① 【急!】如何分析電泳圖【有例子】【大謝啊!!!】
首先先說明一點,我水平很有限的。謝謝了
1.質粒是環狀的,擁有高級結構,而且不同的高級結構在相同條件電泳時擁有不同的遷移率(超螺旋>線性>開環),我不知道你的mark是什麼?所以也不好說。
2.①很多原因造成切開的質粒粘性末端又重新粘接起來
②眾多原因造成質粒根本就沒切開
③比I慢一點,可能質粒被切成線性或者開環的了
3.被切成了兩條,就這樣
② 電泳圖蛋白質的怎麼看
電泳圖蛋白質這樣看。
1、直接將帶條帶的凝膠放在凝膠呈像系統中進行定量分析。
2、將所需要的條帶剪切下來,用X體積蒸餾水溶解,通過紫外分光光度計在280納米條件下,測定吸光度值。根據儀器目前標准曲線計算蛋白質濃度,與蒸餾水體積相乘,得到蛋白質質量。
3、如果樣品中含有熒光成分,可以進行熒光分析。
電泳圖譜(electrophoregram)是通過電泳將一個混合物樣品(如血清)在支持介質上分成區帶。但須將電泳條經過染色,使區帶顯示出來而得電泳圖譜。還可以進一步在光密度計上進行掃描而獲得記錄圖譜。
帶電粒子在電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象,稱為電泳。利用帶電粒子在電場中移動速度不同,對混合物各組份進行分離、純化和測定的技術稱為電泳技術。
可分離的樣品即可以是大分子的蛋白質、多糖、核酸,也可以是小分子的氨基酸,核苷等。
電泳方式差別很大.但基本原理是一致的,即:待分離樣品中各種分子在同一pH下帶電性質和帶電量以及分子本身大小、形狀等性質的差異,使帶電分子在電場中產生不同的遷移速度,從而實現對樣品分離、鑒定或提純。
③ 我是初學者,跑出來的蛋白電泳圖,那些一排一排的條帶是什麼意思,還有一列一列的
你的膠是考染的嗎?
首先你得先知道一點蛋白質的基本理論知識(不會不知道吧?難道你是學醫的?),或者說蛋白質(包括其他分子,如DNA、RNA等)電泳的原理(或者說是分離原理)。只說蛋白質:蛋白質在正常情況下,一般帶有負電荷,因由不同的蛋白分子因為性質(空間結構以及基團性質)不同而帶電量不同,這樣結合蛋白質分子本身的不同質量,會在電場下(即電泳中)產生不同的移動速度,進而將不同的蛋白分離開。又為了消除蛋白質分子間性質的差別,創造一個單一因素的電泳分離條件,所以在進行蛋白質電泳之前,都會對蛋白質進行變性處理(非變性膠等不在此列),使蛋白質肽鏈打開:SDS是陰離子去污劑,作為變性劑和助溶試劑,它能斷裂分子內和分子間的氫鍵,使分子去折疊,破壞蛋白分子的二、三級結構。而強還原劑如巰基乙醇,二硫蘇糖醇能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS後,分子被解聚成多肽鏈,解聚後的氨基酸側鏈和SDS結合成蛋白- SDS膠束,所帶的負電荷大大超過了蛋白原有的電荷量,這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結構差異。
如此,蛋白質(准確的說應該是變形後的蛋白質或者是蛋白- SDS膠束)便會在電場中根據不同的帶電量- 亦即分子量而分成不同的條帶。每一條帶代表著不同分子量大小的蛋白質組合(一組蛋白質)。
上面只說的是SDS-PAGE膠蛋白質電泳。當然,在電泳後,需要進行染色,你才能看到蛋白條帶(Marker除外,因為它是帶有耦合染料的蛋白質分子或片段)。
④ 蛋白質電泳結果圖怎麼看
看你的目的蛋白是多少bp的,然後就以marker為對照找出目的帶,再看菌液對照是否也有帶,帶的粗淺 ,來說明此條帶為目的帶
⑤ 基因檢測中凝膠電泳圖怎麼看,急求
1、了解目的條帶是多大,mark的條帶是多大,看基因大小是否符合。
2、目的條帶是否清晰,有無拖尾等現象,mark跑的是否清晰,能否表徵條帶的大小。
根據電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區帶電泳。自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電後全部移動,不出現界面,如顯微電泳等。
(5)膠原蛋白電泳圖怎麼看擴展閱讀:
凝膠的分辨能力同凝膠的類型和濃度有關,瓊脂糖凝膠分辨DNA片段的范圍為0.2~50kb,而聚丙烯醯胺凝膠的分辨能力要高一些,能夠分辨較小分子質量的DNA片段,其分辨范圍為1~1000bp。凝膠濃度的高低影響凝膠介質孔隙的大小,濃度越高,孔隙越小,其分辨能力也就越強;反之,濃度降低,孔隙就增大,其分辨能力也就隨之減弱。
⑥ 凝膠電泳圖該怎麼看呢
首先無法僅僅對這一張圖做解釋,需要你標注序號1 2 3 4 5 6指的是什麼;然後說明文中的目的蛋白大小是多少,就清楚了在膠圖中的位置,作為對照;其餘通過誘導獲得的蛋白在相同位置的蛋白表達量是不同的,條帶深說明表達量高。
關於單位,我也是第一次看到,搜索了一下,1 u一1 D(道爾頓),通常使用的單位是kDa。
⑦ 如何看懂圖中的電泳圖譜
m指的是marker,i在這里應該指的是測的樣品,bp指的是鹼基數量,亦即核酸片段的長度
望採納
⑧ 怎麼看蛋白質電泳分析結果圖,以及它的原理是什麼
雙向電泳就是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合。
1.先進行等電聚焦電泳(按照蛋白等電點pI分離):在膠中加入雙性電解質溶液,加上電場後建立穩定PH梯度,蛋白質溶液加入後建立電場,蛋白以不同PI分離開來。
2.然後再進行SDS-PAGE(按照分子大小):將上一步的膠加上橫向電場,同一PI中聚集的蛋白,由於分子量不同而分開。
經染色(一般是銀染)得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。
二維電泳使用於蛋白組學研究,對大批量蛋白篩選鑒定中存在很大優勢,通過不同膠做對比,把不同處的膠割出來單獨鑒定。
通過對尿蛋白電泳的蛋白條帶的特徵進行分析可以判斷尿液中蛋白的分子大小,可以區分出低分子蛋白尿、中分子蛋白尿、高分子蛋白尿和混合型蛋白尿,為臨床腎臟病的診斷提供幫助。如高分子蛋白尿,分子量范圍在5萬到100萬,蛋白條帶包括白蛋白及其以上蛋白條帶,以白蛋白為主。低分子蛋白尿,分子量范圍在1萬到7萬,蛋白條帶在白蛋白和以下蛋白,以小分子蛋白質條帶為主。
⑨ 電泳圖怎麼看
PCR跑膠只能估計產物的大小,所以你這四個圖都是看:
有無產物
產物大小。
在已知目標序列,引物的情況小,可以計算出產物的大小,如果計算和PCR產物大小吻合,而且結果的條帶也很清楚,這個條帶就是特異性產物。
這4個圖,每個膠的孔都加了不同的樣本,所以根據條帶,可以說明原來不同樣本是否有目標序列可以被檢出。
⑩ 怎樣分析蛋白質sds-page電泳圖
根據你目的蛋白大小,比對蛋白marker,吻合或者附近則可以判定蛋白大小正確,至於活性或者特定蛋白還需要其他鑒定方法。