㈠ 病理檢查免疫組化和特殊染色是怎麼回事
免疫組化和特殊染色的意義分別闡述如下:第一、免疫組化,主要是用於病理診斷預後判斷和治療效果的預測,能夠提高病理診斷水平,對臨床有指導意義。例如惡性黑色素瘤HMB45為陽性表達,可以幫助明確診斷。除此之外,還有用於疾病的病理診斷和分型、探討其發病機制,例如胃腸道間質瘤其C-kit基因突變可以用靶向葯物治療,效果較好。
第二、特殊染色是為了某種特殊的目的而進行的一種染色,例如結締組織多色染色法、膠原纖維染色法、脂肪染色等,可以判斷特定組織,用於診斷與鑒別診斷。
㈡ 特殊染色及酶組織化學染色是檢查什麼
兩種病理製片方法。形成兩種診斷方法。為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現的異常物質、病變及病原體等,需要分別選用相應的顯示這些成分的染色方法進行染色。包括:膠原纖維染色網狀纖維染色、彈力纖維染色、肌肉組織染色脂肪染色糖原染色粘液染色等。是利用組織細胞內酶具有催化某種反應的特性來檢測酶活性。在一定的條件下全酶進行催化作用,產生一種可見產物,沉澱在酶所在的部位,最終通過顯微鏡對酶的活性進行定位或定量研究。
㈢ II型膠原染色原理和方法
直染料在溶液中被纖維吸附到表面,然後不斷向纖維的無定形區擴散,與纖維大分子形成氫鍵和范德華力的結合。其派生的染料有直接耐曬染料和直接銅鹽染料。染料染色時,為縮短染色時間,染色溫度採用80一90℃
㈣ e染色是看顏色還是數目
細胞e染色
甲基綠和比羅紅將細胞染色後,細胞質呈紅色,細胞核呈綠色。
e組織染色
要看什麼染色,如果是普通的染色對光源沒有要求的,如果是熒光染色,要用熒光顯微鏡或激光共聚焦。
細胞 染色
要進行細胞化學染色的原因是:因為細胞一般都是無色的,即使是在顯微鏡下也不容易分辨,一般會滴上1.2滴碘酒用以染色,以便於更好的觀察細胞。
切片太薄,自然色素(如果含有)極其稀薄,不經染色的切片是幾近無色透明,不便於觀察。選擇合適的染料染色,可以使細胞壁及各細胞器顯示不同的顏色深淺,便於觀察。
細胞膜染色
細胞膜能夠選擇性吸收礦物元素,通過主動轉運將碘液送入細胞核內。簡單的說只是因為細胞核吸收了碘液而產生了碘液本身的黃褐色。 補充: 值得注意的是,在碘液染色觀察時不要把細胞核和蛋白核混淆,蛋白核遇碘後其上的澱粉變為藍紫色,而細胞核則呈棕黃色。
細胞培養染色
在實驗中,為了能夠清楚地觀察到目標組織或細胞,通常會採用染色的方式進行直觀驗證。面對形態各異的組織和細胞,研究學者們想到了多種多樣的染色方法以佐證自己的實驗結果。
HE染色
又稱蘇木素-伊紅染色法,其中蘇木素是Hematoxylin,簡稱H,伊紅是Eosin,簡稱E,這是是普通光學顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。
這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便於全面觀察組織構造,而且適用於各種固定液固定的材料,染色後不易褪色可長期保存。經過HE染色,細胞核被蘇木素染成藍紫色,細胞質被伊紅染色呈粉紅色。
MASSON染色
Masson染色是最為常用的結締組織染色法,主要用於膠原纖維和肌纖維的鑒別染色。對酒精性肝硬化/壞死後性肝硬化及各型肝炎導致的小葉匯管區纖維組織增生程度的差別和腎臟疾病的
油紅O脂肪染色法
顯示組織內的脂肪,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內能高度溶解,可特異性的使組織內甘油三酯等中性脂肪著色。
天狼星紅染色
由於膠原呈鹼性,與酸性染料起強烈反應。天狼星紅就是一種很強的酸性染料,它可以和膠原纖維反應使膠原纖維產生明顯的雙折光現象。天狼星紅染色膠原纖維呈紅色,胞核呈綠色,余呈黃色。偏光顯微鏡可以分辨不同的纖維類型。
尼氏染色
在神經元細胞體中細胞質是尼氏顆粒,即能夠代表粗面內質網並在很多神經元中產生特異的斑點狀嗜鹼性表現的嗜鹼性顆粒。
