⑴ 注射膠原酶多少錢一支
病情分析: 注射膠原酶兩月以後懷孕一般不會影響胎兒的。意見建議:您好,建議您注意飲食營養,多休息,不要吃辛辣刺激的食物,做好產檢就好,產檢胎兒健康的話就沒事的。
⑵ 膠原酶治療椎間盤突出效果好嗎
椎間盤突出就是脊椎骨之間的軟組織受到壓力變形,突出於原來的位置擠壓了神經出現各種症狀,最好的治療辦法就是減輕脊椎和椎間盤所受的壓力。使脊椎和椎間盤得到放鬆和恢復,促進脊椎周圍的血液循環,但不要去做什麼正骨或什麼按摩的,搞不好會造成其他問題。比較好的鍛煉方法是游泳,拉單杠等。如果你是長時間坐著工作的人,現在有一種新型座椅能有效減輕脊椎和椎間盤所受的壓力。如你感興趣可以到我的博客里看看。
⑶ 如何配置膠原酶2u/ml的膠原酶溶液,需要多少毫克膠原酶
梯度的配置一般高往低逐步稀釋,一般現配一個大濃度的儲備液你可以配1g/ml的,方法是稱取100g的樣品溶解後用100ml的容量瓶定容
50mg/ml的配置:量取5ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
40mg/ml:量取4ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
30mg/ml:量取3ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
,20mg/ml:量取2ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
10mg/ml:量取1ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
望採納,謝謝
⑷ 雞原代肝細胞分離時需要多少組織
原代培養心肌細胞作為一種主要的研究模型,被廣泛應用於心血管研究之中.我們實驗室經過長期嘗試,摸索出了一些行之有效的方法,並積累了一些經驗,現總結如下:
1新生大鼠鼠齡的選擇新生大鼠心肌細胞在出生後3 d內具有部分的增殖能力,成年大鼠心肌細胞則為終末分化細胞,不再具有分裂增殖能力.因此,大鼠出生時間越短,其心肌細胞分離後成活率越高,越容易貼壁生長.大量觀測表明,選擇1~3 d齡大鼠分離其心肌細胞進行原代培養較為理想.其中尤以半日齡大鼠心肌細胞培養效果最佳.
2消化酶的選擇及使用
新生大鼠心肌細胞的分離可採用組織塊法和消化法,前者因不易獲得密度均一的細胞且難控製成纖維細胞的生長而較少採用.消化法中常使用的酶有3種:胰蛋白酶、膠原酶I或Ⅱ以及透明質酸酶.透明質酸酶多與胰蛋白酶或膠原酶聯合應用.胰蛋白酶作用較強,容易造成心肌細胞損壞.膠原酶作用較緩和,能消化細胞間質中的膠原纖維以釋放細胞,對細胞損傷小,且在新生大鼠心肌組織,以膠原I為主,故我們選用膠原酶I.文獻報道膠原酶的工作濃度一般在0.6~1 g?L1,我們使用的為0.8 g?L1.膠原酶最好現用現配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌細胞對酶消化極為敏感.消化過度可使肌原纖維出現萎縮,細胞死亡率增加或喪失貼壁能力及搏動能力;消化不足,細胞聚集成團,無法分清細胞邊界,難以形態學觀測.消化過程中使用磁力攪拌器時應注意1)轉速一般控制在60~80 r?min1左右.(2)每次消化的時間須結合消化酶濃度確定.(3)將粘附在攪拌子上的心肌組織吹散,使酶液充分接觸組織.(4)適宜溫度為35~37℃.(5)當組織由紅轉白呈半透明狀態時,應停止消化.
4接種的細胞密度
心肌細胞接種密度不僅影響細胞間的相互接觸,進而影響細胞對肥大刺激的反應,而且影響長期培養細胞的成活率.接種細胞的絕對數量應經精確計算.一般而言,應根據實驗的觀測目的決定單位面積上的細胞數量.例如,如作形態學觀測,六孔板中每孔的接種細胞數量應控制在1×105~2×105個;若需收獲心肌細胞作mRNA或蛋白表達水平的觀測,則每孔的接種密度可增加到5×105~6×105個.
