過來。我十分奇怪，研究不研究的，讀不讀文獻的，都在那裡發表意見，還一個比一個斬釘截鐵，不知哪來的底氣？難道就是高中教科書上那些過時了10年的知識么？）====
一項前瞻性、隨機、對照研究結果認為口服補充膠原蛋白肽可改善皮膚水分和彈性。試驗時間12周，24名女性和8名男性，年齡30~48歲，正常健康人群。用計算機隨機分組，每組8人[ 引用文獻 ：Choi S Y, Ko E J, Lee Y H, et al. Effects of collagen tripeptide supplement on skin properties: A prospective, randomized, controlled study[J]. Journal of Cosmetic and Laser Therapy, 2013 (0): 1-6.]。
3.1 口服膠原蛋白促進真皮膠原蛋白纖維合成、成纖維細胞（FB）增殖
Naoyamatsuda, Yoh-ichi Koyam等（2006）等研究了口服膠原蛋白對成纖維細胞和真皮細胞間質的作用。給豬餵食膠原蛋白多肽0.2g/kg共62天，試驗表明口服膠原蛋白可以提升成纖維細胞密度，並以特異性蛋白方式促進真皮膠原蛋白纖維的形成[12]。
Naoya matsuda, Yoh-ichiKoyam等還曾報告了喂給膠原蛋白水解產物提升兔子跟腱中膠原蛋白纖維直徑和密度的實驗。實驗均提示口服吸收的膠原蛋白可特異性地作用於膠原蛋白含量豐富的組織中的膠原蛋白纖維，例如跟腱、真皮[12]。
3.2 口服膠原蛋白對皮膚的作用
Sumida（2004）等通過試驗評估了日常攝取CH(10g)對皮膚的影響。試驗組為20位健康的日本女性，對照組為19人，服用安慰劑。在試驗的60天中，發現試驗組女性的皮膚吸水能力逐漸上升，不過相對於對照組，統計學差異不夠顯著。值得強調的是兩組都有服用400mg維生素C，因此膠原蛋白的合成效果可以考慮是維生素C帶來的[13]，但這是一個雙因子試驗，而且服用的Vc劑量很大，也並未否定膠原蛋白對皮膚的改善作用。
KoyamaYoichi等（2006）研究了日常攝食膠原蛋白多肽（CP）對人角質層含水能力的影響。試驗組中健康的日本女性每人每天飲用含有10g CP的100ml飲料持續60天。試驗組20位女性皮膚角質層吸水能力較對照組（服用安慰劑）高，未發現血檢異常。提示口服CP可以提升角質層含水量而不會導致血液異常[14]。
Yasutaka Shigemura(2009)等研究了來自膠原蛋白的Pro-Hyp寡肽對小鼠皮膚中成纖維細胞遷移和生長的作用。試驗結果提示Pro-Hyp可能刺激皮膚中成纖維細胞生長，並且增加從皮膚中遷移出的成纖維細胞數量[15]。
口服膠原蛋白可抑制UVB引起的皮膚損傷。Modori Tanaka等（2009）進行了為期6周的實驗，試驗組喂給小鼠餵食0.2g/kg/天的膠原蛋白多肽(CP)，發現：口服CP能顯著提升角質層含水量，防止角質層因UVB照射而增厚，並增加小鼠真皮層中I型膠原蛋白含量(比對照組高出近2.5倍)。這可能是由於膠原蛋白多肽具有抗氧化作用，同時也可能是因為具有其它活性[16]。
Hiroki Ohara等人(2010)以培養的人皮膚成纖維細胞為材料，研究了多種CP對皮膚細胞外基質成分和細胞增殖的影響，發現濃度為200nmol/mL的Pro-Hyp提升了成纖維細胞增殖(1.5倍)及透明質酸的合成(3.8倍)，作者認為CP可以刺激細胞有絲分裂和透明質酸合成[17]。
VivianZague等（2011）研究了日常攝取的膠原蛋白水解物（CH）對於皮膚細胞外基質蛋白的影響。試驗組小鼠皮膚中I型膠原蛋白增加了4倍(3.4±1.7)，投喂酪蛋白的對照組只有(0.8±0.5)。IV型膠原蛋白，試驗組是(6.7±1.1) ，為對照組的3倍(2.3±1.2)。作者認為CH在營養學上並不被高看(氨基酸不完全)，但能顯著促進I型膠原蛋白的合成。但對於人的皮膚作用，還需要臨床研究[18]。
余宙, 范青生等（2010）觀察了魚皮中提取的膠原蛋白對人體皮膚水分和一般安全性的影響，試驗認為口服魚膠原蛋白有顯著提升皮膚水分的作用[19]。