尼氏體的數量會隨著生理狀態的變化而變化,因此常用一些鹼性染料如硫堇、亞甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色以觀察細胞變化。
LFB染色
勞克堅牢藍(LuxolFastBlue,LFB)屬於銅-酞箐染料,在酒精溶液中具有與髓鞘磷脂結合的染色特性。應用LFB髓鞘染色可以很好地顯示出神經組織的髓鞘結構。
免疫組化染色
免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。
細胞器染色
因為一般細胞顏色以透明為主,滴紅墨水染色後會清楚,利於觀察。
在科研工作中根據每一種細胞以及細胞器對不同染色劑的著色都有所不同,因此常使用不同染色區分各種細胞以及了解其形態和功能狀態。
細胞學染色方法
常用的細胞染色方法有:
1、簡單染色法,常用鹼性染料如美藍等進行簡單染色;
2、革蘭氏染色法,主要包括結晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程;
3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成;
4、吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結果和瑞特染色法基本相同;
5、細胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結合。
染色是生物顯微玻片標本製作中最重要的環節之一。先把破壞細胞膜的選擇透過性,再使用染色劑,將生物組織浸入染色劑內,使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產生不同的折射率,以便觀察。
另外,銀染法也較常用。當組織塊浸入硝酸銀溶液中時,有的組織結構能直接把硝酸銀還原,使銀粒附於其上,呈棕黑色或棕黃色。有些結構本身對硝酸銀無直接還原能力,若加入還原劑,可使硝酸銀還原沉澱顯色。
細胞化學染色提示
在細胞核中,易被鹼性染料染成深色的物質是染色質.染色質的化學組成主要是DNA和蛋白質.
細胞核是遺傳信息庫,細胞核中含有染色體,染色體是容易被鹼性染料如碘液染成深色的物質,因此細胞結構中容易被染色的結構是細胞核.
e 細胞
ki67染色好,抗原KI-67也稱為Ki-67或MKI67,是一種在人類中由MKI67 基因(由單克隆抗體Ki-67識別的抗原)編碼的蛋白質。
功能
抗原KI-67是一種核蛋白,與細胞增殖有關,可能是細胞增殖所必需的。此外,它與核糖體RNA轉錄有關。KI-67抗原的失活導致核糖體RNA合成受到抑制。
㈤ 膠原纖維的膠原蛋白的染色
膠原纖維在HE染色法被染成粉紅色,除此之外,它還可以用一些陰離子的染料來進行染色,如用淡綠可把它們染為綠色,用甲苯胺藍可將其染為藍色,在網狀纖維染色中,如不加以處理,它又可被染為棕黃色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫細胞化學染色中,膠原纖維由於含的負電荷過多,常導致某些非特異性的染色,應特別注意。
(一).Van Gieson(V.G)染色法
I. 試劑的配製:
weigert氏蘇木素
A液: 蘇木素 1g (haematoxylin)
無水酒精 100ml
B液: 30%三氯化鐵 4ml (ferric chloride)
蒸餾水 95ml
鹽酸 1ml
II.Van Gieson氏液
A液: 酸性品紅 1g(acid fuchsin)
蒸餾水 100ml
B液: 苦味酸飽和水溶液,(1.22%)(picric acid)
注意事項:
1、Weigert氏蘇木素臨用前取A液和B液等份混合,幾個小時內用完,最長不得超過一天。
2、蘇木素配後經二十多天才能成熟,必須提前配製。