⑸ 腰間盤突出注射膠原酶後有哪些症狀大概要多久才能好
你好,根據你所說你這個情況可能是由於腰椎間盤突出引起的,一般可能會出現腰腿疼痛,如果壓迫到馬尾神經可能是出現嚴重的腰腿痛甚至大小便失禁癱瘓等,建議去醫院做一個腰椎ct檢查,可以採取針灸,牽引等治療,如果較嚴重需要採取手術治療
⑹ 2um等於多少mg/ml
5mg。2um等於5mg/ml,以膠原酶為例,U與mg之間的換算關系見圖對於Ⅱ型膠原酶1mg相當於0.4U。
⑺ 膠原酶腰椎間盤溶解術的副作用及並發症
1、術後疼痛椎間盤內注射的患者較易發生術後疼痛加劇,究其機理,椎間盤容積有限,膠原纖維在膠原酶作用下出現降解,導致椎間盤內容物增加和椎間盤內壓增高,椎管內竇神經受到激惹後出現。疼痛持續時間較長的原因是:椎間盤是機體中最大的無血供組織,其物質代謝完全依靠軟骨板的滲透或經纖維環彌散,代謝速度較慢。另外,這種疼痛反應多呈單波峰曲線,即注葯後基本無痛,伴隨溶解物的增加,疼痛反應逐漸加重直至達到高峰。隨著溶解物的吸收,椎間盤內壓逐漸減低,疼痛反應也逐漸減輕直至消失。同時,這種疼痛反應還與患者的纖維環破裂程度、注入膠原酶的濃度和液體量以及患者對疼痛的耐受程度等具有直接關系。通過臨床觀察,以400~600U/1ml注入者疼痛反應輕,1200U/2ml注入者疼痛反應重。對於疼痛加劇患者,在疼痛高峰期可下肢截癱使用麻醉性鎮痛葯如哌替啶或嗎啡來緩解疼痛。
2、尿瀦留與腸麻痹
此兩種副作用偶見於椎間盤內注射的患者。其機制是由於椎間盤內壓增加後椎管內竇神經受到刺激引起自主神經系統功能紊亂所致。為預防此副作用,可在治療前給予灌腸,口服緩瀉劑或酌情給予小劑量的利尿葯。多食用粗纖維食物,增加腸蠕動。
3、脊柱失穩性腰背痛
此種情況可發生在進行椎間盤內注射的患者,與膠原酶的應用劑量和濃度具有直接關系,人體腰椎間隙(椎間盤厚度)大約為9mm,椎間盤被溶解後椎間隙變窄,脊椎小關節出現重疊,椎間關節的關節囊有竇返神經分布,而竇返神經對牽拉反應較為敏感,這樣就會出現反射性腰背部不適感和疼痛。預防的措施主要是依據臨床體征並結合影像學特點確定合適的膠原酶用量。
4、雖然有關膠原酶椎間盤溶解術的過敏反應在國內外均無報道,但作為一種生物制劑,其存在發生過敏反應的高度可能性。為何無過敏反應的報道,可能與臨床注葯前採取相應的抗過敏措施等較為妥當有關。故在臨床進行膠原酶椎間盤溶解術時,注射後首先應觀察患者有無過敏反應的發生,一旦出現,應立即給予對症處理,原則與其他葯物過敏相同,因為膠原酶本身沒有特異性的拮抗葯物,同時也無法在治療前進行過敏試驗。
5、椎間隙感染
椎間隙感染患者的主要臨床表現為腰背部肌肉痙攣明顯,腰痛加劇,有深壓痛,白細胞計數和分類正常,血沉明顯增快,早期X線檢查無特異徵象。大約在1個月後出現注葯椎間隙變窄,椎體骨質破壞,伴有硬化,3~4個月出現椎體融合。
臨床處理包括給予抗生素,腰部制動或雙下肢皮牽引,必要時行雙髖人字石膏固定,固定和應用抗生素的時間應為6周以上。椎體融合後腰背痛症狀即可消失。
6、神經損傷
造成神經損傷的主要原因是在穿刺過程中誤傷脊髓神經外膜,高濃度的膠原酶溶液使神經根發生脫水變性等。嚴重者可發生下肢截癱。國內發生下肢截癱的已有多例,有的還是知名專家所為,教訓慘痛。對此,應採取如下預防措施:①盡量在局部麻醉下進行穿刺,進針速度應緩慢。②一旦發生誤穿神經根時應停止操作,等7~10d後再行穿刺。③注葯前應認真行回抽檢查,如有血液或腦脊液應放棄注射。④如出現神經損傷的體征,應每天檢查受累神經根區的感覺、肌力、深反射、病理反射、腦膜刺激症狀、腰背痛情況、體溫變化等。同時給予大劑量的神經營養葯物,並同時選用針灸、電刺激、穴位注射或埋線等輔助治療手段。合並有肌肉萎縮者,應及時進行功能鍛煉。神經性肌肉癱瘓者,在經肌電圖檢查證實後可擇期行肌腱移位術或相應關節的融合術。
7、繼發性腰椎管狹窄