周雙琳，王海燕等（2011）觀察了小分子魚膠原蛋白粉對改善女性面部膚質的有效性和安全性。用問卷調查、Visia、皮膚水份測試儀等分析皮膚。問卷調查結果顯示：口服小分子魚膠原蛋白粉有改善睡眠及增強體力的作用，受試組健康評分較口服前有明顯改善（P＜0.05）。儀器測試顯示：受試組面部皮膚的細紋、毛孔、紋理 、紫質、水份、油脂改善明顯（P＜0.05）(試服者的自我感受與儀器測試結果趨勢一致)。受試前後志願者無明顯不良反應。結論認為口服小分子魚膠原蛋白粉可一定程度地改善女性面部膚質，且無明顯不良反應，具有較好的安全性和有效性[20]。
⑸ 小鼠肝臟組織單細胞解離
肝臟，是脊椎動物身體內以代謝功能為主的一個器官，並在身體裡面充分扮演著去氧化，儲存肝糖，分泌性蛋白質的合成等。肝臟是由肝細胞組成，肝細胞極小，肉眼看不到，必須通過顯微鏡才能看到。人肝約有25億個肝細胞，5000個肝細胞組成一個肝小葉，因此人肝的肝小葉總數約有50萬個。肝細胞為多角形，有6-8個面，不同的生理條件下大小有差異，如飢餓時肝細胞體積變大。每個肝睜卜細胞表面可分為竇狀隙面、肝細胞面和膽小管面三種。
肝臟的主要連接成分主要是結締組織，因此我們選擇使用胰蛋白酶對肝臟進行第一輪解離，枯草芽孢桿菌蛋白酶可水解天然和變性蛋白，並且在鹼性條件下具有活性。我們使用其對肝臟組織進行進一步解離。
為了保存小鼠肝臟完整的基因表達譜，聯川生物將成年小鼠肝臟置於冰上進行解離。小鼠肝臟第一層由0.25%胰蛋白酶在4℃下離解離10min，第二層解離由添加地衣芽孢桿菌酶，膠原酶及DNase I 組成的混合酶。解離產率為5000cells/mg，存活率大於等於93%（以AO/PI計數為標准）。
1.在預冷的組織保存液中保存及運輸組織，配製酶解離液，置於冰上待用，離心機調整至 4℃ 預冷；
2.將放有你1/2 體積 DPBS 的培養皿置於冰上，使用無菌的剪刀及鑷子剪切組織直至糊狀；
3.使用 DPBS 對剪切的組織進行過篩清洗；
4.離心管中每30 mg肝組織中加入1 mL 胰酶 ，通過搖晃離心管重新懸浮組織顆粒，在室溫下靜置10 min。
5.在離心管中加入5mL預冷的DPBS，稀釋胰蛋白酶混合液，終止消化。
6.在離心機中使用250g 4℃ 離心5min後，除去上清液；
7.在離心機中加入4mL預冷的DPBS重懸細胞核組織，在冰上沉澱40s 大組織塊沉降（此時釋放的細胞留在上清液中）。
8.將悉悔穗收集的上清液（含細胞）通過40µM細胞篩過濾，去除結團細胞及組織塊；
9.過濾後的細胞懸液通過4℃ 300g離心 5min 收集；後再使用0.5 mL的PBS （含1% BSA）重懸細胞，置於冰上保存。
10.將步驟 7 中剩餘的組織塊加入組織解離酶（5mg/mL，膠原酶 IV 0.8mg/ml，DNase I 0.5mg/ml），置於37℃ 的搖床上 80rpm/min進行解離；
11.消化 8-12min之後，加入兩倍體積前腔的 DPBS稀釋終止消化，取出離心管，渦旋儀上，輕微渦旋2-3次（2S/次）。
12.將終止消化後的酶及細胞混合物分別通過 70μm和40μm的細胞篩，下清液離心收集細胞。
13.在4°C下旋轉300 g 離心5 min，除去上清液，使用DPBS（含1% BSA）重懸細胞，置於冰上備用。
14.將步驟9 ，步驟12中的細胞4°C下旋轉300 g 離心5 min離心收集，棄上清；加入1-4mL紅細胞裂液，置於冰上3-5min裂紅。
15.裂紅結束後加入等體積的DPBS, 在4°C下, 300 g 離心5 min 收集細胞，棄除裂紅液；
16.使用0.5% BSA的DPBS重懸細胞，離心收集，棄上清，而後用含有0.5% BSA的DPBS重懸細胞，用AO/PI染料染色計數。
注意：肝臟組織中雜質及碎片較多，且肝細胞容易破裂；所以解離過程中要注意根據實際情況適當下調。富集細胞時的離心力，為達到徹底清洗碎片和雜質的目的，在解離過程中使用的解離酶濃度和強度不宜過高，獲取的單細胞懸液如果用於單細胞測序，則需要在獲取細胞懸液之後盡快進入下游建庫，避免因細胞破裂引入RNA 污染問題，從而影響測序數據質量。
以上內容來自生信技能樹和聯川生物，有小夥伴如果照著這個步驟做了方便的話留言反饋效果如何哈~（帶圖的最好）