3、該液能抵抗弱酸性染液,對已著染的細胞核在酸性染液的作用,不易被脫去顏色,如果不特別深染,則無須分化。
4、Van Gieson氏液取B液9ml,加入A液1ml,即可使用。
操作方法:(後面的各種方法,如沒特別說明,都在室溫下進行)
1、切片脫蠟至水,
2、用Weigert氏蘇木素染20min,
3、水洗,必要時可分化,
4、流水沖洗10min,
5、染Van Gieson氏液1min,
6、用95%酒精快速分化,
7、無水酒精脫水,二甲苯透明,封固。
結果:
膠原纖維:鮮紅色,肌纖維: 黃色,紅細胞: 黃色,細胞核: 藍黑或灰色。
注意事項:
1、該法染完的切片,較易褪色如需照相,應盡早完成。
2、蘇木素染液如為棕色或沉澱,應將其拋棄。
3、分化用的酒精,應使用95%以上的酒精,低濃度的酒精褪色能力強,容易將著染的紅色脫去。
4、切片也可以用天青蘭蘇木素替代Weigert氏蘇木素,染核效果基本一樣。
(二).Masson氏三色染色法:天青石藍液的配製:天青石藍(Celestin blue B) 1.25g硫酸鐵銨(ferric ammonium sulfate)1.25g
蒸餾水 200ml
甘油(glycerin) 30ml
將前兩者溶於蒸餾水中,然後煮沸,冷卻後過濾,再加入甘油和麝香草酚。
Mayer氏蘇木素的配製蘇木素 0.1g蒸餾水 100ml
鉀明礬(Potassium alum) 5g
檸檬酸(Citric acid) 0.1g
水合氯醛(Chloral hydrate)20mg
配製法:
將蘇木素放入蒸餾水中,用玻棒不停地攪拌直至完全溶解,再依次加入鉀明礬,檸檬酸和水合氯醛,再繼續攪拌,最後加入碘酸鈉,攪拌均勻,即可使用。
麗春紅酸性品紅液的配製:麗春紅(ponceau 2R) 0.7g
酸性品紅(acid fuchsin)0.3g
冰醋酸 1ml
蒸餾水 99ml
操作方法:1
、切片脫蠟至水,2、1%高錳酸鉀氧化切片5min,
3、水洗,草酸漂白1min,
4、水洗,蒸餾水洗,天青石藍染5min水洗,
5、摔去余液不用水洗,滴染Mayer氏蘇木素3-5min,
6、流水沖洗5-10min,
7、麗春紅苦味酸飽和液染5min,
8、1%醋酸水溶液洗,
9、1%磷鉬酸分化切片約5min,
10、蒸餾水洗,
11、1%淡綠或者甲苯胺藍滴染30s,
12、1%醋酸水溶液洗切片,
13、95%酒精分化,無水酒精脫水,
14、二甲苯透明,中性樹膠封固。
結果:膠原纖維呈現綠色或藍色,細胞核呈現灰黑或灰藍色,肌肉和胞質紅細胞呈現紅色。
注意事項:①Masson氏染液配完後保存時間不宜過長,如有可能,每次染色以染配為佳,如何可使著色顏色的鮮艷性。②切片在各級酒精中脫水,時間不宜過長,否則會將著染的顏色脫去。③切片保存所著染的顏色顯長為1—2年以後會隨著時間的延長而逐漸褪去,應予注意。④磷鉬酸和磷鎢酸在染色法中的作用各有不同,磷鉬酸作用於膠原纖維,磷鎢酸作用於纖維膠]質,肌膠質,神經膠質和上皮纖維等。上述兩種試劑的使用,可以促進組織有選擇的染色,它們可以減少背景和核的染色,使背景清晰。⑤如有可能,在組織固定時,用Zenker氏固定液固定,如此對染色效果將更好。
臨床應用:1
、與澱粉樣物的區別: 膠原纖維發生病變如壞死或透明變性時,它與澱粉樣物在HE染色時被染為粉紅色,不好區別。應用V.G染色法,能將膠原纖維染為粉紅色,而澱粉樣物將被染為黃色。2、應用與間胚葉來源腫瘤的區別:
如纖維瘤(肉瘤),平滑肌、橫紋肌瘤(肉瘤),神經纖維瘤(肉瘤)、惡性纖維組織細胞瘤等,由於都含有大量的纖維,HE染色均為紅色。應用Masson氏染色法,可將膠原纖維染色藍色或綠色,肌源性組織被染為紅色。
3、應用與其他慢性炎症的區別。
如慢性闌尾炎,疤痕癒合時,纖維愈復病灶可被染為鮮紅色或藍綠色,SARS病患者癒合後有的肺部可出現疤痕,粘連,此時可顯示藍色或綠色。
可用於鑒定肝硬化及創傷組織的修復程度。肝硬化時的肝組織有許多不同大小的假小葉,用上述方法顯示時,可顯示出不同的組織結構。V.G法可將包繞假小葉的膠原纖維染成紅色,膽汗呈綠色。