關於膠原酶椎間盤溶解術引起繼發性腰椎管狹窄的問題,通常認為此種狹窄是由於纖維環溶解椎間隙高度下降所致,以治療後1~2個月時最為明顯,3~6個月時椎間隙又有不同程度的增寬;6個月以後椎間隙不再有變化。在動物實驗時觀察到,在實施椎間盤溶解術之後的3周至2年內,將實驗動物分批處死後可見被膠原酶溶解的椎間盤組織被透明纖維軟骨替代充填。據此推測,椎間隙高度在椎間盤溶解術之後先是變窄,後有所恢復是由於透明纖維軟骨充填所致。所以,施行椎間盤溶解術的患者,應有3個月左右的恢復和適應時間。
⑻ 聽說微創臭氧是治療腰脫最好的辦法哪裡可以做此手術
腰椎間盤突出症是骨科常見多發病,經皮臭氧髓核消融術治療腰椎間盤突出症是近年來國際上發展起來的一項新技術〔1〕,國內這方面報道較少。我院自2004年6月份起開展了此項技術,現將筆者對50例腰椎間盤突出症患者的治療情況報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 50例患者,男32例,女18例,年齡20歲~60歲,平均年齡43歲。病程6周~5 a均有典型臨床症狀、體征,經CT或MRI證實為腰椎間盤突出症。共有70個椎間盤突出,其中L3~4 10個、L4~5 32個、L5~S1 28個。每例患者所有突出的椎間盤均注射臭氧治療。基本按照如下適應證、禁忌證選擇病例。適應證:典型臨床病史、症狀、體征如持續或反復腰腿痛,跛行,查體有感覺,運動及反射的定位體征;CT、MRI或椎管造影符合椎間盤突出症影像;各種保守治療效果不佳患者;外科手術治療及其他微創介入治療的效果不佳患者。禁忌證:椎間盤所在間隙明顯狹窄;嚴重的椎管狹窄症,側隱窩狹窄;巨大椎間盤鈣化斑占突出物1/2以上;合並腰椎滑脫Ⅰ度以上;合並脊椎結核、腫瘤等骨病;合並嚴重心、肺等系統性疾病,身體虛弱者。其中有5例合並椎管狹窄的患者,按患者的要求也進行注射臭氧治療。
1.2 方法 使用日本東芝AsteionVF型CT機,醫用O3發生器(山東淄博悅華臭氧科技有限公司生產),21 G,150 mm穿刺抽吸針等。術前用0.9%氯化鈉250 ml,地塞米松5 mg,靜脈點滴,以防止膠原酶過敏。患者呈俯卧位行CT掃描,確定穿刺點的位置。常規消毒,局部以2%的利多卡因麻醉,於患側後正中線旁開8 cm~12 cm進針,經安全三角區進入椎間盤,使針尖盡量位於椎間盤的中心位置,對於髂骨翼較高導致L4~5,L5~S1 間隙穿刺困難者可用椎體後路從正中旁開1 cm左右進針,穿破黃韌帶後,注入過濾後的空氣(<50 ml),將硬膜囊推向一側,然後直接將穿刺針進入突出物或間盤內,CT確認穿刺成功後用一次性無菌注射器抽取臭氧5 ml~20 ml,濃度為40 μg/ml~70 μg/ml,注入椎間盤內以及突出物內,可見氣體在盤內的分散情況。個別患者盤內臭氧氧化效果欠佳者或因纖維環破損臭氧在盤內存留較少者,我們加用了膠原酶600 U注入椎間盤內。對於根性症狀較重的患者,可退針至椎間孔後緣,於椎旁組織內注入臭氧10 ml及得寶松注射液1 ml。術後絕對卧床休息1周,應用抗生素以防感染,疼痛反應較重者給予止痛劑。
2 結果
本組病例均採用盤內注射以及椎體後路突出物內注射法,穿刺成功率為100%。療效評價依據MacNab腰腿痛手術評價標准進行〔2〕,顯效:恢復工作能力,偶有腰痛或腿痛。有效:工作能力基本恢復,間歇性輕度腰痛或放射痛。無效:無工作能力,疼痛無改善,神經根損傷體征陽性。50例均通過電話以提問—回答的方式進行隨訪,隨訪時間3個月~6個月,顯效13例,有效33例,無效4例,總有效率達92%,一般在術後半個月~1個月時獲得療效,10例患者在術後短時間內(3 d~5 d)即獲得明顯療效,10例患者直到3個月後才獲得療效。15例患者配合注射了膠原酶600 U,取得了較好的效果。4例患者2個月後進行了第2次臭氧注射,也獲得了滿意的療效。
3 討論
