1. 膠原酶和胰酶在細胞原代培養中的區別
膠原酶在上皮類細胞原代培養時經常使用,作用對象是膠原組織,因此不容易對細胞產生損傷。消化原代培養的上皮類細胞用此酶效果更好。
胰蛋白酶(簡稱胰酶)是廣泛應用的消化劑.胰蛋白酶是一種胰臟製品,對蛋白質有水介作用,主要作用於賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細胞間質中的蛋白質水介而使細胞分散開,在常用的蛋白酶中由於產品的活力和純度不同,對細胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對細胞的作用,取決於細胞類型、酶的活力、配製的濃度、消化的溫度、無機鹽離子、pH以及消化時間的長短等.
膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用.適於消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質有較好的消化作用,對細胞本身影響不大,可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害.該酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養液配製,即操作簡便又可提高細胞成活率,最終濃度200u/mL或0.0.3mg/mL.此酶消化作用緩和,無需機械振盪,但膠原酶價格較高,大量使用將增加實驗成本.
2. 如何配置膠原酶2u/ml的膠原酶溶液,需要多少毫克膠原酶
梯度的配置一般高往低逐步稀釋,一般現配一個大濃度的儲備液你可以配1g/ml的,方法是稱取100g的樣品溶解後用100ml的容量瓶定容
50mg/ml的配置:量取5ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
40mg/ml:量取4ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
30mg/ml:量取3ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
,20mg/ml:量取2ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
10mg/ml:量取1ml的1g/ml儲備液稀釋後,用100ml的容量品定容
望採納,謝謝
3. sigma的膠原酶可以用PBS配製嗎
sigma的膠原酶不可以用PBS配製
需要用HBSS緩沖液(即hanks液)配製,沒有的話用DMEM也行
上述兩種都含有鈣離子,而膠原酶的活性是有賴於鈣離子的
所以sigma的膠原酶不可以用PBS配製
4. 0.1%的四型膠原酶和0.1%的鏈霉蛋白酶如何配製
蛋白酶是水解蛋白質肽鏈的一類酶的總稱。按其降解多肽的方式分成內肽酶和端肽酶兩類。前者可把大分子量的多肽鏈從中間切斷,形成分子量較小的朊和腖;後者又可分為羧肽酶和氨肽酶,它們分別從多肽的游離羧基末端或游離氨基末端逐一將肽鏈水解生成氨基酸。
5. 我想查一下膠原酶的作用
膠原酶是人體內源性膠原酶是指人體內部本身所,具有的膠原酶如牙齦、觸膜等上皮組織和關節滑膜、椎間盤內都不同程度的存在著這種膠原酶它在體內膠原蛋白的分解過程中發揮著不可或缺的作用。要補充膠原酶只要一點點輔助作用對腰間盤明顯根本沒有什麼效果的
6. 誰知道0.2%Ⅱ型膠原酶和10%胎牛血清的怎麼配製
每 100mg 膠原酶加入 50ml 培養液中 攪拌
均勻 用 0.2 微米 微孔濾膜過濾分裝 -20 低溫冰箱保存
450mlDMEM+50mlFBS
7. 腫瘤細胞消化液中膠原酶、透明質酸、DNA酶配合什麼比例比較好膠原酶用哪個型的謝謝您的關注和回答
不同腫瘤組織 其中各種蛋白種類、比例各不相同,則相應消化酶的種類和比例也可適當改變,若要制備腫瘤懸液,個人推薦 先查找中英文文獻,參考文獻中的消化方法
8. 膠原酶的配置
膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配製、消毒滅菌和儲藏。
注意:
因為Ⅰ型膠原酶分子顆粒比胰酶大,不容易過濾,因此可以用蔡式濾器過濾除菌。
鈣、鎂離子和血清成分不會影響膠原酶的消化作用,因而可用BSS(如D-hanks或者PBS)或含血清的培養液配製。
9. 腰椎間盤突出左側側引窩狹窄做了微創射頻消融術和臭氧,又注射了膠原酶,十天了怎麼感覺還不如手術之前好
這是因為 「左側側引窩狹窄」的髓核 很難消掉!而不消掉疼痛就會持續,但膠原酶效果時間周期長可以到1個多月還有效果,3個月才能復原!但疼痛加重估計是膠原酶溶解了上下終板的原因,導致疼痛加重,在膠原酶手術當中常見!
10. 我頸椎盤突出,膠原酶打了已有三個月了怎麼還沒好
目前,治療此類病的方法很多,主要分三大類:一是物理療法,如傳統的牽引、推拿、按摩、火罐、針灸以及通過紅外線、微波等熱、光、電、聲的物理方法治療。二是微創療法,如用激光和膠原酶進行治療。即用激光汽化椎間盤,膠原酶軟化椎間盤,再用椎間盤內窺鏡,取掉壓迫神經的髓核,來根治此病。三是通過手術方法治療,即切除壓迫神經根的髓核。患者宜採取哪種方法治療,需根據病情,對症治療。