小結
膠原纖維在上述的兩種方法中著染不同的顏色,如V.G著染紅色,Masson氏著染藍色或綠色。這主要取決於染料對組織的滲透、吸附、沉澱和反應,而染料分子量的大小是關鍵,分子量小的分子移動迅速,行動快,對組織的滲透性較強,能穿透較為緻密的組織。分子量大的染料分子移動較遲緩,滲透力較弱,可作用於組織強求構較疏鬆的組織,染色時間可適當延長。
在相關的染料中,分子量從小到大依次排列是:苦味酸(黃色):229.11;桔黃G(黃色):452;麗春紅(紅色):480.42;酸性品紅(紅色):585.53;苯胺藍(藍色):737.72;亮綠(綠色):792.72;甲基藍(藍色)>99。
染色是一個較為復雜的化學反應和物理作用的雙重過程,在應用這些方法時,根據不同情況,選擇不同的方法,認真地操作,方能獲得最佳的效果。
㈥ 關於膠原纖維的描述錯誤的是
關於膠原纖維的描述錯誤的是:膠原纖維韌性大,抗拉力強,具有彈性。
膠原纖維在疏鬆結締組織中排列成束,彼此交織吻合,纖維束常有分支。纖維具有韌性,抗牽引力強。電鏡觀察,膠原纖維由更細的微原纖維組成。
微原纖維有特殊的橫帶,其周期為64nm。每條微原纖維有一序列的明暗帶。暗帶中比明帶有較多游離的化學根,所以貯留較多的電鏡切片染色劑。
膠原纖維:染成粉紅色,束狀,其中的原纖維大多看不清。
膠原纖維主要含有膠原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨和羥脯氨酸等。膠原是唯一含羥脯氨酸較多的蛋白質,因此,測定羥脯氨酸的量能確定組織中膠原的含量。膠原蛋白佔全身蛋白質的30%。聚合成膠原的微原纖維的蛋白質分子稱為原膠原分子 。
膠原纖維是三種纖維中分布最廣泛,含量最多的一種纖維。廣泛分布於各臟器內。在皮膚、鞏膜和肌腱最為豐富。膠原纖維染色主要用於和肌纖維的鑒別。
膠原纖維功能包括:
減緩人的組織衰老速度,特點包括:提高強度、提高耐磨性,具有耐刺穿性。
以上內容參考:醫學網路-膠原纖維
㈦ 特殊染色體及酶組織化學染色是檢查什麼的啊
一般是用在血液病相關的檢查上的。
㈧ 常見的真菌塗片或組織切片的特殊染色有哪些各適用於
常見的真菌塗片或組織切片的特殊染色有哪些各適用於
凡是間葉組織細胞都可產生網織纖維,也可產生膠原纖維,纖維母細胞是產生膠原纖維的主要細胞。膠原纖維是結締組織中的主要纖維,是結締組織中起支持作用的重要部分,具有一定的韌性和堅固性,能抵抗一定的牽引力而不致撕裂。膠原纖維是原膠原互相錯開1/4平行排列交聯成膠原原纖維,膠原原纖維再聚合成較寬的結構。按膠原的化學成分可分為15種,間質中的膠原纖維主要由I、Ⅱ、Ⅲ型膠原組成,新鮮時呈白色,故又稱為白纖維。在HE染色中呈均一的粉紅色,與周圍間質區分不是很清楚。染色後,便可明顯區別開來,易於觀察病變時膠原纖維的變化。
應用:
(1)器官硬化性疾病的觀察:如肝硬變、心肌瘢痕的觀察,膠原染色更易於觀察診斷。
(2)瘢痕與澱粉樣物質鑒別:前者膠原纖維染色為陽性,後者為陰性。
(3)骨纖維異常增殖病與骨纖維化的鑒別:利用膠原纖維染色可較易觀察前者膠原纖維紊亂,縱橫交錯,後者較規則。 網狀纖維是非常細而短的纖維,大量堆積時則形成緻密的網狀,故有網狀纖維之稱。疏鬆組織中網狀纖維比較少,它多分布在結締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內,毛細血管周圍以及造血器官,內分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網狀纖維。
網狀纖維的變化,反映了疾病的發生和發展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網狀纖維的多少、粗細緊密、疏鬆或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,尤其是在臨床病理診斷中,可根據其存在和分布來鑒別癌與肉瘤。而在HE染色標本上,網狀纖維不易顯色。所以網狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。