腰椎間盤突出症是骨科常見病,其發病的主要原因是在椎間盤退變的基礎上,尤其是當纖維環的退變較包容的髓核退變快時,易出現椎間盤膨出突出〔3〕。在國外臭氧消融術已確認是免除開刀治療腰椎間盤突出症最有希望的手段〔1〕。其作用機制是利用臭氧的強氧化性,氧化髓核蛋白多糖,破壞髓核細胞來達到使突出的髓核回縮,神經根壓迫緩解的目的〔4〕。另外臭氧通過拮抗炎症反應中釋放的免疫因子,炎性介質,減輕神經根水腫及粘連,達到抗炎的目的〔6〕。臭氧可抑制無髓損傷感受器纖維,激活機體中的抗損傷系統,並通過刺激抑制性中間神經元釋放腦啡呔而起鎮痛作用〔5,6〕。臨床上部分患者治療後短時間內獲得明顯療效,可能是神經根周圍炎症所致有關。本組病例採用了椎間盤內以及突出物內注射臭氧,根性症狀較重的患者椎旁間隙內也注射了臭氧。注射量掌握在5 ml~20 ml,個別患者推注壓力極高,強力推注會使纖維環破損。我們體會注射量雖然有多有少但療效均能達到滿意,關鍵在於嚴格選擇適應證的基礎上將針穿刺進入髓核聚集處,才能有效達到降壓目的,一般認為椎間隙後1/3為理想進針部位。一般1次注射即可達到目的,本組有4例1次療效欠佳者,2個月後進行了2次注射,療效欠佳的原因,一般考慮前一次進針位置可能偏離髓核主要聚集處。對於病程長臭氧溶解欠佳者及因纖維環破損致臭氧在盤內存留較少者補充注射膠原酶600 U,15例患者取得了較好的效果。聯合應用注射臭氧及膠原酶,不僅減輕了術後的疼痛,而且大大降低了感染的機會同時增強了療效。另外本組有5例合並椎管狹窄者採用注射臭氧治療後有3例取得了明顯療效,因此說合並椎管狹窄不是絕對禁忌證,關鍵是椎間盤突出和膨出是否為主要的壓迫因素。臭氧消融術是目前最安全的介入治療,具有操作簡單,幾乎無損傷感染機會少的特點,本組病例未發現1例椎間隙感染的現象。本組臨床觀察注入臭氧後部分患者出現下腹部輕度脹感,腰部周圍酸困當晚排尿費力,以及神經根騷擾症狀,一般無需處理,24 h後基本自行緩解,因此說注射臭氧治療椎間盤突出是一種安全有效的方法。
⑼ 腫瘤細胞消化液中膠原酶、透明質酸、DNA酶配合什麼比例比較好膠原酶用哪個型的謝謝您的關注和回答
不同腫瘤組織 其中各種蛋白種類、比例各不相同,則相應消化酶的種類和比例也可適當改變,若要制備腫瘤懸液,個人推薦 先查找中英文文獻,參考文獻中的消化方法
⑽ 膠原酶和胰酶在細胞原代培養中的區別
膠原酶在上皮類細胞原代培養時經常使用,作用對象是膠原組織,因此不容易對細胞產生損傷。消化原代培養的上皮類細胞用此酶效果更好。
胰蛋白酶(簡稱胰酶)是廣泛應用的消化劑.胰蛋白酶是一種胰臟製品,對蛋白質有水介作用,主要作用於賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細胞間質中的蛋白質水介而使細胞分散開,在常用的蛋白酶中由於產品的活力和純度不同,對細胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對細胞的作用,取決於細胞類型、酶的活力、配製的濃度、消化的溫度、無機鹽離子、pH以及消化時間的長短等.
膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用.適於消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質有較好的消化作用,對細胞本身影響不大,可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害.該酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養液配製,即操作簡便又可提高細胞成活率,最終濃度200u/mL或0.0.3mg/mL.此酶消化作用緩和,無需機械振盪,但膠原酶價格較高,大量使用將增加實驗成本.