應用:
(1)癌與肉瘤的鑒別:在網狀纖維染色下可清楚顯示出肉瘤每一個細胞周圍有網狀纖維圍繞,或似為團狀或巢狀的瘤組織,但團巢內仍有破碎的網狀纖維,癌顯示為明顯巢或索狀,巢內無網狀纖維。
(2)骨基質與濃縮的分泌物、血漿或水腫液的鑒別:骨基質內有網狀纖維,而後者無。
(3)炎症細胞與癌細胞的鑒別:在支氣管活檢中有時擠壓較重,一些深染的細胞擠壓成團,難以判斷是受擠壓的炎症細胞。這種病例染網狀纖維有利於鑒別,炎症細胞不成巢,小細胞癌可有巢狀或索狀結構。
(4)壞死與死後自溶的鑒別:在胰腺是生前壞死還是死後自溶有時很難鑒別,染網狀纖維,前者網狀纖維支架破壞較嚴重,結構塌陷,而後者雖然死後自溶嚴重,但網狀纖維支架結構常可保存。
(5)血管性腫瘤的鑒別:有時血管內皮細胞瘤與血管周圍細胞瘤常規染色較難鑒別,網狀纖維染色,可顯示清楚的血管結構,看清腫瘤細胞與血管關系有利於鑒別。內皮細胞性腫瘤,腫瘤位於血管壁的網狀支架內,而外周細胞則圍繞著血管壁或與之呈放射狀排列。
(6)肝硬化及慢性肝炎肝細胞碎片狀壞死或纖維化的鑒別:
a.慢性活動性肝炎壞死灶有時較難辨認,染網狀纖維顯示局部有網狀支架的破壞與崩解,結合HE切片較易判斷小灶狀壞死。
b.慢性活動性肝炎輕度纖維化,在網狀纖維染色下較易判斷。
c.慢性淤血性肝硬變有時較難判斷,網狀纖維較易觀察中央靜脈及小葉下靜脈通道上的網狀纖維增生。增生較明顯,有反包圍現象,形成假小葉結構,就可診斷淤血性肝硬變。
(7)萎縮性胃炎的診斷:在HE染色胃粘膜有無萎縮較難判斷,網狀纖維染色可較清楚顯示胃粘膜正常結構破壞,間質纖維增生,有助於胃粘膜萎縮的診斷。
(8)有助於癌浸潤的診斷,有些上皮性腫瘤是否早期突破基底膜形成浸潤,HE染色難以確診,而網狀纖維染色可較清楚顯示基底膜,較易確定基底膜有無早期浸潤破壞現象。
(9)腦內原發瘤與轉移瘤的鑒別:腦內絕大多數腫瘤網狀纖維很少,只有血管周圍有少量網狀纖維,而轉移癌及肉瘤都有明顯的網狀纖維,故有利於鑒別。
(10)非乾酪性結核與結節病的鑒別:後者結節內及結節周圍較早出現明顯的網狀纖維,觀察此有利於二者鑒別。
㈨ 膠原纖維的功能特點
膠原纖維功能包括:減緩人的組織衰老速度,特點包括:提高強度、提高耐磨性,具有耐刺穿性。
膠原纖維作為一種營養品,越來越受到營養專家的推崇,可是有很多消費者,並不了解膠原纖維的功能和特點,那麼膠原纖維的功能特點都有哪些呢?下面讓我們一起去了解吧。
膠原纖維是主要含有膠原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨和羥脯氨酸等的纖維組合物。膠原纖維是三種纖維中分布最廣泛,含量最多的一種纖維。
膠原纖維是真皮中的主要成分,占真皮全部纖維質量的95%到98%。新鮮的膠原纖維呈白色,故又稱白纖維。在HE染色標本中,膠原纖維被染成粉紅色,較粗大,直徑0.5到20um,成束分布,排列緊密,並交織成網。
膠原是唯一含羥脯氨酸較多的蛋白質,因此,測定羥脯氨酸的量能確定組織中膠原的含量。膠原蛋白佔全身蛋白質的30%。聚合成膠原的微原纖維的蛋白質分子稱為原膠原分子 。
膠原纖維是主要含有膠原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸等的纖維組合物。膠原纖維是三種纖維中分布最廣泛,含量最多的一種纖維。廣泛分布於各臟器內,在皮膚、鞏膜和肌腱最為豐富。膠原纖維染色主要用於和肌纖維的鑒別。
膠原纖維是真皮中的主要成分,占真皮全部纖維質量的95%-98%.新鮮的膠原纖維呈白色,故又稱白纖維。在HE染色標本中,膠原纖維被染成粉紅色,較粗大,直徑0.5-20um,成束分布,排列緊密,交織成網。